崔玉
- 作品数:5 被引量:11H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区的表达及纯化
- 2007年
- 目的表达并纯化NK细胞免疫球蛋白样受体KIR3DL1胞外区。方法以pUC57-KIR3DL1为模板,PCR扩增KIR3DL1胞外区序列,与pGEM-T载体进行A-T克隆;测序正确后,采用定向克隆的方法将KIR3DL11胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建了pET28a-DsbA/KIR3DL1重组质粒。将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DL1融合蛋白表达,溶解于8mol/L尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Superdex75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和Westernblot鉴定目的蛋白的表达及纯化。结果表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度95%以上的DsbA-KIR3DS1融合蛋白。结论KIR3DL1胞外区的成功表达及纯化为进一步研究KIR3DL1与相应配体之间的相互作用奠定了基础。
- 李晖崔玉周勇彭剑淳孙红琰詹林盛王全立
- 关键词:原核表达蛋白纯化
- 乙型肝炎病毒感染小鼠模型的建立
- 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染是全球范围影响健康的重要问题,慢性感染人群存在肝硬化和肝细胞癌的高患病风险。尽管乙型肝炎病毒疫苗有效,但是在世界范围内慢性感染人数超过了3.5亿,占全球人数的...
- 崔玉
- 关键词:乙型病毒性肝炎动物模型致病机制抗病毒治疗
- 文献传递
- 酶的体外定向进化策略研究进展被引量:5
- 2005年
- 酶的体外定向进化是目前酶学工程发展的一个新技术,本文综述了易错PCR、DNA重组等策略的进展,该项技术为医学、工业、农业等方面提供了广阔的前景。
- 崔玉杨军孙萍王全立
- 关键词:体外定向进化易错PCRDNA改组
- 乙型肝炎病毒动物模型研究进展被引量:4
- 2007年
- 乙型肝炎病毒感染是全球范围影响人类健康的重要问题,慢性感染人群存在肝硬化和肝细胞癌的高患病风险。尽管乙型肝炎病毒疫苗有效,但是在世界范围内慢性感染人数超过了3.5亿,占全球人数的5%。乙型肝炎病毒的生物学研究及新治疗发展进展缓慢是由于缺乏合适的动物模型,每一种动物模型都有其优势和特殊弊端。简要综述了各种动物模型在乙型肝炎病毒研究中的应用进展。
- 崔玉詹林盛
- 关键词:乙型肝炎病毒动物模型
- 咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性检测被引量:2
- 2007年
- 目的:初步证实咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性。方法:通过PCR扩增得到咖啡豆α-半乳糖苷酶基因克隆到载体pGEM-T easy,目的片段与预期的大小一致。咖啡豆α-半乳糖苷酶基因与分泌性原核表达载体pAS18连接,转化到宿主菌E.coli JM83。经过IPTG诱导表达并通过SDS-PAGE电泳分析,Western-blot印迹证实蛋白表达的特异性。结果:PCR扩增得到目的片段测序结果正确。SDS-PAGE电泳分析得到目的蛋白41kD,经过Western blot鉴定正确。ELISA检测证实咖啡豆α-半乳糖苷酶具有生物活性。结论:优化诱导条件,初步证实重组咖啡豆α-半乳糖苷酶基因具有生物活性。
- 崔玉杨军詹林盛
- 关键词:Α-半乳糖苷酶活性