陈溥言
- 作品数:585 被引量:2,818H指数:27
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- ELISA检测禽呼肠孤病毒抗体方法的建立及应用被引量:2
- 1991年
- 建立了一种检测禽呼肠孤病毒(ARV)抗体的敏感方法——ELISA法。用此法对某鸡场血清样品进行检测,琼扩检出阳性率为65%,ELISA检出阳性率为100%,ELISA方法明显比琼扩敏感。另外,用ELISA方法诊断出江苏某鸡场发生的鸡病毒性关节炎,并用ELISA法筛选出8株分泌ARVMcAb的杂交瘤细胞株。ELISA方法因其特异、敏感、可靠,将成为SPF鸡群,祖代鸡群净化ARV的有效检测手段。
- 陈士友陈溥言蔡宝祥
- 关键词:抗体ELISA
- 禽IL-2与传染性法氏囊VP2融合蛋白免疫学特性被引量:12
- 2010年
- 为研究禽细胞因子IL-2与IBDV主要保护性抗原VP2基因融合蛋白的免疫学特性,将重组的rVP2-IL-2融合蛋白免疫鸡,通过IBDV-VP2 ELISA抗体效价、抗体亚型(IgG1和IgG2a)、淋巴细胞增殖、INF-γ和IL-4细胞因子的分泌水平、中和抗体以及动物攻毒试验检测评价其对鸡体免疫水平的影响。抗体滴度测定和淋巴细胞增殖试验结果显示,rVP2-IL-2融合蛋白免疫鸡体的体液和细胞免疫应答水平均明显高于单独的VP2蛋白免疫组。抗体亚型测定结果显示,rVP2-IL-2融合蛋白免疫组鸡体能产生一个平衡的IgG1和IgG2a抗体反应。细胞因子ELISA试验结果表明rVP2-IL-2融合蛋白能有效平衡Th1(γ-IFN)和Th2(IL-4)类型的细胞免疫反应。动物攻毒试验rVp2-IL-2融合蛋白免疫组鸡体获得了85%的保护率,表明构建的rVP2-IL-2融合蛋白对IBDV的攻击具有较好的免疫保护作用。本研究为进一步研制IBD高效的基因工程疫苗奠定了基础。
- 王臣赵战勤张春杰刘一尘丁轲李银聚程相朝陈溥言
- 关键词:传染性法氏囊VP2基因IL-2融合蛋白
- 伪狂犬病病毒上海株gE基因克隆及其含GFP基因质粒载体的构建被引量:7
- 2001年
- 根据已发表的伪狂犬病病毒 (PRV)gE基因序列设计 1对引物 ,用PCR法扩增了PRV上海株 (PRV SH)的 gE基因 ,并克隆入 pUC18中。利用gE基因中限制性酶切位点 ,把绿色荧光蛋白 (GFP)的基因表达盒插入 gE基因中 ,构建了含GFP的载体 pUCgE GFP。
- 姜焱汪海健祁贤叶向阳陈溥言
- 关键词:伪狂犬病病毒GE基因绿色荧光蛋白基因克隆质粒
- 表达MDVgB基因的重组鸡痘病毒的免疫效果研究被引量:1
- 2002年
- 将马立克氏病病毒 (MDV)gB基因插入鸡痘病毒 (FPV)中 ,构建了含有MDVgB基因的重组鸡痘病毒 (rFPV)。用rFPV、HVT冻干苗、rFPV +HVT疫苗分别免疫 1日龄AA肉用雏鸡 ,于 8日龄攻毒后观察疫苗免疫效果。实验结果表明 ,HVT、rFPV、HVT +rFPV疫苗免疫组比攻毒对照组病毒血症持续时间短 ;上述 3种疫苗免疫后用京 1株MDV(vMDV)攻毒 ,脾脏T淋巴细胞增殖反应处于较高水平 ,而攻毒对照组脾脏T淋巴细胞增殖反应减弱 ,两者差异显著(P <0 0 5 ) ;用HVT +rFPV二价疫苗免疫雏鸡 ,其抵抗vMDV攻击的免疫保护力高于HVT和rFPV单价苗 ,HVT +rFPV、rFPV、HVT免疫保护指数分别为 81 7% ,6 3 4 %和 6 4 1%。以上结果表明 ,表达MDVgB基因的重组鸡痘病毒疫苗在一定程度上能保护鸡体抵抗vMDV的攻击 ,并且HVT和rFPV具有免疫协同作用。
- 丁巧玲陈溥言
- 关键词:MDVGB基因重组鸡痘病毒免疫效果鸡马立克氏病病毒
- 小亚璃眼蜱对牛巴贝斯虫未定种和环形泰勒虫传播的试验研究被引量:14
- 2005年
