卫凤桂
- 作品数:41 被引量:88H指数:6
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:广东省医学科学技术研究基金博士科研启动基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生核科学技术航空宇航科学技术电子电信更多>>
- 硫鸟嘌呤核苷酸浓度检测在儿童急性淋巴细胞白血病6-巯嘌呤个体化疗中的意义被引量:4
- 2009年
- 目的:建立一种快速、灵敏、高效的方法,检测儿童急性淋巴细胞白血病红细胞中硫鸟嘌呤核苷酸浓度。方法:应用反相高效液相色谱(RT-HPLC)技术,测定急性淋巴细胞白血病患儿红细胞内6-巯嘌呤(6-MP)及其代谢产物[硫鸟嘌呤核苷酸、6-硫代黄嘌呤(6-TX)、6-甲基巯基嘌呤(6-MMP)]浓度。色谱柱为Resolve C18,柱温40℃。流动相A为0.2%的乙酸溶液,流动相B为甲醇。梯度洗脱程序为在16min内流动相B的浓度从0上升到80%。流速1.0mL/min。检测波长为0~12.5min用290nm检测6-硫鸟嘌呤(6-TG)、6-MP和6-TX,12.5min时切换为340nm检测6-MMP。结果:进样体积为10μL时,6-TG和6-TX的线性范围为0~20nmol/mL(r=0.9993,r=0.9980)。硫鸟嘌呤核苷酸浓度与测定后第9天的白细胞计数呈负相关(P<0.01)。结论:RT-HPLC法简便、准确检测6-MP代谢物浓度,有助于个体化的治疗。
- 邹亚伟王昭霞牟德海关镜明卫凤桂翟莺莺陈福雄吴梓梁
- 关键词:白血病淋巴细胞急性儿童
- 急性白血病儿童外周血CD4^+ CD25^+调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义被引量:7
- 2010年
- 本研究观察急性白血病患儿外周血CD4+ CCD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)及自然杀伤细胞(nature killer cell,NK)在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4+ CD25+ Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4+ CD25+ Treg细胞和NK细胞的方法;检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4+ CD25+ Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明:初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4+ CD25+ CD127+占CD4+ T细胞的比例分别为(9.55±2.41)%,(8.54±2.51)%和(6.25±0.85)%,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组(p(0.05);同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照(4.11±3.87%和10.41±7.20%vs14.06±5.95%,p(0.05)。结论:联合应用CD4、CD25及CD127检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4+ CD25+ CD127+ T细胞可较好地反映CD4+ CD25+ Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。
- 吴泽霖胡光玉陈福雄卢慧敏吴梓梁李华梅卫凤桂关镜明吴丽萍
- 关键词:外周血NK细胞
- 西达本胺靶向P21调控DHFR表达逆转T淋巴细胞白血病甲氨蝶呤耐药的初步探究
- 2024年
