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洪焱
作品数:
2
被引量:5
H指数:1
供职机构:
贵阳医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
贵州省国际科技合作计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
苏晓庆
贵阳医学院
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2篇
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2篇
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几丁质
1篇
几丁质酶
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几丁质酶活性
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合酶
机构
2篇
贵阳医学院
作者
2篇
苏晓庆
2篇
洪焱
传媒
2篇
贵阳医学院学...
年份
2篇
2008
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2
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灭蚊真菌贵阳腐霉基因组文库的构建
被引量:4
2008年
目的:建立贵阳腐霉(Pythium guiyangense Su)基因组文库以便克隆该真菌的基因特别是与灭蚊毒力有关的基因。方法:用限制性内切酶Sau3AI消化贵阳腐霉基因组DNA,同时用限制性内切酶BamHI消化质粒pBluescript SK(-),再将其去磷酸化;将基因组的酶切产物连接到载体上,再转化大肠杆菌DH5α。结果:所建贵阳腐霉的基因组文库共包含11 520个克隆。经蓝白斑筛选、PCR验证以及双酶切验证,文库平均插入片段长度为1.2 kb,覆盖率约为贵阳腐霉基因组的3倍。结论:建立了贵阳腐霉的基因组文库,可以从中克隆与贵阳腐霉灭蚊毒力有关的基因。
洪焱
苏晓庆
关键词:
真菌
灭蚊
贵阳腐霉
基因组文库
贵阳腐霉几丁质酶的活性及基因片段克隆与序列
被引量:1
2008年
目的:研究贵阳腐霉(Pythium guiyangense Su)几丁质酶的活性及其基因片段的克隆与序列分析。方法:(1)采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定贵阳腐霉分泌的几丁质酶活性;(2)根据NCBI Protein数据库中多种生物的几丁质酶氨基酸序列的保守区设计引物,以贵阳腐霉基因组DNA为模版,通过PCR扩增获得特异性DNA片段;(3)将该片段克隆并进行测序分析。结果:贵阳腐霉经诱导后可以分泌几丁质酶。诱导24h是该酶分泌高峰期。克隆到一207bp的DNA片段,其第182-207碱基序列与狗(Canis familiaris)的几丁质酶基因的部分序列相同。结论:本实验证明贵阳腐霉核DNA含有几丁质酶基因,在几丁质类似物的诱导下,该菌可以分泌几丁质酶。所克隆的DNA片段可能是几丁质酶基因的部分序列。
洪焱
苏晓庆
关键词:
灭蚊
聚合酶链反应
贵阳腐霉
几丁质酶
几丁质酶活性
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