- 利用蜱传播试验确定小亚璃眼蜱对中国新分离的牛的巴贝斯虫未定种和环形泰勒虫的传播能力与传播方式,进而明确其在中国牛梨形虫病传播中的流行病学意义。试验结果表明:小亚璃眼蜱可在雌虫阶段受到巴贝斯虫未定种的感染,并可在次代若虫(2/2)和成虫(3/3)阶段将病原传播给试验牛;小亚璃眼蜱幼虫和若虫吸入环形泰勒虫,饱血脱落的幼虫和若虫所蜕化发育的饥饿若虫(2/2)和成虫(2/2)均可将病原传递给敏感动物;感染巴贝斯虫未定种的小亚璃眼蜱饱血雌虫所孵育出的次代幼虫和若虫仍可被环形泰勒虫感染,所发育出的若虫(2/2)和成虫(2/2)可在一次传播试验中将环形泰勒虫和巴贝斯虫未定种同时传播给试验动物。
- 罗建勋殷宏关贵全马米玲孙彩琴鲁炳义白启吕文顺陈溥言
- 关键词:环形泰勒虫
- 鸡法氏囊提取物的组分分析及其活性测定被引量:2
- 2002年
- 应用薄层层析技术分析鸡法氏囊提取物的组分 ,并用体内和体外免疫试验测定其活性。实验结果表明 ,相对分子质量为 10 0 0以下的鸡法氏囊提取物中共有 9种成分的氨基酸或小肽 ,其中第 3组分与囊素标准品具有相同的迁移率(0 6 9)。适当浓度的囊素和法氏囊提取物均能促进杂交瘤细胞分泌抗体 ,与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 ) ;2 5mg·mL-1提取物具有相当于 1μg·mL-1囊素的促杂交瘤细胞抗体分泌活性。法氏囊提取物与猪瘟疫苗同时注射 ,可显著提高接种猪产生特异性抗体的能力 。
- 缪德年樊生超姚惠娟苏小运陈溥言
- 关键词:活性测定
- 鸡传染性贫血病毒研究进展被引量:1
- 1996年
- 鸡传染性贫血病毒研究进展卢春,陈溥言,蔡宝祥(南京农业大学动物医学院,南京210095)AdvancesofResearchonChickenAnaemiaVirus¥LuChun;ChenPuyan;Baoxiang(CollegeofVeteri...
- 卢春陈溥言蔡宝祥
- 关键词:鸡传染性贫血病毒分子生物学家禽病毒
- 表达乙型脑炎病毒E蛋白多表位抗原的重组痘病毒rMVA-mep及其应用
- 本发明公开了表达乙型脑炎病毒E蛋白多表位抗原的重组痘病毒rMVA-mep及其应用。一种重组转移载体pGEM-K1L-mep,包含表达乙型脑炎病毒E蛋白多表位抗原的DNA序列:SEQ ID NO.1,以及MVA转移载体pG...
- 王凤娟陈溥言冯秀丽曹瑞兵周斌茅翔
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病病毒的提纯和鉴定被引量:3
- 1995年
- 取鸡传染性法氏囊病(IBD)患鸡的法氏囊病料经氟利昂作用去除杂蛋白,并经甘油一酒石酸钾密度梯度离心进一步纯化;细胞适应毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)上出现明显细胞病变后冻融、PEG沉淀纯化。电镜观察、吸光庆测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的结果表明,得到了完整形态的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)。
- 王成明蔡宝祥陈溥言
- 关键词:鸡病IBD病毒提纯电泳
- 稳定表达CD163蛋白的猪肺泡巨噬细胞系的建立被引量:3
- 2012年
- 以RT-PCR方法从原代猪肺泡巨噬细胞中获得CD163 cDNA序列,然后测序鉴定,对突变碱基进行修正,将修正后碱基序列克隆入真核表达载体pcDNA4.0中,构建重组真核表达质粒pcDNA4.0-CD163,通过BamHⅠ/NotⅠ双酶切及测序鉴定其正确性。使用脂质体2000将pcDNA4.0-CD163转染猪肺泡巨噬细胞系3D4/21(CRL-2843),通过Zeocin抗性筛选,建立稳定表达CD163的猪肺泡巨噬细胞系。RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)检测结果表明CD163在mRNA和蛋白质水平均已表达。通过Zeocin抗性筛选,共获得8株表达CD163的重组细胞株,IFA检测结果表明表达的CD163定位于重组细胞的细胞膜表面。去除筛选抗性后连续传代10代,间接免疫荧光检测结果确定重组细胞株在10代内性状稳定,说明稳定表达CD163的猪肺泡巨噬细胞系构建成功。
- 赵凯冯磊郑其升侯继波陈溥言
- 关键词:猪肺泡巨噬细胞