- 目的探究西达本胺(CDM)靶向P21调控二氢叶酸还原酶(DHFR)表达逆转T淋巴细胞白血病(T⁃ALL)甲氨蝶呤(MTX)的耐药机制,为T⁃ALL靶向治疗提供参考依据。方法将过表达载体(ov⁃DHFR)转染T⁃ALL细胞系Jurkat细胞,Western blot检测细胞中DHFR蛋白表达水平。将转染ov⁃DHFR载体的Jurkat细胞采用不同浓度(5、25和40μmol/L)的MTX处理、0.5μmol/L CDM处理以及不同浓度(5、25和40μmol/L)的MTX联合0.5μmol/L CDM进行处理。采用25μmol/L MTX、0.5μmol/L CDM和25μmol/L MTX+0.5μmol/L CDM联合处理进行增殖、周期和蛋白检测。MTS实验检测转染ov⁃DHFR载体的Jurkat细胞对MTX耐药增殖,并计算相应的半抑制浓度(IC50)值。MTS、流式细胞和Western blot实验分别检测CDM+MTX处理对过表达DHFR的Jurkat细胞的增殖、周期及细胞中耐药蛋白和周期蛋白表达的影响。在MTX+CDM处理的过表达DHFR的Jurkat细胞增加P21抑制剂处理,MTS、流式细胞和Western blot实验分别检测CDM+MTX+P21抑制剂处理对过表达DHFR的Jurkat细胞的增殖、周期及细胞中耐药蛋白和周期蛋白表达的影响。结果与转染阴性对照载体(ov⁃NC)组细胞MTX IC50值相比,转染ov⁃DHFR组Jurkat细胞的MTX IC50值变大。不同浓度的MTX和CDM处理发现25和40μmol/L MTX+CDM组的治疗能够最显著地抑制过表达DHFR的Jurkat细胞的增殖,而且这两组治疗效果相似,因此后续采用25μmol/L MTX+CDM组进行分析。与cell组相比,MTX组、CDM组和MTX+CDM组的过表达DHFR的Jurkat细胞在24、48、72 h这3个时间点,细胞的吸光度值均显著下降,差异均有统计学意义(F=40.180、378.900、510.700,P均<0.001)。G1期的细胞比例均显著上升,而MTX+CDM组中表现最显著(F=7.419,P<0.001)。Cyclin D、p⁃GP、BCRP蛋白表达水平均显著下调,且在MTX+CDM组细胞中表现最显著;此外,P21蛋白表达水平均显著增加,且在MTX+CDM组细胞中表现最显著。与MTX+CDM+PBS组相比,MTX+CDM+P21抑制剂组ov⁃DHF
- 梁铭吴泽霖卫凤桂杨艺邹亚伟
- 关键词:急性淋巴细胞白血病DHFRP21
- 高效液相色谱法测定小儿急性淋巴细胞白血病红细胞中硫嘌呤甲基转移酶活性的研究
- 2008年
- 目的探讨急性淋巴细胞白血病患儿红细胞中的硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性的高效液相色谱(HPLC)测定法。方法采用反相HPLC直接测定酶促反应的产物浓度,从而计算红细胞中TPMT的活性。以S-腺苷-L-甲硫氨酸(S-adenosyl—L—methionine,SAM)作为甲基供给体,6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine,6-TG)作为酶反应底物,TPMT催化6-TG生成2-氨基-6-甲基巯基嘌呤(2-amino-6-methyl mereaptopurine,6-MTG),采用高氯酸溶液终止反应及沉淀蛋白,分离上清液进行色谱分析。色谱柱为AichromBond-1 C18柱(5μm,4.6mm×150mm);等梯度洗脱,流动相为乙腈:0.01mol/L磷酸钾缓;中溶液(用盐酸调pH=2.74)(6:94,V/V),流速为1.0mL/min;柱温为35℃;进样量为50μL。荧光检测器检测,激发波长为310nm,发射波长为390nm。结果6-MTG在0~250μg/L范围内呈良好的线性关系.相关系数r=0.9999,最低检出限为0.093μg/L(S/N=3),回收率为81.4—106.3%。结论本方法操作简便、分析速度快、检出限低、重现性好、易于推广,能满足巯基嘌呤类药物代谢动力学研究和临床用药监测常规分析。
- 邹亚伟王昭霞牟德海喻凌寒关镜明卫凤桂陈福雄叶铁真吴梓梁
- 关键词:急性淋巴细胞白血病高效液相色谱
- 左旋门冬酰胺酶治疗儿童急性淋巴细胞白血病的药代和药效动力学研究被引量:2
- 2005年
