孙萍 作品数:27 被引量:95 H指数:5 供职机构: 军事医学科学院野战输血研究所 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
生物素化HCV多表位融合抗原的表达及其在双抗原夹心检测方法中的应用 为了建立HCV-Ab的双抗原夹心ELISA检测方法,克隆表达了带有生物素标签的HCV多种抗原优势表位融合蛋白。选取HCV各抗原如Core、NS3、NS4、NS5、E的优势抗原表位片段编码序列,克隆重组为融合基因,插入Pi... 詹林盛 李保昌 孙萍 杨淑华 王全立文献传递 一种促吞噬因子及其编码基因与应用 本发明公开了一种促吞噬因子及其编码基因与应用,其目的是提供一种促吞噬因子及其编码基因与其在制备血液病原清除药物中的应用。该促吞噬因子是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质:1)序列表中的SEQ ID №:1;2)将序列表中... 甘慧 王全立 孙红琰 杨军 孙萍 周勇 刘敏霞 王嘉军文献传递 人类补体C3研究进展 被引量:32 2004年 人类补体C3成分是补体激活的经典途径、替代途径以及甘露聚糖结合凝集素 (MBL)途径三者的交汇点 ,是宿主防御机制中占据核心地位的特殊分子。补体C3与其裂解片段构成了人类补体系统的基础框架。现就近年来补体C3基因、蛋白。 甘慧 杨军 孙萍 王全立关键词:补体C3 补体激活 甘露聚糖结合凝集素 补体系统 宿主防御 MBL 胶体纳米硒颗粒的制备方法 本发明涉及一种在常温下制备胶体纳米硒颗粒的方法。它在常温下以亚硒酸和抗坏血酸为原料进行制备。该方法需要时间短,产量高,采用本发明方法的标记物用于免疫层析检测的灵敏度高,在医疗卫生的快速检测中有广阔的应用前景。 刘晓达 李保昌 王全立 彭剑淳 周锡鹏 孙萍 杨淑华文献传递 两种萤火虫荧光素酶活性检测方法的一致性比较 被引量:1 2008年 目的:比较2种萤火虫荧光素酶活性检测方法的一致性。方法:分别采用化学发光技术(Che)及活体光学成像技术(Bio),从细胞和动物水平检测在转染以萤火虫荧光素酶为报告基因的载体pCI-AAA-Fluc-neo后不同时间点,萤火虫荧光素酶的表达强度。结果:在细胞和动物水平,萤火虫荧光素酶的表达强度均随时间推移逐步递减。在HepG2细胞,萤火虫荧光素酶表达持续96 h,活性从24 h的2781±220 mV(1.6×106±2.3×105光子)降至96 h的49±3.5 mV(6.4×104±2.5×104光子)。在动物水平得到相似的结果,BALB/c小鼠萤火虫荧光素酶表达持续20 d,其活性从1 d的16592±409 mV(1.9×108±3.6×106光子)降至20 d的798±139 mV(3.37×105±3.8×104光子)。通过一致性检验,2种检测方法在细胞和动物水平的直线回归方程分别为lgChe=1.186.lgBio-3.764(r=0.937,P<0.001)和lgChe=0.451.lgBio+0.64(r=0.915,P<0.001);进一步将理论数据与实验数据进行配对t检验,二者无统计学差异(P>0.05)。结论:2种检测方法是一致的;从整个实验过程来看,活体光学成像技术较化学发光法更为简便、直观,可量化地对同一个体连续检测,减少了个体间差异和实验动物用量。 