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大鼠睡眠剥夺后行为及下丘脑诱生型一氧化氮合酶mRNA表达的变化被引量：28: 2002年; 目的 :观察快动眼睡眠 ( rapid eye movement sleep,REMS)剥夺大鼠行为的改变及其下丘脑诱生型一氧化氮合酶( i NOS) m RNA表达的时相变化。方法 :小站台水环境法剥夺大鼠睡眠 2 4、4 8、72 h后 ,用旷场实验 ( open field test,OFT)观察大鼠主动行为的变化 ,同时用半定量逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)检测其下丘脑 i NOS m RNA的表达。结果 :睡眠剥夺2 4、4 8h组大鼠的旷场实验得分较非剥夺组高 ( P<0 .0 1) ,剥夺 72 h后降低 ;睡眠剥夺 2 4 h及 4 8h组 i NOS m RNA的表达量无显著变化 ,但剥夺 72 h组 i NOS m RNA的表达量大幅度增加 ( P<0 .0 1)。结论 :内源性一氧化氮 ( NO)增加可能是睡眠剥夺后机体精神行为变化的重要原因 ,高水平的; 刘长云王海明陈坚季红光周建光; 关键词：睡眠剥夺睡眠一氧化氮合酶下丘脑 MRNA

DNA芯片技术及其在营养学中的应用被引量：7: 2001年; DNA芯片技术是近年来迅速发展起来的分子生物学技术 ,该技术在人类基因组计划、新基因克隆、疾病诊断等许多生命科学领域已得到广泛应用 ,并显示出快速准确、多功能、微型化和自动化等无可比拟的优点。营养学作为生命科学的重要分支之一 ,DNA芯片技术在营养学中也有着潜在的广泛应用前景。本文就DNA芯片技术的原理、主要流程、优点及在营养学中的应用前景作一综述。; 沈慧王福俤陈坚; 关键词：DNA芯片基因芯片营养学

组蛋白乙酰转移酶的研究进展被引量：2: 2000年; 组蛋白乙酰化与基因转录等生物效应有密切的关系，组蛋白乙酰化主要是由组蛋白乙酸转移酶催化的。本文主要介绍了基因转录有关组蛋白乙酰转移酶，包括ＨＡＴＡ／Ｇｃｎ５ｐ、ｐ３００／ＣＢＰ、ｐ／ＣＡＦ、ＡＣＴＲ、Ｓｒｃ１、ＴＡＦⅡ ２５０、Ｅｌｐ３等的来源，与其相互作用的蛋白质及其主要功能。; 陈坚张晓琴; 关键词：组蛋白乙酰转移酶组蛋白乙酰化基因转录

3个HDAC1的保守氨基酸定点突变的获得: 2000年; :目的 :为了研究HDAC1保守氨基酸的定点突变对其功能的影响 ,需要建立HDAC1保守氨基酸定点突变的突变子。方法 :在克隆HDAC1cDNA的基础上 ,利用AlteredSiteⅡ体外突变系统对HDAC1保守氨基酸中的三个氨基酸位点进行突变 ,经DNA测序鉴定。结果与结论 :结果分别获得了HDAC1的C15 1A ,Y188F ,S197A的定点突变子 ,为进一步研究HDAC1保守氨基酸的定点突变对其功能的影响打下了基础。; 陈坚张晓琴傅继梁; 关键词：定点突变氨基酸 HDAC1

组蛋白脱乙酰化酶及其与基因转录的关系被引量：1: 2000年; 含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在着密切的关系。; 陈坚张晓琴傅继梁; 关键词：基因转录

脊髓火器伤后GDNFmRNA表达的实验研究: 2003年; 目的观察脊髓火器伤后GDNFmRNA的表达变化并探讨其意义。方法利用民用射钉枪建立大鼠脊髓火器损伤模型,不同时间采用半定量RT-PCR方法,观察T12～L1段脊髓GDNFmRNA表达的变化。结果脊髓损伤前,GDNFmRNA在T12～L1段脊髓微量表达,脊髓损伤后表达逐渐减少,伤后1、4、7、10d分别减少25%、71%、82%、86%。结论脊髓GDNFmRNA表达减少,是由于失去靶组织转运GDNFmRNA所造成,这为外源性GDNF治疗脊髓火器伤提供了理论依据。; 宋海涛贾连顺陈哲宇陈坚刘传云何成; 关键词：胶质细胞源性神经营养因子脊髓火器伤

转人IL-2基因对原代肾细胞癌致瘤性的影响: 2001年; 目的　研究转人IL 2基因对原代肾细胞癌 (RCC )细胞致瘤性的影响 ,为RCC的基因治疗打下基础。方法　将人IL 2基因与逆转录病毒载体 pLNCX连接 ,转染包装细胞 ,经鉴定后 ,感染原代RCC细胞 ,采用MTT法检测转人IL 2基因的原代RCC的IL 2的活性。然后 ,将转人IL 2基因的原代RCC和未转基因原代RCC分别接种裸鼠 ,观测转IL 2前后RCC细胞致瘤性的变化。结果　转人IL 2的RCC细胞IL 2的生物学活性平均为 (2 44± 5 2 )U /ml ,接种裸鼠后无肿瘤长出。结论　转人IL 2基因使原代RCC失去了致瘤性 ,转人IL 2基因的RCC细胞可作为瘤苗用于肾细胞癌的治疗。; 张晓琴陈坚曹广文万谟彬戚中田; 关键词：肾细胞癌致瘤性白细胞介素2 基因治疗

组蛋白乙酰化与基因转录的关系被引量：2: 2000年; 染色体核心组蛋白乙酰化与基因的激活存在着密切的关系。本文主要介绍了组蛋白乙酰化与基因转录时基本的转录机器和转录激活子的关系,非组蛋白的乙酰化与其激活转录的关系,并例举了一些可能的机理。; 陈坚张晓琴; 关键词：组蛋白乙酰化组蛋白乙酰转移酶基因转录

转人IL-2基因对原代RCC癌基因表达的影响: 2001年; 目的　研究转人 IL - 2基因对原代肾细胞癌 (RCC)基因表达的影响 ,为进一步对 RCC的基因治疗打下基础。方法　将人 IL - 2基因与逆转录病毒载体 p L NCX连接 ,转染包装细胞 ,经鉴定后 ,感染原代 RCC细胞 ,EL ISA法检测转人 IL - 2基因的原代 RCC的 IL - 2的表达 ,再以免疫组化法检测转人 IL - 2基因的原代 RCC和未转染原代 RCC的癌基因表达情况。结果　转人 IL - 2的 RCC细胞上清 IL - 2的浓度平均为 (390 8± 42 1) pg/ m l,人原代RCC细胞癌基因表达分析显示 EGFR、p185 erb B- 2、c- met和 bcl- 2均有轻度至中度的表达 ,转人 IL - 2基因的 RCC细胞的 p185 erb B- 2和 c- met的表达有一定程度的降低 ,而 EGFR和 bcl- 2的表达均没有影响。结论　转人 IL - 2基因可使原代 RCC的 p185 erb B- 2和 c- met的表达降低 ,为转人 IL - 2基因治疗肾细胞癌提供了部分理论基础。; 张晓琴陈坚曹广文万谟彬戚中田; 关键词：白细胞介素2 癌基因 IL-2 RCC

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陈坚