毛晓华 作品数:22 被引量:21 H指数:3 供职机构: 东南大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 铁道部科技基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
一种粘细菌发育相关基因的分离及敲除分析 2002年 FruB是与粘细菌 (Myxococcusxanthus)发育特异性转录因子FruA具有亲和力的蛋白因子 ,协同FruA参与对靶基因的调控。根据FruB氨基端氨基酸序列 ,设计简并性寡核苷酸引物对染色体DNA进行PCR扩增 ,以扩增产物为探针自粘细菌小型基因文库筛选出同源的4 5kbSacI阳性片段。fruB基因阻断分析表明 ,fruB功能缺失延缓子实体发育并降低粘孢子产率 。 毛晓华 汪道涌 刘芳关键词:粘细菌 发育相关基因 基因克隆 基因敲除 黄色黏细菌发育基因fruA表达调节的机制研究 目的: 粘细菌是研究原核生物多细胞结构形成机制的一种良好模型。FruA是粘细菌发育所必需的转录因子,影响着其他一系列发育特异性基因的表达。前期工作发现fruA mRNA5’-UTR对自身基因在发育时期的表达起正性调控作用... 郑颖 毛晓华关键词:黏细菌 FRUA 发育 文献传递 酵母双杂交筛选黏细菌转录因子FruA互作蛋白的研究 目的:FruA是黏细菌中决定发育早期细胞定向聚集和后期细胞分化的C信号转导通路中的一种信号转导蛋白,调节一系列发育基因的表达,遗传学证据提示 FruA可以磷酸化,但是迄今为止仍缺少FruA磷酸化直接的生化证据。本研究采用... 袁晨燕 毛晓华关键词:粘细菌 FRUA 发育 酵母双杂交 文献传递 新型融合基因hIFNα1-CB在大肠杆菌中表达 被引量:6 2002年 目的 构建人干扰素 α1和抗菌肽 B的融合蛋白表达质粒 p HC,并初步研究融合蛋白的抗病毒活性。方法 重组质粒 p HC转化 E.coli JM83 ,温控诱导表达 ,SDS- PAGE制备蛋白质 ,病变抑制法测定其抗病毒比活性。结果 得到分子量约为 2 1ku的目的蛋白 ,抗病毒比活性为 2 .62× 10 6 IU/ m g。结论 成功构建了融合蛋白表达质粒 p HC,重组蛋白的构象及 C-端的 邱定红 毛晓华 高向东 李新荣 林碧蓉 徐蘅关键词:基因重组 人干扰素 抗病毒活性 新型融合蛋白hIFNα1-CB表达载体的构建 被引量:1 2002年 目的 :构建人干扰素α1(hIFNα1)和抗菌肽B(CB)的融合蛋白表达质粒。方法 :将人工改造后的hIFNα1基因与CB基因按正确的阅读框架融合 ,并定向克隆至大肠杆菌表达载体pBV2 2 0。结果 :经PCR检测及质粒的限制性分析 ,所挑选的Amp抗性菌落均含有插入了hIFNα1 CB融合基因的重组质粒pHC。结论 :以pBV2 2 0为载体 ,成功构建了hIFNα1 CB融合蛋白表达质粒pHC。 邱定红 毛晓华 徐蘅 李新荣 缪峰 张林元关键词:质粒 干扰素Α 重组融合蛋白质类 抗病毒药 抗肿瘤药 新型融合蛋白hIL15M-TNFαM表达质粒的构建 2004年 目的 构建hIL15M -TNFαM融合毒素的表达质粒 ,为该融合毒素的功能研究及临床应用前景的分析评价奠定基础。方法 通过PCR删除hIL15 5′端前 8个氨基酸残基的编码序列获得人白介素 15突变体 (hIL15M ) ,将hIL15M基因片段与人工改造的TNFα基因按正确的阅读框架融合 ,定向克隆于表达载体pET16b。结果 经酶切分析 ,所构建的质粒均插入hIL15M -TNFαM融合基因。结论 利用 pET16b表达载体成功构建融合毒素hIL15M 刘芳 丁蕾 毛晓华关键词:基因重组 基于创新能力培养的研究生“高级生物化学与分子生物学技术”课程体系的构建 被引量:4 2009年 研究生教育是培养高层次人才的主要途径,面对近年来不断扩大的研究生队伍,如何提高培养质量是近年研究生教育工作的重点。