孙志东 孙萍 付秋霞 王怡 周勇 彭剑淳 詹林盛关键词:化学发光 萤火虫荧光素酶 丙型肝炎病毒细胞和动物模型研究 2006年 卓海龙 孙萍 詹林盛关键词:肝炎病毒 丙型 动物 利用萤光素酶标记的肿瘤细胞建立肝癌原位移植模型及其活体成像 被引量:9 2008年 目的:利用生物发光成像技术非侵入性地监测活体裸鼠原位肝癌发展过程。方法:将包含有萤火虫萤光素酶基因的pCI-neo-Luc载体转染人肝癌HepG2细胞系,筛选获得具有高萤光素酶活性的细胞克隆;利用流式细胞仪对萤光素酶表达的稳定性进行初步研究,并分析细胞的生物发光情况;持续表达萤光素酶的肿瘤细胞培养扩增后被植入裸鼠皮下,2周后以形成的异体瘤作为供体瘤,进行肝脏原位移植手术;对建立的肝癌原位移植模型,用影像学资料显示肿瘤部位,用IVIS成像系统动态监测肿瘤生长情况。结果:体外影像的结果显示,表达萤光素酶细胞的数量与发光强度呈正相关;活体成像的结果显示,成功地建立了萤光素酶标记的原位肝癌动物模型。结论:生物发光成像可以监测活体内肝癌演进过程,为抗肿瘤药物的筛选和评价提供了新的手段和工具。 孙萍 王怡 孙志东 彭剑淳 周勇 詹林盛关键词:生物发光成像 萤光素酶 原位 肝癌 血浆病毒灭活装置的研究 许金波 周锡鹏 王全立 马平 吕丽萍 张艳宇 孙萍 闫舫 胡伟 该课题开发了“血浆病毒灭活装置”。该装置采用亚甲蓝/光化学法灭活血浆中的病毒。亚甲蓝(一种临床用药)为一种光敏剂,它能与病毒核酸特异性结合,经600 ~700 nm 波长光激发后产生单态氧等自由基,进而导致核酸骨架中的鸟...关键词:关键词:血浆 病毒灭活 HTLV-I gp21外膜蛋白基因片段的克隆和融合表达 2001年 目的 克隆HTLV 1 gp2 1外膜蛋白基因片段并在 pGEX 2T载体中融合表达。 方法 人工合成 4条寡核苷酸片段 ,串联成HTLV Igp2 1外膜蛋白基因片段 ,然后克隆入T载体 ,进行序列分析 ;再将序列正确的HTLV Igp2 1外膜蛋白基因片段亚克隆入pGEX 2T融合表达载体中 ,进行融合表达 ,并对表达的融合蛋白进行鉴定。 结果 序列分析结果显示 :利用人工合成的寡核苷酸片段串联成HTLV Igp2 1外膜蛋白基因片段是可行的 ;HTLV Igp2 1外膜蛋白基因片段亚克隆入pGEX 2T融合表达载体中得到了融合表达 ,且具有抗原性。 结论 具有特异抗原性的HTLV Igp2 1融合蛋白的成功表达为HTLV诊断试剂盒的研制奠定了基础 ,对保障输血安全具有意义。 牛华 孙萍 周锡鹏 许金波关键词:外膜蛋白 克隆 人补体C3功能片段rC3B的克隆、表达和活性鉴定 2007年 本研究获取人类补体C3上与补体Ⅲ型受体(CR3)结合的功能区rC3B,并进行了表达、纯化和活性鉴定。用基因扩增法获得rC3B基因,并插入原核表达载体pQE30a,转化大肠杆菌E.coli M15进行表达;用SDS-PAGE电泳检验目的蛋白后以Ni2+螯合Sepharose Fast Flow层析进行纯化;用Western blot与单核细胞黏附试验初步确认蛋白活性。结果表明:钓取了人类补体C3的功能片段rC3B,构建了原核表达载体pQE30-rC3B并在E.coli中得了到高效表达;经Ni2+固相化的螯合Sepharose Fast Flow亲和层析纯化蛋白后,蛋白纯度达80%;Western blot检测证明rC3B具有抗原性,单核细胞的黏附试验初步确认了纯化后蛋白的活性。结论:确认了人类补体C3的这一活性区域,并获得了该蛋白的功能片段,为深入研究人类补体C3蛋白的功能和应用奠定了基础。 甘慧 周勇 孙萍 朱晓霞 王全立 詹林盛关键词:补体C3 原核表达 单核细胞