曹茂林
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
- 供职机构:中国科学院成都生物研究所更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 黑麦细胞融合的强化离心技术及遗传变异研究
- 2008年
- 用细胞融合的强化离心方法处理黑麦萌动种子,对前后材料的观察和RAPD分析表明在分子水平上该方法能有效引起遗传结构的改变。所用的40种随机引物中,10种引物对处理和对照材料的基因组DNA扩增产物在条带数目、条带位置及带型特征等方面均有明显差异,其中4种引物出现条带减少,6种引物出现条带增加,后者还包括一个带位移动。这说明两种材料的基因组DNA具有明显的RAPD反应多态性差异。
- 李世丹曹茂林
- 关键词:细胞融合黑麦
- 遗传物质在宿主细胞内整合重组的技术
- 本发明公开了一项遗传物质在宿主细胞内整合重组的技术。用低渗、低pH值的钾离子溶液处理待实现外源或内源遗传物质整合重组的宿主细胞,再经离心和低温以及抗氧化修复培养,以获得整合重组的新的遗传结构。促使宿主细胞内的DNA解螺旋...
- 吴伯骥郭卫红曹茂林
- 文献传递
- hrpNCSDS001基因克隆及其表达产物诱导拟南芥基因表达谱变化的研究
- 通过构建Erwinia carotovora subsp.carotovora CSDS001菌株基因组文库,鉴定、克隆到 hrpNCSDS001基因,其开放阅读框为1,071bp,编码产物含356个氨基酸残基,Gene...
- 张珏曹茂林黄玉碧吴伯骥
- 文献传递
- 胡萝卜软腐欧文氏菌CSSY002菌株hrpN基因的克隆、鉴定及其表达产物Harpin蛋白的活性分析被引量:4
- 2007年
- 从感染软腐病的胡萝b组织中分离出胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝b亚种( Erwinia carotovora subsp, carotovora)CSSY002菌株.用该菌株接种非寄主植物烟草不能引起过敏反应.构建CSSY002菌株的基因组文库,应用α-P^32标记的hrpN基因作探针,通过菌落原位杂交技术从该文库中筛选到1.5~2.0 kb的hrpN-like阳性克隆,进一步将该片段亚克隆到pBluescript—II SK(+)载体中,进行核苷酸序列测定.结果表明,hrpN-like基因(即hrpNCSSY002基因)的开放阅读框(ORF)为1071bp,其核苷酸序列已在Genbank注册,登录号为bankit AY999002.hrpN-like基因的编码产物Harpin—like蛋白(即HarpinCSSY002蛋白)由356个氨基酸残基组成,分子量为36.64×10^3,等电点pI5.9.将hrpN—like基因构建到表达质粒pET-28a(+)的17强启动子下,并转化到大肠杆菌工程菌JM109(DE3)细胞中,经WTG(异丙基硫代-β-D半乳糖苷)诱导获得Harpin-like蛋白的高效表达,并通过接种烟草叶片的过敏反应检测Harpin—like蛋白的生物学活性.
- 曹茂林张珏汤承CUI Yaya吴伯骥
- 关键词:过敏反应HARPIN蛋白
- 遗传物质在宿主细胞内整合重组的方法
- 本发明公开了一项遗传物质在宿主细胞内整合重组的技术。用低渗、低PH值的钾离子溶液处理待实现外源或内源遗传物质整合重组的宿主细胞,再经离心和低温以及抗氧化修复培养,以获得整合重组的新的遗传结构。促使宿主细胞内的DNA解螺旋...
- 吴伯骥郭卫红曹茂林
- 文献传递
- HrpN_(CSDS001)基因克隆及其表达产物诱导拟南芥基因表达谱变化的研究被引量:4
- 2007年
- Erwinia carotovora subsp.carotovora CSDS001菌株具有可直接诱导烟草过敏反应特征,从构建的CSDS001菌株基因组文库,鉴定、克隆到hrpNCSDS001基因,GenBank登录号AY939927;构建的重组hrpNCSDS001基因工程菌株经IPTG诱导培养,获得的高效表达HarpinCSDS001蛋白,可诱导烟草发生过敏反应。30μg/mLHarpinCSDS001蛋白喷施拟南芥后,分析第3h、12h、24h、36h和48h拟南芥全基因谱表达动态变化,结果显示发生显著表达差异(logratio≤?1或≥1)的基因数分别为912、1787、2393、1833和1755。对被诱导发生显著表达差异的转录因子基因分析表明,有13个转录因子家族:ZIM、BES1、TCP、C2C2、AP2/EREBP、WRKY、bHLH、bZIP、GARP、MYB、NAC、HB、C2H2与HarpinCSDS001蛋白作用相关,这些转录因子家族主要参与调控植物抗性、光合作用、生长发育、开花等相关功能基因表达。
- 张珏曹茂林黄玉碧吴伯骥
- 关键词:克隆基因芯片分析