曹瑞兵
- 作品数：202 被引量：709H指数：17
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- PrV上海株TK基因缺失株的构建及其生物学特性研究
- 提取伪狂犬病病毒(PrV)SH株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank发表的PrV基因序列(NC006151,BK001744),选择保守序列设计两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧(含部分TK基因)...
- 苏鑫铭于春梅王敏秀曹瑞兵周斌陈溥言
- 关键词：伪狂犬病病毒TK基因生物学特性半数致死量
- 文献传递
- 一种具有免疫调节作用的法氏囊七肽
- 本发明涉及一种具有免疫调节作用的法氏囊七肽，及其在免疫中的应用(提高动物的免疫能力，能提高疫苗的免疫效果及影响肿瘤细胞的活性)，属于免疫学领域。本发明分离到一种七肽，分子量为722.240，氨基酸序列为EPASGMM，结...
- 冯秀丽陈溥言王芳权魏建超曹瑞兵周斌茅翔
- 文献传递
- 一种促进AIV和/或NDV疫苗的免疫反应的法氏囊活性五肽及应用
- 本发明涉及一种促进AIV和/或NDV疫苗的免疫反应的法氏囊活性五肽及应用。本发明所述的法氏囊活性五肽，氨基酸组成为Met Pro Pro Thr His，结构简单，免疫原性极弱。本发明活性肽具有促进疫苗免疫反应的功能，在...
- 冯秀丽宗嫚嫚郝珊珊郑阳张则蔡佳希曹瑞兵陈溥言
- 文献传递
- 三肽囊素特异性结合肽及筛选方法
- 本发明提供了一种三肽囊素特异性结合的短肽及其筛选方法，属于生物技术领域。本发明筛选的短肽氨基酸序列分别为短肽1：ACTKHLCLLQPL或短肽2：MSCNDTLCLLPN。用重组的TRX－BS融合蛋白作为靶分子，利用噬菌...
- 王臣陈溥言魏建超张广曹瑞兵周斌
- 文献传递
- 重组猪IL-2对口蹄疫重组腺病毒免疫增强效果的研究被引量：3
- 2014年
- 目的构建表达猪白细胞介素-2(poIL-2)的重组腺病毒,研究其作为佐剂对口蹄疫重组腺病毒免疫效果的影响。方法将poIL-2基因克隆到腺病毒的穿梭载体中,与腺病毒骨架载体共转化BJ5183感受态细胞,获得的重组病毒质粒通过脂质体转染HEK-293A细胞,获得表达poIL-2的重组腺病毒(rAd5poIL-2)。以rAd5poIL-2作为佐剂与表达PMDV VP基因的重组腺病毒(rAd5VP1)联合免疫小鼠,以单独免疫rAd5VP1的小鼠作为对照。通过测定淋巴细胞增殖指数、特异性抗体、IL-4和IFN-γ的水平来衡量rAd5poIL-2对rAd5VP1的免疫增强效果。结果经PCR鉴定,成功构建了rAd5poIL-2。MTT与抗体检测结果显示,rAd5poIL-2既能增强rAd5VP1诱导小鼠淋巴细胞增殖,又能促进rAd5VP1诱导小鼠特异性抗体的产生,细胞因子检测结果显示,rAd5poIL-2能促进rAd5VP1诱导Th1和Th2的分化。结论 rAd5poIL-2可望成为口蹄疫疫苗的候选佐剂。
- 苏春霞段相国曹瑞兵郑洁黄菱郭琳陈溥言
- 关键词：猪白细胞介素2重组腺病毒口蹄疫
- 抗乙型脑炎病毒的单克隆抗体及其应用
- 本发明属于生物领域，涉及抗乙型脑炎病毒的单克隆抗体及其应用。分泌抗乙脑病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞株2B4，2011年8月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.5124。一种抗乙...
