董瑞玲
- 作品数：34 被引量：57H指数：5
- 供职机构：深圳国际旅行卫生保健中心更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细菌直接PCR和双引物策略鉴定16S rRNA基因技术的建立被引量：6
- 2012年
- 目的探索一种基于16S rRNA基因的快速鉴定细菌方法,为临床诊断治疗及耐药菌的分子遗传分析提供科学依据。方法对卫生部室间质评菌株和临床病人标本分离培养纯菌落,用双蒸水稀释菌落,然后直接以菌液为模板优化反应体系PCR扩增16S rRNA基因片段,再测序扩增片段。将测序结果在细菌Ribosomal数据库中进行同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果本实验鉴定的卫生部质评菌株结果与卫生部报告结果一致。本实验能够一次性鉴定出临床病人标本分离的菌株。结论本研究优化了一种免纯化细菌核酸直接PCR鉴定细菌16S rRNA基因的方法。本研究建立的基于病原细菌16S rRNA基因鉴定方法可用于细菌的快速诊断。
- 王佃鹏董瑞玲张艳芳易娟汤海燕邓丽丹罗斌李培茂张志敏童向东
- 关键词：细菌
- 测定疟原虫含量的方法和检测疟原虫含量的系统
- 本发明涉及一种测定疟原虫含量的方法和检测疟原虫含量的系统。上述测定疟原虫含量的方法包括如下步骤：用细胞处理液处理待测样品，得到细胞悬液，细胞处理液中含有4.0g/L～6.0g/L的聚氧乙烯醚和4.0g/L～5.5g/L的...
- 董瑞玲甘鑫谢昭聪顾大勇何建安朱玉兰孙杰张树平刘胜牙
- 登革病毒Taqman双重荧光PCR分型研究被引量：3
- 2011年
- 目的建立鉴定登革病毒型别的双重实时Taqman PCR反应体系,以准确快速鉴定登革病毒型别。方法根据GenBank上已发表的登革病毒四个型别的全基因序列,进行对比分析,分别设计登革病毒的四个型别引物和探针,登革I、III型探针用FAM-TAMARA标记,登革II、IV型探针用JOE-TAMARA标记。经过条件优化后,建立检测登革病毒I/II型和III/IV型的两套双重实时荧光RT-PCR方法,扩增四型登革病毒RNA、登革病毒阴性样本和登革病毒RNA稀释样本,检测方法的特异性、重复性和检测限性。结果通过设计筛选序列和优化反应条件,建立登革病毒I、II型和登革病毒III、IV型的双重荧光PCR反应体系,通过试验证明,所建立的方法具有良好的特异性、重复性和检测限性,能准确快速地对登革病毒进行分型。结论建立了一种快速双重荧光PCR方法能同时对登革病毒进行分型和鉴定。
- 董瑞玲甄胜西孙杰李微王佃鹏徐媛朱玉兰
- 关键词：登革病毒基因分型TAQMAN探针
- 一种HCV Core protein基因RT-PCR分型及检测方法
- 本发明公开了一种HCV Core protein基因RT-PCR分型及检测方法。本发明提供的引物组合物，包括序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA，还可包括...
- 朱玉兰董瑞玲刘胜牙古莉冰王佃鹏孙杰徐媛李微
- 文献传递
- 用于检测结核分枝杆菌mRNA的引物和探针及其应用
- 本发明公开了一种用于检测结核分枝杆菌的引物和探针及其应用。本发明提供了用于检测结核分枝杆菌的组合物，所述组合物由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成；所述探针的序列为序...
