吴丽萍 作品数:13 被引量:59 H指数:3 供职机构: 广州医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 广东省卫生厅资助课题 广州市医药卫生科技项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
急性白血病儿童骨髓间充质干细胞的生物学特点的初步研究 被引量:2 2009年 本研究探讨密度梯度离心法加贴壁法方式培养白血病儿童骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的条件并观察其体外增殖能力、生长曲线、多向分化等生物学特性。通过密度梯度离心、贴壁法分离白血病患儿的MSC,观察细胞的形态变化及生长曲线、流式细胞术测定其CD29、CD105、CD45、CD34、CD14、HLA-DR等表达,通过成脂、成骨诱导研究其多向分化能力。结果表明:密度梯度离心法联合贴壁法可以培养出白血病儿童骨髓来源的MSC,初诊白血病儿童骨髓来源的MSC培养成功率为57.1%,缓解白血病儿童骨髓来源的MSC成功率为41.2%,接种密度越大成功率越高,初诊白血病儿童的MSC形成集落数目较多且生长较快。形态学观察显示,骨髓间充质干细胞接种24小时即贴壁,呈集落生长,形态多样;3天后贴壁细胞增殖,逐渐以梭形细胞为主;2-3周细胞基本达80%-90%融合,第3代后细胞呈均匀一致的长梭形。细胞传代后3天内处于潜伏期,3天后进入生长期,8天后进入平台期。检测第2代后细胞免疫表型显示,MSC的CD29、CD105表达率达95%以上,CD45、CD34、CD14、HLA-DR极低表达或不表达。MSC能成功诱导成脂肪细胞及成骨细胞,油红O染色和茜素红染色为阳性。在合适的条件下冻存对细胞影响不大。结论:①白血病患儿骨髓培养出的贴壁细胞是MSC,骨髓含量在1ml以上且方法得当可以培养出MSC;②初诊的白血病患儿的骨髓相对容易培养出骨髓间充质干细胞,形成的集落较缓解期白血病患儿多,增长速度较快;③白血病儿童来源的MSC具有MSC的共同生物学特性。 吴丽萍 陈福雄 卢慧敏 吴泽霖 吴梓梁关键词:急性白血病 儿童骨髓 间充质干细胞 生物学特性 儿童EB病毒感染及传染性单核细胞增多症临床特点和实验室检查分析 被引量:34 2013年 目的探讨儿童EB病毒(EBV)感染病例和传染性单核细胞增多症(IM)的临床表现和实验室检查特点。方法收集2010年1月至2011年5月广州医学院第一附属医院儿科收治的108例EBV感染患儿临床资料,其中诊断IM者77例,进行回顾性分析。结果本组病例以学龄前期儿童最多(41.6%),幼儿期也不少见(36.4%);眼睑水肿是IM早期较常见的临床表现,发生率高于脾脏肿大和皮疹;异形淋巴细胞≥10%病例仅占33.8%;IM组血浆中EBV-DNA拷贝数1.04×103~2.88×105拷贝/mL,均数7.18×104拷贝/mL;本组3例EBV-HLH血清学抗体谱抗VCAIgM均阴性,表现为EBV既往感染(2例)和再激活(1例),EBV-DNA拷贝数均值为2.71×107拷贝/mL。结论眼睑水肿与其他典型表现一样对IM具有诊断价值;异形淋巴细胞在诊断IM特别是婴幼儿IM的应用价值应该进一步探讨;检测外周血EBV-DNA拷贝数能更好反应体内EBV的活动情况;定量检测外周血EBV-DNA拷贝数在判断EBV感染的病情转归方面比血清学抗体检测更具价值。 陶佳 陈福雄 陈德辉 黄穗 梁铭 吴丽萍 杨少灵 吴梓梁关键词:儿童 EB病毒 传染性单核细胞增多症 磷酸特异化流式细胞术检测骨髓白血病细胞磷酸化信号蛋白的实验研究 被引量:3 2011年 本研究通过建立磷酸特异化流式细胞术(phospho-specific flow cytometry,phospho-flow)检测白血病细胞信号通路磷酸化蛋白的实验方法,探讨Phospho-flow在白血病研究中的应用价值。取白血病患儿的骨髓,分别采用Phospho-flow单个核细胞法和Phospho-flow直接固定法进行处理。Phospho-flow单个核细胞法为:骨髓经提取单个核细胞并固定破膜处理后,加入磷酸化抗体(P-AKT,P-ERK1/2)孵育,然后用流式细胞仪分析;Phospho-flow骨髓直接固定法为:骨髓经固定/裂解液和90%甲醇破膜细胞处理,然后加入细胞表面CD抗体及P-AKT,P-ERK1/2孵育,然后上流式细胞仪分析处理。结果表明,26例白血病患儿骨髓经phospho-flow单个核细胞法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为46.2%和30.8%,经phospho-flow骨髓直接固定法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为50.0%和38.5%。经统计学分析,两种phospho-flow的骨髓处理方法在检测P-AKT和P-ERK1/2的阳性率方面无统计学差异(p>0.05)。结论:本实验室建立的phospho-flow骨髓直接固定法,能有效检测白血病患儿骨髓细胞的磷酸化蛋白,可用于白血病信号通路的实验研究。 李华梅 曾意茹 陈福雄 吴丽萍 卫凤桂 陶佳 卢慧敏 吴梓梁关键词:白血病 肠道病毒71致神经系统损害的研究进展 被引量:3 2009年 肠道病毒71(enterovirus type 71,EV71)属小RNA病毒科,1969年首先从美国加利福尼亚州1例死于脑炎的9月龄婴儿粪便中发现。