- 目的观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿应用常规剂量左旋门冬酰胺酶(Lasp)后,其血浆中Lasp活性变化及底物门冬酰胺(ASN)耗竭的规律,寻找Lasp合理的用药方法。方法ALL患儿15例(340份外周血样本),基本联合化疗采用VDLP(D)方案,诱导缓解用VDLP方案,早期强化及定期维持治疗阶段用VDLD方案,其中Lasp每次10000U/m2,静脉滴注,隔天1次,共10次,分别检测应用常规剂量Lasp(每次10000U/m2)疗程前、疗程中及疗程后多个时间点患儿血浆Lasp活性及ASN浓度。结果在用药过程中,血浆Lasp活性峰值有逐渐增高的趋势,在第8次用药后达到最高峰,之后缓慢下降,而血浆中ASN浓度始终维持在极低的水平,处于“几乎完全缺乏”甚至“完全缺乏”的状态。停药后,血浆中Lasp活性持续7d维持100U/L以上,ASN浓度持续7d保持在“几乎完全缺乏”水平,随后逐渐上升至用药前水平。结论目前常规用药剂量的Lasp能够完全耗竭血浆ASN,由于Lasp应用后达到药物效应所需的血浆活性在停药后可持续7d,且Lasp相关并发症与其血浆中活性相关,为减少并发症的发生,目前Lasp的用量及用药间隔时间需要更深入探讨,使Lasp的使用更趋合理。
- 陈福雄崔彦芹吴梓梁叶铁真赖永洪邹亚伟卢成瑜关镜明卫凤桂张辉
- 关键词:L-ASP左旋门冬酰胺酶药效动力学
- 急性淋巴细胞白血病治疗中左旋门冬酰胺酶的不良反应及其预防被引量:11
- 2005年
- 赖永洪吴梓梁陈福雄叶铁真崔彦芹邹亚伟卢成瑜蓝淑玲钟帼钰关镜明卫凤桂张辉
- 关键词:左旋门冬酰胺酶白血病治疗淋巴系统恶性肿瘤长期无病生存L-ASP
- 甲型流感的临床特点与治疗分析被引量:1
- 2013年
- 目的探讨甲型H1N1流感的临床特点,并对其治疗方法及效果进行分析。方法选取2011年8月~2012年8月于我院流感儿童80例,收集临床资料,包括症状、体征、实验室及影像学检查、治愈时间及治疗结果等,进行回顾性分析。结果本次研究中,中性粒细胞升高的患儿有53.8%,淋巴细胞数减少的患儿有38.8%,56.3%患儿C反应蛋白常升高。轻型患儿治愈时间为5.8±1.6d,重型患儿治愈时间为8.4±2.1d。结论根据甲型H1N1流感的临床特点以及治疗结果分析,可以更有效的帮助临床医生在诊治甲型H1N1流感中采取更有效的治疗方式,改善治疗结果。
- 卫凤桂吴丽萍吴泽霖
- 关键词:甲型H1N1流感
- 大剂量阿糖胞苷治疗儿童难治性白血病血药浓度与耐受相关性研究
- 目的 探讨儿童难治性白血病应用大剂量阿糖胞苷后的血药浓度与耐受性.方法 从我院2008年1月-2011年1月收治的儿童难治性白血病患者中选取10例,分别给予3g/m2 q12h × 12(A组)和3g/m2 q12h ×...
- 卫凤桂孟冬梅吴丽萍吴泽霖陈福雄
- 磷酸特异化流式细胞术检测骨髓白血病细胞磷酸化信号蛋白的实验研究被引量:3
- 2011年
- 本研究通过建立磷酸特异化流式细胞术(phospho-specific flow cytometry,phospho-flow)检测白血病细胞信号通路磷酸化蛋白的实验方法,探讨Phospho-flow在白血病研究中的应用价值。取白血病患儿的骨髓,分别采用Phospho-flow单个核细胞法和Phospho-flow直接固定法进行处理。Phospho-flow单个核细胞法为:骨髓经提取单个核细胞并固定破膜处理后,加入磷酸化抗体(P-AKT,P-ERK1/2)孵育,然后用流式细胞仪分析;Phospho-flow骨髓直接固定法为:骨髓经固定/裂解液和90%甲醇破膜细胞处理,然后加入细胞表面CD抗体及P-AKT,P-ERK1/2孵育,然后上流式细胞仪分析处理。结果表明,26例白血病患儿骨髓经phospho-flow单个核细胞法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为46.2%和30.8%,经phospho-flow骨髓直接固定法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为50.0%和38.5%。经统计学分析,两种phospho-flow的骨髓处理方法在检测P-AKT和P-ERK1/2的阳性率方面无统计学差异(p>0.05)。结论:本实验室建立的phospho-flow骨髓直接固定法,能有效检测白血病患儿骨髓细胞的磷酸化蛋白,可用于白血病信号通路的实验研究。
- 李华梅曾意茹陈福雄吴丽萍卫凤桂陶佳卢慧敏吴梓梁
- 关键词:白血病
- 大剂量阿糖胞苷治疗儿童急性髓细胞性白血病的临床观察和药物浓度研究
- 目的测定初治急性髓细胞性白血病(acute myeloid leukemia, AML)儿童接受36g/m2阿糖胞苷(cytosine arabinoside , Ara-C)及18g/ m2Ara-C治疗时血浆的药物浓...
- 卫凤桂
- 关键词:阿糖胞苷
- 文献传递