- 董瑞玲朱玉兰王佃鹏刘胜牙李微叶健忠张树平
- 文献传递
- 甲型H1N1流感双重荧光PCR快速筛查方法的研究
- 2010年
- 目的优化一种甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法。方法根据WHO推荐的甲型H1N1流感检测方案合成、标记引物和探针。通过改进反应条件与参数,优化了甲型H1N1流感的双重荧光PCR检测方法。结果该方法敏感度高,特异性强,重复性好。应用该方法检测患者实际样品,结果与WHO推荐方法的检测结果一致;应用该法可在4h内完成对样品中甲型H1N1流感的检验。结论本研究优化的甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法可用于甲型H1N1流感的诊断。
- 王佃鹏朱玉兰李政良刘胜牙董瑞玲黄宗炎高朝贤胡孔新
- 关键词：甲型H1N1流感
- 拉曼光谱技术在疟疾检测中的应用被引量：4
- 2014年
- 拉曼光谱具有非破坏性、微量精细分辨能力、标本无需特殊处理等优点,目前已显示出在生命科学领域广泛的应用前景。现从检测原理、检测的技术类别、样本的处理、参数的设置、检测数据方面分析拉曼光谱技术应用于疟疾检测的现状,存在的问题和发展前景。
- 董瑞玲顾大勇朱玉兰臧庆伟何建安王佃鹏
- 关键词：拉曼光谱疟疾
- 登革热病毒多重荧光PCR检测及基因分型方法的研究被引量：8
- 2012年
- 目的建立一种登革热病毒双靶基因多重荧光PCR检测方法，用于登革热病毒的实验室诊断和基因分型。方法选取登革热病毒Ⅰ-Ⅳ型病毒保守区设计型特异性引物探针和通用型引物探针。评估多重荧光PCR检测方法的特异性、重复性和检测限；并对20份阳性样本进行检测。结果20个登革热阳性核酸标本在通用型检测全部为阳性，特异性型别检测发现登革热病毒Ⅰ型10例、登革热病毒Ⅱ型3例、登革热病毒Ⅲ型3例、登革热病毒Ⅳ型4例；20名正常无症状人群标本提取的核酸和HIV、HCV和HEV通用型和特异性型别检测全部为阴性。梯度检测的变异系数均小于5％。对登革热Ⅰ-Ⅳ型病毒检测最低检测限达10^3 eopies／ml。结论本研究建立的登革热病毒双靶基因多重荧光PCR检测及分型方法具有特异性好、重复性好、快速易操作等优点，可用于登革热病毒的快速检测和基因分型鉴定。
- 王佃鹏朱玉兰刘胜牙董瑞玲甄胜西
- 关键词：登革热基因分型
- 结核分枝杆菌免疫层析和荧光PCR联合检测方法的应用被引量：5
- 2014年
- 目的探讨一种基于免疫层析法和荧光PCR DNA定性检测技术的肺结核多重诊断模式。方法以208例疑似结核患者为研究对象,采用免疫层析法检测其血清特异性抗结核抗体,同时采用荧光PCR方法检测其痰液中结核分枝杆菌DNA,并将两种方法的检测结果进行比较。结果免疫层析法检测结果显示,16份血清标本呈阳性,阳性率为7.7%;荧光PCR方法检测结果显示,14份痰液标本呈阳性,阳性率为6.7%。两种检测方法协同诊断率为100.0%。结论结核分枝杆菌免疫层析法和荧光PCR法相结合的实验室诊断模式有助于肺结核的快速诊断和传染风险性评估。
- 王佃鹏董瑞玲武学成朱玉兰张艳芳李智民惠长野杨祥丽
- 关键词：结核分枝杆菌免疫层析法荧光PCR法
- 结核分枝杆菌双重实时RT-PCR检测方法的研究被引量：2
- 2012年
- 目的建立检测结核分枝杆菌mRNA表达水平的双重实时RT-PCR反应体系,准确快速鉴定结核分枝杆菌。方法根据GenBank上已发表的结核分枝杆菌表达85B抗原的fbpB mRNA基因序列,进行对比分析,设计合成fbpB引物和探针,其中探针以CY5为报告基团,BHQ3为淬灭基团。根据WHO文献报道合成人类RNase P基因引物和探针,其中探针以FAM为报告基团,BHQ1为淬灭基团。经条件优化后,建立检测结核分枝杆菌mRNA双重实时RT-PCR方法,在同一体系内同时扩增结核分枝杆菌fbpB基因和人类RNase P基因,通过检测10份肺结核患者痰液和10份健康无症状人群痰液,检验方法的特异性、重复性和检测限性。结果肺结核患者痰液fbpB和RNase P基因均扩增阳性,健康无症状人群痰液fbpB均无扩展曲线,RNase P均扩增阳性。重复性检测显示fbpB基因重复检测的变异系数在1%以下,fbpB检测CT值与痰涂片抗酸染色分枝杆菌的数量呈良好的相关性。结论建立了一种快速双重实时RT-PCR方法能同时对结核分枝杆菌fbpB mRNA基因和人类RNase P基因进行检测,在检测fbpBmRNA基因的同时,通过检测RNase P基因监测RNA提取效果和PCR反应扩增效果。
- 古莉冰朱玉兰王佃鹏董瑞玲李微孙杰刘胜牙
- 关键词：结核分枝杆菌MRNARNASEP