- 周斌邓文蕾曹瑞兵苏小东陈溥言
- 新型鸭肝炎病毒GD1株VP1结构蛋白的基因分析及B细胞抗原表位预测被引量：5
- 2011年
- 对新型鸭肝炎病毒(DHV)GD1株VP1结构蛋白基因进行了扩增、克隆及序列测定。采用DNAStar Protean软件对VP1蛋白的二级结构、可塑性、亲水性、表面可能性及抗原指数等参数进行分析,综合预测其B细胞表位分布。结果表明,VP1基因长720 bp,编码240个氨基酸。与国内和韩国分离的新型毒株的氨基酸序列相似性最高,分别为99.6%,92.9%和92.5%。与台湾新型DHV的序列相似性均较低,分别为80.6%,80.2%,与传统的Ⅰ型DHV毒株的序列相似性最低,相似度仅为25.5%。较1型DHV存在多个氨基酸的插入和较多氨基酸位点的突变,高变区主要集中在180～220位。VP1结构蛋白的二级结构较为复杂,含有较多的β片层结构和转角结构,有多个区域为B细胞优势表位。该方法预测的B细胞表位结果有较高的准确度,为试验确定新型DHV毒株的VP1结构蛋白的B细胞表位和新的多表位疫苗设计提供了理论基础。
- 范卫国杜佳慧曹瑞兵陈溥言
- 关键词：新型鸭肝炎病毒VP1蛋白B细胞表位
- 日本脑炎病毒sfRNA靶向PKR和IFITM2的翻译抑制细胞干扰素应答
- 2022年
- 本研究旨在探究日本脑炎病毒(JEV)感染细胞后产生非编码亚基因组RNA(sfRNA)的生物学功能。应用Northern blot检测JEV感染细胞产生sfRNA的动态特征;通过Western blot和qPCR检测JEV感染细胞中PKR、IFITM2等干扰素刺激基因的表达;通过体外转录制备JEV sfRNA,转染细胞研究其功能。实验结果表明:JEV感染Huh7细胞后期可下调PKR、IFITM2的表达,与sfRNA产生的时间规律一致;将体外转录制备的JEV sfRNA转染细胞后可下调IFN-α刺激细胞中IFITM2、PKR蛋白的含量,但其mRNA水平与对照组差异不显著,推测JEV sfRNA抑制其翻译过程;SL-Ⅱ区域缺失的JEV sfRNA不能有效下调干扰素诱导细胞中IFITM2和PKR蛋白的表达。因此,本研究发现JEV sfRNA在翻译阶段抑制PKR和IFITM2蛋白的表达,为病毒增殖营造有利环境。
- 杨兴淼徐昊曹瑞兵
- 关键词：日本脑炎病毒ISGPKR
- 重组酵母鸡α干扰素的诱导表达及其抗MDV、NDV能力被引量：8
- 2010年
- 【目的】获得鸡α干扰素重组酵母菌诱导表达的最佳诱导时间和甲醇的体积分数,并测定诱导表达产物对鸡马立克氏病毒(MDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的抑制能力。【方法】挑取2个鸡α干扰素重组酵母菌单菌落至BMGY培养基中培养,待菌液OD600为4左右时,分别转接至BMMY培养液诱导,1瓶每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇,另1瓶每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇,于24,48,72 h收集样品,备SDS-PAGE检测用。根据不同时间(24,48,72,96 h)诱导上清液表达量的差异,留用表达量最高时段的上清液,经初步纯化后,利用鸡胚成纤维细胞(CEF),分别测定重组酵母鸡α干扰素抑制MDV及NDV的能力。【结果】鸡α干扰素重组酵母菌在每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇诱导48 h时,或每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇诱导72 h时,重组酵母鸡α干扰素表达量均达到最高;且诱导上清液具有较好地抑制MDV、NDV的能力。【结论】获得了鸡α干扰素重组酵母菌小量发酵的最佳条件;获得的重组酵母鸡α干扰素对MDV和NDV有明显的抑制作用。
- 蔡梅红曹瑞兵曹景立王秀红陈溥言
- 关键词：酵母MDVNDV
- 插入单个loxP位点的伪狂犬病病毒上海株TK基因缺失株的构建被引量：3
- 2006年
- 根据GenBank已发表的pEGFP-C1序列,设计并合成两对引物,PCR扩增出两端各含一loxP位点的GFP表达盒GFP-loxP。克隆于转移载体pSKLR获得pSKLR-GFP-loxP。基于同源重组原理,pSKLR-GFP-loxP与PRVSH株基因组DNA共转染293T细胞,在BrdU的筛选压力下,利用蚀斑法在TK-143细胞上筛选出表达GFP的TK基因缺失的重组毒株rPRV1。将表达Cre酶的质粒载体pPOG231与rPRV1基因组DNA共转染293T细胞,在Cre酶的作用下去除GFP表达盒以及一个loxP位点,筛选得到含单个loxP位点的重组病毒株rPRV2。PCR扩增证实所获得的重组病毒TK缺失270bp,只有一个34bp的loxP位点,并且能在RK-13细胞上稳定传代。LD50试验表明rPrV2的毒力下降。
- 王敏秀苏鑫铭于春梅曹瑞兵陈溥言
- 关键词：TK基因CRELOXP
