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初建青: 作品数：12 被引量：68H指数：5; 供职机构：南京农业大学园艺学院更多>>; 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”中国博士后科学基金江苏省“青蓝工程”基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>

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夏黑葡萄花及果实全长cDNA文库的构建及鉴定被引量：9: 2010年; 构建葡萄花果全长cDNA文库是开展葡萄花及果实发育的分子机理研究的重要工作基础,有助于重要相关基因的克隆、功能分析、调控及其利用。以生产上广泛栽培、性状优良且极具代表性的夏黑葡萄为试材,应用优化的CreatorSMART cDNA Construction Kit技术,构建了夏黑葡萄花和果实的全长cDNA文库。文库的滴度为1.2×106pfu/mL,库容为6.0×106pfu/mL。从文库中随机挑取30个克隆进行菌落PCR鉴定的结果显示:插入片段大小为1.0～3.0kb,重组率为99%。研究结果表明,该葡萄全长cDNA文库具备较高的质量。; 王晨王文艳初建青杨光郭磊房经贵; 关键词：葡萄果实 RNA提取 CDNA文库

桃RAPD扩增产物的不同电泳检测及其序列特征被引量：3: 2011年; 以16个桃品种为试验材料,选用11个碱基引物以及严格筛选PCR退火温度的RAPD技术,对琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的RAPD、PCR扩增产物进行比较。结果表明,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测出的总谱带及多态性谱带数均高于琼脂糖凝胶,前者不存在或少存在共迁移性的现象。随机选取19个片段,发现其中有6条是编码蛋白的基因片段,说明RAPD不仅扩增基因组上的非编码蛋白序列,同时可扩增编码蛋白的基因片段,能够较全面客观地反映不同桃品种遗传上的差异。; 王文艳王力荣初建青杨光谭洪花宋长年房经贵; 关键词：RAPD 琼脂糖凝胶电泳 PAGE 测序分析

叶面喷施尿素对葡萄氮代谢相关基因表达的影响被引量：18: 2012年; 本研究利用VitisEST数据库中EST序列片段结合RT-PCR方法克隆了与氮代谢相关的硝酸盐还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和天冬酰胺合成酶(AS)的基因,并对它们进行亚细胞定位分析。同时,采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR法研究葡萄叶面喷施不同浓度尿素后5个基因的表达变化。结果表明,5个基因在葡萄幼叶中的表达水平显著高于老叶,说明叶面喷施尿素以喷布到幼叶对5个基因的表达水平影响显著;5个基因在不同时间段的表达水平差异不一致,但表达水平均高于对照,以0.3%和0.5%浓度的尿素对其影响明显;适当提高尿素水平既能提高氮代谢基因的表达水平,又能提高果实大小等果实指标,使其达到同步增加。喷施尿素6 h后,GS的表达量上升幅度明显高于其它基因,而NR在喷施尿素后48 h内一直保持着比较高的表达水平;NiR、AS表达量的变化趋势分别与NR、GS相一致,并且表现为NR﹥NiR,GS﹥AS。; 初建青王文艳房经贵张春华张彦平宋长年; 关键词：葡萄氮代谢亚细胞定位基因表达

葡萄7个重要花发育相关基因序列特征的分析被引量：11: 2010年; 根据Genbank上发表的7个葡萄花发育相关基因(VvAG、VvAP3、VvFLC、VvFT、VvSOC1、VvAP1、VvFUL)的序列信息,设计了7对特异引物,并采用PCR方法对‘香悦’葡萄中的同源基因进行了扩增,将获得的各基因片段克隆至pMD18-T载体后转化E.coliDH5α,经PCR鉴定后进行了序列测定。将得到的7个基因的编码框序列及推导出的氨基酸序列与Gen-Bank中公布的相应序列进行同源性比较,并构建系统进化树。从本研究发现不同葡萄品种的花发育基因存在核苷酸与氨基酸序列上的差异,表现在某些碱基发生转换与颠换以及氨基酸类型的变化。分析与多种植物同源基因的进化关系表明,7个葡萄花发育相关基因分别与不同树种的同源基因表现出较高的相似性,在进化上具有一定的随机性。; 杨光曹雪房经贵宋长年陶建敏王晨初建青; 关键词：葡萄花发育基因克隆

葡萄5个重要氮代谢相关基因的克隆与表达分析: 氮肥的吸收和同化是植物发育和成长的重要过程。本研究利用VitisEST数据库中EST序列片段结合RT-PCR方法克隆了与氮同化相关的5个主要基因有硝酸盐还原酶(NR)，亚硝酸还原酶(NiR)，谷氨酰胺合成酶(GS)，谷氨...; 初建青; 关键词：葡萄基因克隆亚细胞定位氮代谢

