牛云飞
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：东南大学基础医学院发育与疾病相关基因教育部重点实验室更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向于白细胞介素15受体的融合毒素研究
- 目的:一些恶性肿瘤如成人T淋巴细胞性白血病和骨髓瘤细胞表面含有丰富的白介素15受体(IL-15R),炎症性自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、克隆氏病等也都发现活化的IL-15R阳性T淋巴细胞的浸润和聚集.IL...
- 牛云飞
- 关键词：基因重组绿脓杆菌外毒素蛋白融合
- 文献传递
- 以白细胞介素15拮抗剂为载体的融合毒素IL15M-PEΔ293的研制
- 2005年
- IL 15及IL 15受体 (IL 15R)阳性细胞在成人T淋巴细胞性白血病 (ATL)、多发性骨髓瘤及炎症性自身免疫性疾病病理过程中起着重要作用。为研制特异的可消除IL 15受体阳性异常细胞的新型导向药物 ,将人IL 15拮抗剂 (IL 15M)基因片段与人工改造的绿脓杆菌外毒素 (PE)变异体 (PEΔ2 93)基因按正确的阅读框架融合 ,定向克隆在pET16b表达载体T7启动子的下游 ,得到质粒pET IL15M PEΔ2 93。从大肠杆菌相应重组菌株中通过Ni2 + NTA亲和层析纯化出融合蛋白IL15M PEΔ2 93。IL15M PEΔ2 93对IL 15R阳性红白血病细胞系K5 6 2及其多药耐药细胞系K5 6 2 AO2 均具有杀伤作用 ,对IL 15R阴性细胞系Jur kat则没有明显的杀伤作用 ,而且过量的重组IL 15可以完全阻断融合蛋白对K5 6 2的细胞毒效应 ,说明融合蛋白的细胞毒作用具有靶向性。这些结果提示本文构建的融合蛋白在与IL 15 IL 15R异常表达相关的疾病甚至耐药性肿瘤的治疗中具有潜在的应用价值。
- 牛云飞郑颖毛晓华
- 关键词：白细胞介素15绿脓杆菌外毒素融合蛋白
- 一种新型融合毒素IL15-PEΔ293的构建与体外活性测定被引量：1
- 2004年
- 目的构建IL15与铜绿假单胞菌外毒素突变体(PEΔ293)的融合蛋白IL15PEΔ293,并且对该融合毒素进行初步的体外活性测定。方法将人IL15基因片段与PEΔ293的基因按正确的阅读框架融合,定向克隆在pET16b表达载体T7启动子的下游,得到表达质粒pETIL15PEΔ293。从大肠杆菌相应重组菌株中通过Ni2+NTA亲和层析纯化出融合蛋白IL15PEΔ293。以IL15受体(IL15R)阳性红白血病细胞系K562、多药耐药细胞系K562AO2以及IL15R阴性细胞系Jurkat为靶细胞测定IL15PEΔ293的生物活性。结果限制性分析和测序鉴定证明融合蛋白IL15PEΔ293表达质粒pETIL15PEΔ293构建正确。该质粒在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中成功表达了融合蛋白IL15PEΔ293。利用Ni2+NTA亲和层析从大肠杆菌菌体总蛋白中纯化出重组蛋白。该融合蛋白对IL15R阳性细胞K562和K562AO2有明显的剂量依赖的细胞毒作用,而对IL15R阴性细胞Jurkat没有表现剂量依赖的细胞毒作用。结论融合蛋白IL15PEΔ293表达质粒构建成功,在大肠杆菌中表达纯化后的新型融合蛋白IL15PEΔ293对IL15R阳性细胞有良好的靶向杀伤活性。
- 牛云飞毛晓华
- 关键词：IL-15PEETK562表达质粒细胞毒作用
