李剑敏
- 作品数：15 被引量：68H指数：5
- 供职机构：湖南中医药高等专科学校更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 熊果酸诱导HL-60细胞凋亡机制的探讨被引量：2
- 2011年
- 目的:本实验拟用熊果酸干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞,体外培养实验,证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用,并通过免疫细胞化学方法检测bcl-2,survivin在熊果酸与该细胞株作用后表达,探讨熊果酸诱导HL-60细胞调亡可能的分子机制。方法:荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA;免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Survivin蛋白。结果:荧光显微镜下观察,80μmol/LUA作用24 h的HL-60细胞可看到典型的细胞凋亡形态学变化;40umol/L、80umol/LUA可使G_0/G_1期细胞增多,出现G_0/G_1期阻滞,S期和G_2/M期细胞数减少,凋亡细胞峰(Sub-G_1)及凋亡率逐渐增高,Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,当UA浓度为40μmol/L时,P<0.01,有显著性差异。结论:UA呈浓度和时间依赖性抑制HL-60细胞增殖,诱导其凋亡机制可能与下调Bcl-2、Survivin蛋白表达有关。
- 张斌李剑敏
- 关键词：熊果酸HL-60细胞凋亡机制
- 丹参对大鼠脑外伤后脑组织含水量、ET、NO变化的影响与意义被引量：3
- 2011年
- [目的]探讨丹参对大鼠重型颅脑损伤后脑组织含水量、脑组织内NO及ET水平动态变化的影响及意义.[方法]采用 Feeney自由落体撞击法建立脑外伤模型.实验分为：丹参治疗组、脑外伤对照组、假手术组,前2组于伤后半小时分别腹腔注射丹参注射液2 mL/（kg·d）和生理盐水2 mL/（kg·d）,假手术组仅开颅,不伤硬膜.干湿重法检测脑损伤1、3、5、7天损失区脑组织含水量、放射免疫分析法测定脑组织内NO及硝酸还原酶法测定ET水平.[结果]脑外伤组各时间点脑组织含水量及ET,NO含量均高于假手术组（P〈0.05）.丹参治疗组各时间点脑组织含水量及ET,NO含量均低于对照组.[结论]脑外伤后ET,NO过量生成,脑组织含水量增加.而丹参能够降低ET、NO的生成,降低脑水肿的程度,达到对脑外伤治疗作用的目的.
- 孙亦明李剑敏蒋宇钢
- 关键词：内皮缩血管肽类
- 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)融合EGFP真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2005年
- 目的构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并鉴定其在小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞能否正确表达。方法PCR扩增M-CSF基因,定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体,构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,脂质体介导将pEGFP-M-CSF转染入NIH3T3细胞,以一步法RT-PCR检测其在NIH3T3细胞中的表达情况。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并在NIH3T3细胞中成功地表达了融合荧光蛋白,RT-PCR检测结果显示RT-PCR扩增产物与M-CSF目的基因片段大小相符,确实源于重组质粒转录后的mR-NA。结论真核表达重组体pEGFP-M-CSF的成功构建及在体外真核细胞中有效表达,为进一步研究M-CSF在真核细胞中的信号调控奠定了一定的实验基础。
- 张晓红唐圣松李剑敏龙治锋
- 关键词：基因表达
- 设计性、综合性实验在医学大专院校药理学教学中的应用调查研究被引量：7
- 2013年
- 目的探讨设计性、综合性实验在药理实验教学中的应用及效果。方法进行药理学设计性、综合性实验方案的制订与实施并进行各项评价。结果设计性、综合性实验的开设能够提高学生的学习兴趣、实践能力和探索精神。结论设计性、综合性实验方案的制订与实施可培养学生的科研思维及创新能力。
- 李剑敏张斌何志军唐瑰琦
- 关键词：药理学实验教学
- M-CSF非受体靶分子的筛选与鉴定
- 目的从M-CSF高表达HL60细胞的dscDNA中寻找和鉴定M-CSF新的靶分子。
方法PCR扩增M-CSF的胞外活性区，连接到MATCHMAKERGAL4双杂交系统3的BD载体pGBKT7质粒，得“诱饵”-pGB...