尿素对葡萄5个氮代谢相关基因表达的影响被引量：5: 2013年; 以‘藤稔’葡萄为试材,利用半定量RT-PCR和荧光定量PCR技术对5个葡萄氮代谢基因VvGHD(JF796045)、VvNiR(JF796046)、VvNR(JF796047)、VvGS(JF796048)和VvAS(JF796049)在施用尿素后的表达情况进行了分析。5个基因在葡萄叶面喷施尿素后不同时间段的表达量存在显著差异,整体呈先升高后降低的趋势;VvGDH最高表达水平发生在尿素喷施后48h,VvNR和VvNiR最高表达水平发生在24h,VvGS最高表达水平发生在6h,VvAS最高表达水平发生在2h。叶面喷施比土壤施用尿素叶中5个基因表达高峰出现的时间早,且表达水平高;土壤施尿素后叶中5个基因对尿素的响应时间比根中延后,但响应强度明显高于根中。; 初建青岳林旭房经贵刘洪宋长年张演义; 关键词：葡萄氮代谢基因

16份石榴RAPD扩增产物的两种电泳方法检测及其序列特征被引量：7: 2010年; 本实验以16个石榴品种为实验材料,筛选出10个重复性及多态性均较好的引物进行RAPD分析。分别采用琼脂糖凝胶以及聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳检测方法对PCR扩增结果进行检测并对其结果进行比较,结果显示,两种电泳方式均能得到较为清晰的扩增条带,且两种电泳方式获得的条带总数及多态性条带数均有所不同,琼脂糖凝胶电泳方法共检测出76条带,其中有43条为多态性谱带,多态性比率为56.4%;而在PAGE电泳方法共检测出123条谱带,多态性谱带数为87条,多态性比率为70.95%。PAGE电泳方法检测出的条带数约为琼脂糖凝胶电泳方法检测出条带数的1.5倍。基于两种电泳方法所得RAPD标记的多态性位点,利用NYSYS软件计算遗传相似系数,并构建遗传关系聚类图,分析结果显示,石榴遗传多样性丰富,两种电泳方法所得聚类结果大致相同,可以利用RAPD分子标记及两种电泳检测方法对不同数量的石榴进行分子水平的品种鉴定和遗传多样性的分析。同时通过对来自几个引物随机挑选的17个片段进行克隆,测序结果显示17个片段都是对应引物的RAPD扩增产物,其中有3条是编码蛋白的基因片段,表明了RAPD不仅扩增基因组上的非编码蛋白序列,同时也可以扩增编码蛋白的基因片段,这为更好地认识RAPD技术的实质以及促进石榴产业的发展提供了理论依据。; 张彦苹曹尚银初建青薛华柏王文艳房经贵; 关键词：石榴 RAPD PAGE

石榴RAPD扩增产物的不同电泳检测及其序列分析: 本试验以16个石榴品种为试验材料，筛选出10个重复性及多态性均较好的11个核苷酸的引物进行RAPD分析.对于PCR扩增结果分别用琼脂糖凝胶以及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测方法进行检测并对其结果进行比较，结果显示，两...; 张彦苹曹尚银初建青薛华柏王文艳房经贵; 关键词：石榴 RAPD 电泳

李RAPD扩增片段的不同电泳检测及其序列特征分析被引量：3: 2010年; [目的]为更好地将随机扩增多态(RAPD)技术应用于李品种资源鉴定及遗传基础的研究提供理论依据。[方法]以16个李品种为材料,分别使用琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)对RAPD的PCR扩增产物进行电泳检测,并对检测效果进行比较。[结果]PAGE电泳检测出的谱带总数量以及多态性谱带的数量均高于琼脂糖凝胶。根据2种电泳系统获得的标记信息构建了2张树状聚类图,2张聚类图的聚类情况基本一致。通过对随机挑选的23个片段进行克隆与测序,结果发现23个片段都是对应引物的RAPD扩增产物。其中有4条是编码蛋白的基因片段,说明RAPD不仅扩增基因组上的非编码蛋白序列,同时可以扩增编码蛋白的基因片段。[结论]RAPD不仅能扩增基因组上的非蛋白编码序列,而且还可以扩增编码蛋白的基因片段,是能够较全面反映基因组序列信息理想的DNA标记技术。; 初建青张敬茹杨光谭洪花房经贵; 关键词：琼脂糖凝胶电泳 PAGE

利用基因表达检测葡萄叶面喷施尿素效应的初步研究: 分离和克隆‘藤稔’葡萄(Vitis vinifera L.)氮代谢循环途径中6个关键酶(GS、GOGAT、GDH、AS、NR和NiR)的编码基因,并利用基因时空表达信息对葡萄叶面施肥效应进行初步研究,为进一步研究葡萄氮素...; 初建青王文艳房经贵张彦平张春华; 关键词：葡萄克隆基因表达亚细胞定位; 文献传递

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