曾养志
- 作品数：132 被引量：596H指数：13
- 供职机构：云南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 实时荧光定量RT-PCR法建立版纳微型猪近交系中厚皮创面转化生长因子表达体系被引量：3
- 2011年
- 背景:版纳微型猪近交系能较好的模拟人取皮区创面,构建动物模型,检测与创面愈合及瘢痕形成密切相关的转化生长因子的表达。目的:观察创面愈合过程中转化生长因子β1基因的表达情况。方法:利用版纳微型猪近交系4～6月龄猪构建了皮肤创面愈合动物模型,通过提取皮肤创面总RNA,设计特异引物,对与创面愈合相关密切的转化生长因子β1基因进行了RT-PCR扩增。纯化目的片段并与pMD18-T载体连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,并经酶切、PCR和测序鉴定,计算重组质粒原液拷贝数浓度并制备梯度浓度标准品,进行实时荧光定量PCR。结果与结论:建立的转化生长因子β1基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法特异性较好,检测灵敏度可达103拷贝/μL,线性范围达103～109拷贝/μL,阈值循环数与PCR体系中起始模板量的对数值之间存在良好的线性关系(R2=0.988),扩增效率高(E=107.433%)。利用该检测体系检测了45份样品,效果良好,该方法可为研究TGF-β1基因在创面愈合过程中的作用机理奠定分子生物学基础。
- 李颖霍金龙潘伟荣曾养志王继华
- 关键词：实时荧光定量转化生长因子基因克隆基因表达
- 版纳微型猪近交系SRY基因编码区序列克隆及生物信息学分析
- 目的：获得版纳微型猪近交系(BMI)SRY基因编码区序列并进行分子系统进化研究。方法：以看家基因GAPDH为内参,对BMI猪的SRY基因编码区序列进行PCR扩增、克隆和序列分析,并应用Lasergene、BioEdit、...
- 霍金龙成文敏魏红江潘伟荣王配曾养志
- 关键词：SRY基因系统进化树
- 版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的形态及生物力学研究被引量：5
- 2002年
- 本研究观察了版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的解剖学、组织学形态 ,并对其腰椎进行轴向载荷压缩试验。小型猪椎骨及肋骨在解剖学、组织学方面与人近似 ,其腰椎能承受人类正常生理载荷。因此 ,版纳小型猪椎骨、肋骨可以作为异种骨移植的材料。
- 董世武孙建森应大君寿建国姚远曾养志
- 关键词：近交系椎骨肋骨生物力学
- 版纳微型猪近交系mtDNA全序列比较研究
- 提取版纳微型猪近交系(用于核移植供体)和屠宰场商品用杂交猪(用于核移植受体)基因组DNA,参照已报道的猪mtDNA全基因组序列设计引物,PCR扩增后回收产物并进行mtDNA全序列测定和拼接,获得版纳微型猪近交系和商品用杂...
- 成文敏苏小茜魏红江信吉阁霍金龙潘伟荣曾养志
- 关键词：版纳微型猪近交系
- 文献传递
- 西双版纳小耳猪DNA指纹分析被引量：10
- 2001年
- 采用ECL核酸直接标记和检测试剂盒 ,以HRP标记JL - 0 2多位点探针 ,对云南版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切图谱进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图谱。大于 2kb的谱带数在 13～ 17条之间 ,JB亚系内 80 5、80 7家系和JS亚系内 111、12 1、133、15 1家系不同个体间的相似系数分别为 0 .92± 0 .0 4、0 .85± 0 .13、0 .86± 0 .0 2、0 .80± 0 .0 5、0 .84± 0 .0 9、0 .88± 0 .0 8,显著高于家系间的相似系数。JB亚系内的 80 5家系和JS亚系内的 15 1家系不同个体间的相似系数最大 ,分别为 0 .92和 0 .88,说明其近交程度较高 ,个体间差异较小 ,均一性较强。另外 ,JB亚系内的 80 5与 80 7两个家系不同个体猪在 11.5kb处 ,均有一条区别于其他家系的特有图带 ,其是否是导致JB亚系体型较大的特异性基因座 ,有待进一步研究。