研究生的培养质量,主要是看毕业生能否为经济建设、科学进步发展做出应有的贡献。产生这种贡献的大小与研究生具有的创新精神和创新能力密切相关^[1],创新能力是衡量研究生教育质量的重要指标, 袁榴娣 李新荣 汪道涌 丁洁 邓湘蕾 毛晓华关键词:创新能力培养 研究生教育 分子生物学技术 生物化学 教育质量 教育工作 以TNFα为基础并靶向于白细胞介素15受体的融合蛋白的构建及功能研究(英文) 被引量:1 2004年 IL 1 5及IL 1 5R阳性细胞在成人T淋巴细胞性白血病 (ATL)、多发性骨髓瘤及炎症性自身免疫性疾病病理过程中起着重要作用 .应用基因重组技术 ,构建、表达靶向于IL 1 5受体的两种融合蛋白 ,为研制特异的可消除IL 1 5R高表达细胞的导向药物奠定基础 .将人IL 1 5成熟肽基因及IL 1 5R拮抗剂 (IL 1 5M)基因片段分别与人工改造的人肿瘤坏死因子突变体 (TNFαM)基因按正确的阅读框架融合 ,定向克隆在pET1 6b表达载体T7启动子的下游 ,得到质粒pET IL 1 5 TNFαM和pET IL 1 5M TNFαM .从大肠杆菌相应重组菌株中通过Ni2 + NTA亲和层析分别纯化出两种融合蛋白IL 1 5 TNFαM和IL 1 5M TNFαM .IL 1 5 TNFαM和IL 1 5M TNFαM对IL 1 5R阳性红白血病细胞K5 6 2的杀伤作用分别是TNFα的 4和 1 5倍 ,两种蛋白对IL 1 5R阴性细胞系Jurkat的杀伤作用则没有明显差异且均弱于TNFα .这些结果说明 ,两种融合蛋白特别是IL 1 5受体拮抗型蛋白IL 1 5M TNFαM对与IL 1 5 IL 1 丁蕾 刘芳 毛晓华关键词:肿瘤坏死因子 白细胞介素15 基因工程 用TnV分离粘细菌发育回复突变株 被引量:2 2001年 fruA∷TcΩ5 is a development deficient strain of M.Xamthus.Transposon TnV was used to randomly mutagenize various sites of fruA ∷TcΩ5 chromosome.Fruiting body formation was restored in one TnV insertion mutant,designated XM1206.The TnV\|inserted DNA fragment from XM1206 chromosome was cloned,which may be served as a probe to isolate the corresponding allele from wild\|type strain. 毛晓华 汪道涌 李新荣关键词:粘细菌 发育 回复突变 转座子 黄色黏细菌转录因子FruA对自身基因的表达不具自调节作用 2007年 粘细菌是研究多细胞结构形态发生机制的良好模型.FruA是粘细菌发育所必需的一种关键性转录因子,调节一系列发育相关基因的表达,本文研究FruA对自身基因是否存在反馈调节从而导致发育后期fruA表达水平的下调.以野生型粘细菌模式菌株DK1622为基础构建fruA基因敲除突变株DK1622ΔfruA,再将fruA-lacZ转录融合载体pMF1A整合入fruA突变株染色体attB,获得重组菌株DK1622ΔfruA/pMF1A,通过检测β-半乳糖苷酶活性来确认FruA对自身基因的表达水平是否有影响.结果表明fruA调控序列完整的fruA-lacZ转录融合体β-半乳糖苷酶活性在DK1622/pMF1A和DK1622ΔfruA/pMF1A之间无明显差异,即fruA表达产物作为一种转录因子对自身基因的转录没有调节作用,黏细菌发育后期fruA表达水平的下降存在其它调节机制. 郑颖 毛晓华关键词:黏细菌 发育 FRUA