其后,美国、澳大利亚、瑞典、日本、保加利亚、匈牙利、中国香港、马来西亚、新加坡等国家和地区均有EV71感染流行的报道。EV71感染的发病高峰在夏秋季,婴幼儿为易感人群,临床表现包括手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)、无菌性脑膜炎、脑炎、 吴丽萍 梁洁芳 叶铁真 陈福雄关键词:肠道病毒71 神经系统损害 小RNA病毒科 无菌性脑膜炎 EV71 大剂量阿糖胞苷治疗儿童急性髓系白血病的耐受性研究 被引量:3 2013年 目的:探讨儿童急性髓系白血病对于大剂量阿糖胞苷的耐受性,为临床用药提供指导。方法:从我院2007年1月~2011年1月收治的儿童急性髓系白血病患者中选取40例,将其作为临床研究对象,随机分成A、B两组,每组均20例患者。两组都给予大剂量阿糖胞苷,A组患者给予体表面积3 g/m2用量;B组患者给予体表面积2 g/m2用量。一周后,分别观察两组急性髓系白血病儿童的治疗效果、神经系统毒性和副作用。结果:治疗一周后,A组患者贫血例数2例(10.00%)较B组患者贫血例数8例(40.00%)少,A组患者所表现的神经毒性头疼、嗜睡、淡漠及惊厥方面较B组患者严重,A组患者所表现的副作用眼球震颤、轮替运动障碍、共济失调均较B组患者严重。结论:大剂量阿糖胞苷虽具有更好的疗效,基本耐受但其不良反应相对严重。 卫凤桂 孟冬梅 吴丽萍 吴泽霖 曾意茹 陈福雄关键词:大剂量 阿糖胞苷 甲型流感的临床特点与治疗分析 被引量:1 2013年 目的探讨甲型H1N1流感的临床特点,并对其治疗方法及效果进行分析。方法选取2011年8月~2012年8月于我院流感儿童80例,收集临床资料,包括症状、体征、实验室及影像学检查、治愈时间及治疗结果等,进行回顾性分析。结果本次研究中,中性粒细胞升高的患儿有53.8%,淋巴细胞数减少的患儿有38.8%,56.3%患儿C反应蛋白常升高。轻型患儿治愈时间为5.8±1.6d,重型患儿治愈时间为8.4±2.1d。结论根据甲型H1N1流感的临床特点以及治疗结果分析,可以更有效的帮助临床医生在诊治甲型H1N1流感中采取更有效的治疗方式,改善治疗结果。 卫凤桂 吴丽萍 吴泽霖关键词:甲型H1N1流感 大剂量阿糖胞苷治疗儿童难治性白血病血药浓度与耐受相关性研究 目的 探讨儿童难治性白血病应用大剂量阿糖胞苷后的血药浓度与耐受性.方法 从我院2008年1月-2011年1月收治的儿童难治性白血病患者中选取10例,分别给予3g/m2 q12h × 12(A组)和3g/m2 q12h ×... 卫凤桂 孟冬梅 吴丽萍 吴泽霖 陈福雄EBV感染患儿CD163表达及其临床意义分析 目的 通过检测EBV感染患儿CD14+细胞膜表面CD163与血清中相应sCD163的水平,分析两种不同存在形式之间的关系,并探讨其与患儿临床表现、疗效及预后的关系.方法:应用酶联免疫法检测75例患儿血清sCD163水平,... 陈燕丽 陈福雄 夏波 吴丽萍 卢慧敏急性白血病儿童外周血CD4^+ CD25^+调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义 被引量:7 2010年 本研究观察急性白血病患儿外周血CD4+ CCD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)及自然杀伤细胞(nature killer cell,NK)在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4+ CD25+ Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4+ CD25+ Treg细胞和NK细胞的方法;检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4+ CD25+ Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明:初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4+ CD25+ CD127+占CD4+ T细胞的比例分别为(9.55±2.41)%,(8.54±2.51)%和(6.25±0.85)%,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组(p(0.05);同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照(4.11±3.87%和10.41±7.20%vs14.06±5.95%,p(0.05)。结论:联合应用CD4、CD25及CD127检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4+ CD25+ CD127+ T细胞可较好地反映CD4+ CD25+ Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。 吴泽霖 胡光玉 陈福雄 卢慧敏 吴梓梁 李华梅 卫凤桂 关镜明 吴丽萍关键词:外周血 NK细胞 EBV感染患儿血清铁蛋白检测分析 目的 通过检测EBV感染患儿血清铁蛋白水平,探讨其在EBV-AHS的诊断、病情监测及预后中的意义.方法:应用化学发光法检测患儿血清铁蛋白水平.结果 1、103例不同感染患儿中,一般感染组39例,重症感染组9例,IM组47... 夏波 陈福雄 陈燕丽 吴丽萍 卢慧敏