- 陈丙波周建华魏泓曾养志
- 关键词：DNA指纹SOUTHERN杂交
- 三品系小型猪35个微卫星基因座的遗传学研究被引量：67
- 2001年
- 利用 35个微卫星基因座对中国三个品系的小型猪 (贵州小型香猪、广西巴马小型猪、版纳小耳猪近交系 )进行了遗传检测。计算出三个小型猪品系个体样本在 35个微卫星基因座的纯合率 ,并对其进行t检验。计算出各品系的平均杂合度 ,多态信息含量 (PIC)及品系间的遗传距离 ,并进行了系统聚类。结果表明三个品系的小型猪其基因纯合率均较高 ,其中版纳小耳猪近交系的基因纯合率最高 ;PIC和平均杂合度均较低 ;贵州小型香猪和广西巴马小型猪亲缘关系较近 ,并均与版纳小耳猪近交系的亲缘关系略远。
- 商海涛牛荣魏泓黄中波甘世祥王爱德曾养志
- 关键词：小型猪微卫星亲缘关系遗传学
- 肥厚性心肌病模型及版纳微型猪近交系的应用
- 2006年
- 本文综述了肥厚性心肌病发病机制和肥厚性心肌病动物模型的应用情况。介绍了版纳微型猪近交系独特的近交背景和在解剖学上与人类接近的特点,并探讨了将版纳微型猪近交系应用于人类肥厚性心肌病动物模型研究的前景。
- 姚立新陈一岳曾养志
- 关键词：肥厚性心肌病动物模型
- 版纳微型猪近交系成纤维细胞系的建立及冻存方法研究被引量：1
- 2014年
- 本试验旨在观察胶原酶对版纳微型猪近交系（Banna mini-pig inbred line,BMI）耳组织的消化效果,探讨不同冻存方法对耳组织成纤维细胞存活率的影响.用胶原酶Ⅳ消化法培养BMI 60日龄仔猪原代耳组织成纤维细胞,建立耳组织成纤维细胞系,比较-80℃条件下分别保存3,5,7,30 d后冻存效果.结果表明：BMI仔猪成纤维细胞具有典型的成纤维细胞特征;生长曲线呈“S”形,倍增时间为37.1h;-80℃冻存3,5,7d的成纤维细胞存活率与液氮保存（93.74％）差异不显著（P＞0.05）,冻存30 d的存活率（79.38％）显著低于其他各组（P＜0.05）,但经48 ～ 72 h培养后仍能贴壁生长.因此,可得出此结论：采用胶原酶Ⅳ消化法可消化BMI耳组织成纤维细胞,而且该细胞在-80℃条件下能进行短期保存.
- 查星琴潘伟荣肖晶成文敏信吉阁卿玉波刘海京曾养志
- 关键词：成纤维细胞冷冻保存
- 用12对微卫星引物对版纳小耳猪近交系的遗传学分析被引量：9
- 2003年
- 目的 分析版纳小耳猪近交系种群的遗传变异及近交程度。方法 利用 12个微卫星基因座对版纳小耳猪近交系进行了遗传检测。结果 两个亚系以及各家系的聚类情况与小型猪系谱分布一致。且各家系基因纯合率均较高。结论 版纳小耳猪近交系不仅分化为若干个含有不同性状的家系 ,而且也达到了一个很高的近交程度。
- 牛荣黄中波魏泓曾养志
- 关键词：小型猪遗传学微卫星近交系
- 成骨分化的骨髓间充质干细胞的免疫原性被引量：3
- 2007年
- 目的:骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSC)具有多向分化潜能,又因其低免疫原性,成为细胞移植治疗的良好选择。本实验室前期实验表明猪MSC具有低免疫原性和免疫调节作用,而猪MSC在人体内微环境中,将自动分化。本试验研究猪MSC在体外诱导分化后是否还能维持其低免疫原性,仍具有免疫调节作用。方法:MSC细胞从近交系版纳微型猪骨髓中分离获得,转入SV40基因,进行永生化。再用β-甘油磷酸钠、地塞米松、抗坏血酸磷酸盐等体外诱导其分化为成骨细胞,以未分化MSC为对照,用RT-PCR法检测分化MSC的主要组织相容性抗原(swine lymphocyte antigen classⅠ、classⅡ,SLAⅠ、SLAⅡ)的表达情况,用单向混合淋巴细胞反应(MLR)的方法检测分化MSC是否仍不能引起人外周血淋巴细胞(human peripheral blood lymphocyte,hPBL)的增殖反应。结果:RT-PCR结果显示未分化MSC只有SLAⅠ表达;分化MSC既有SLAⅠ,也有SLAⅡ的表达,但很低。这一结果支持MSC的低免疫原性特性。混培结果也显示分化猪MSC与未分化猪MSC一样都不引起hPBL增殖反应。结论:分化和未分化猪MSC均不引起人淋巴细胞增殖反应,具有低免疫原性。提示猪MSC移植到人可能不会被排斥。
- 王兰卢晓风李胜富曾养志程惊秋
- 关键词：骨髓间充质干细胞主要组织相容性抗原免疫原性