- 李剑敏
- 关键词：M-CSFHL60细胞SMART技术同源重组酵母双杂交
- 文献传递
- 设计性、综合性实验在《药理学》实验教学中的应用被引量：7
- 2012年
- 目的:在本校2009和2010级护理、临床专业大专生中开展药理学设计性、综合性实验研究。方法:学生按班级随机分为实验组和对照组。对照组仍按照传统模式进行实验教学;实验组教学部分增加设计性、综合性实验。为检验教学效果对两组学生进行相同的理论考试、实验技能考核和问卷调查。结果:学生问卷调查统计结果显示实验组在实验前后学习兴趣、专业学习帮助、提高实践能力、独立分析问题能力、解决问题能力、培养创新意识等方面都得到了很大的提升;学生期末实践能力考核及理论知识考试成绩显示实验组比对照组明显提高。结论:学生对设计性、综合性实验有很高的兴趣并积极参与,并且设计性、综合性实验能够使理论联系实际,培养学生的科研和实践能力。
- 李剑敏张斌何志军唐瑰琦
- 关键词：药理学实验教学
- 熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。结果 MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。
- 李剑敏周国兴宋海鹏何志军张斌
- 关键词：熊果酸HL60细胞凋亡
- 儿科住院患者抗生素类用药调查分析被引量：8
- 2007年
- 针对目前滥用抗生素,导致药源性疾病增多和细菌耐药性的产生,随机抽取2006年度3月1日至17日儿科出院病历127份,根据患者的病史、诊断、病情轻重程度、诊疗计划、辅助检查等情况,综合判断用药情况,找出存在问题。
- 张斌何志军李剑敏
- 关键词：抗生素儿科
- 二烯丙基二硫诱导HL-60细胞G_2/M期生长阻滞的分子机制研究被引量：19
- 2004年
- 目的 探讨二烯丙基二硫 (DADS)诱导HL 6 0细胞G2 /M期细胞生长阻滞的分子机制。方法 用不同浓度的DADS处理HL 6 0细胞 ,分别作用 0 ,6 ,1 2 ,2 4 ,4 8h后用MTT法测定细胞增殖活性 ;用流式细胞术和有丝分裂指数测定细胞增殖周期 ;用Westernblot检测 p38丝裂原活化蛋白 (p38MAPK)及Cdc2 5B和Cdc2激酶的表达和磷酸化水平 ;用RT PCR检测p38MAPKmRNA的表达。结果 DADS抑制HL 6 0细胞增殖呈浓度依赖性 ,且DADS(2 0 μmol/L)与ATRA(1 0nmol/L)对HL 6 0细胞增殖活性影响相近 (P >0 .0 5 ) ;DADS 2 0 μmol/L作用HL 6 0细胞 1 2h后能引起G2 /M期细胞百分数增高并达到最大值 ,而此时有丝分裂指数明显下降 (P <0 .0 5 ) ;同时 ,磷酸化p38MAPK蛋白及p38MAPKmRNA的表达达到高峰 (P <0 .0 5 ) ,并引起Cdc2 5B和Cdc2磷酸化水平的相应变化。而p38特异性抑制剂SB2 0 2 1 90 (1 0 μmol/L)能阻断DADS对HL 6 0细胞增殖的抑制作用 (P <0 .0 5 )。结论 DADS能启动HL 6 0细胞G2 /M控制点 ,它的激活可能与磷酸化
- 谭力铭张蒙夏罗红梅曾勇智李剑敏崔泽文张晓红唐圣松
- 关键词：二烯丙基二硫DADSM期分子机制
- 用于酵母双杂交的M-CSF诱饵载体的构建和鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的 构建用于酵母双杂交系统的结合域(bindingdomain ,BD)诱饵载体pGBKT7-M -CSF ,并检测其是否具有自身激活作用。方法 用PCR方法从M -CSFcDNA中扩增出M -CSF的胞外活性区,引入酶切位点SalⅠ、NcoⅠ,与pGBKT7载体连接起来,并检测pGBKT7-M -CSF在酵母双杂交系统3中的自激活作用。结果 成功构建了BD诱饵载体pGBKT7-M -CSF ,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活作用。结论 pGBKT7-M -CSF可以用于酵母双杂交系统中,找出与M -CSF相互作用的分子。
- 李剑敏雷小勇孙文清张晓红唐圣松
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活作用
