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猪IP-10蛋白真核表达载体的构建: 2010年; 根据GenBank上发表的猪IP-10蛋白的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增出目的片段,将扩增产物连接到表达载体pcDNA3.1上,进行序列测定和分析。结果表明,所克隆的目的基因的核苷酸长为312bp,共编码104个氨基酸。该基因片段与已发表的猪IP-10蛋白基因核苷酸序列同源性为100%,氨基酸同源性为100%。本试验为重组猪IP-10蛋白的生产及功能研究奠定了基础。; 赵协张廷虹常维山; 关键词：重组质粒

猪趋化因子CXCL12的克隆与真核表达: 为研究猪CXCL12的生物学功能,采用RT-PCR的方法从猪脾脏组织中扩增猪CXCL12基因的cDNA,构建真核表达载体pcDNA3.1-CXCL12,再转染至HEK293FT细胞后,24 h后经间接免疫荧光(IFA)和...; 张元鹏王磊常维山张振杰赵协; 关键词：真核表达趋化活性; 文献传递

猪Mx1基因的克隆表达及抗病毒活性研究被引量：2: 2014年; 本文应用(RT-PCR)技术,从猪瘟弱毒疫苗和Poly:IC共刺激7 h的PK15细胞的cDNA中扩增出编码Mx1蛋白的全长基因,并通过引物设计填补了PK(15)细胞系Mx1 cDNA序列中3'端11bp的缺失,成功获得Mx1完整基因的克隆。构建了重组表达质粒pRetroQ-sMx1,转染HEK293T细胞并表达Mx1蛋白,利用微量细胞病变抑制法测定其抗病毒活性。双酶切鉴定和核酸序列测定证实pRetroQ-sMx1真核表达质粒构建成功,转染HEK 293T细胞后,能够检测到绿色荧光,Western blot证实为目的蛋白。微量细胞病变抑制法测定重组蛋白具有一定的抗水疱性口炎病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性。重组Mx1具有一定抗病毒生物功能,为进一步研究重组Mx1蛋白的活性以及Mx1抗病毒药物奠定了基础。; 刘玉洁赵协张廷虹曹广明扬志昆; 关键词：克隆真核表达抗病毒活性

假型病毒制备与应用进展被引量：1: 2010年; 假型病毒（Pseudotyped virus）是利用现代生物技术人工合成的一种病毒，它与真病毒相比不仅囊膜上具有其他病毒的糖蛋白．而且核酸分子上编码囊膜蛋白的基因被删除，; 张振杰崔丽娜张元鹏赵协王亮常维山; 关键词：病毒现代生物技术囊膜蛋白核酸分子糖蛋白

猪干扰素诱导蛋白IP-10和Mx1克隆、表达及生物活性检测: 研究表明,干扰素的众多生物学功能是通过其诱导的多种效应蛋白质来实现的。为了进一步研究干扰素抗病毒机理和研发抗病毒重组生物药物,本实验选取干扰素诱导产生的蛋白质中的两个——IP-10蛋白和Mx1蛋白进行研究。 1...; 赵协; 关键词：干扰素诱导蛋白 IP-10 基因克隆蛋白表达生物活性; 文献传递

猪Mx1基因的克隆及在293T细胞中的表达: 为研究猪MX1的生物学功能,采用RT-PCR的方法从猪瘟弱毒疫苗和Poly:IC刺激7 h的PK15细胞cDNA中扩增出编码MxA蛋白的全长基因,构建真核表达载体pRetroQ-sMx1,再转染至HEK293T细胞后,4...; 赵协张廷虹常维山; 关键词：真核表达转染; 文献传递

猪趋化因子CXCL12及其受体CXCR4真核表达载体的构建: 2009年; 采用RT-PCR的方法从猪脾脏组织中扩增猪CXCL12、CXCR4基因的cDNA,对编码区核苷酸序列分析后,将扩增产物经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后再克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5HisA,构建了pcDNA3.1-CXCL12和pcDNA3.1-CXCR4重组质粒,经酶切及测序鉴定后,进行核苷酸同源性分析。结果表明RT–PCR分别获得获得长度为386bp、1019bp的阳性产物,酶切鉴定及序列分析后,证实真核表达质粒pcDNA3.1-CXCL12和pcDNA3.1-CXCR4构建成功,为进一步研究猪CXCL12、CXCR4基因的功能奠定基础。; 张元鹏赵协常维山张振杰王亮; 关键词：CXCR4 CXCL12 真核表达载体

猪骨髓基质抗原2基因的克隆、表达及生物学活性研究: 2012年; 研究目的是克隆猪骨髓基质抗原2(Bone marrow stromal antigen-2,BST-2)基因并进行真核表达,获得具有抗病毒活性的重组BST-2蛋白。研究通过RT-PCR从猪瘟弱毒疫苗和聚肌胞(Poly I:C)刺激的猪肾细胞(PK-15)中扩增出猪BST-2cDNA,克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建重组表达质粒pcDNA-BST-2,转染HEK293T细胞,纯化BST-2蛋白并经Bradford法定量,Western blot检测,研究BST-2抗病毒生物学活性。酶切鉴定和核酸序列测定证实pcDNA-BST-2真核表达质粒构建成功,转染HEK293T细胞后,经间接免疫荧光能够检测到绿色荧光。生物学活性测定重组BST-2蛋白具有一定的抗水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)、H9禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)及猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,PRRSV)的活性。结果表明,重组BST-2具有一定抗病毒生物功能,为进一步研究重组BST-2蛋白的活性以及BST-2抗病毒药物研究奠定了基础。; 张廷虹赵协曹广明张振杰常维山; 关键词：真核表达抗病毒活性

抗菌肽的研究及应用前景: 2010年; 随着抗生素的大量使用，耐药性的问题越来越严重，寻找合适的活性物质来替代抗生素是解决这一问题最有效的途径，抗菌肽（Antibacterial pep tide）是生物细胞特定基因编码，是经特定外界条件诱导产生的一类多肽，具有相对分子质量小、热稳定、杀菌范嗣广、作用机制独特等特点，不仅对细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体及一些活性细胞有杀伤活性，同时还在免疫调节、激素调节及刺激伤口愈合等方面有重要作用，并且是一类很难导致微生物耐药性的新型抗感染药物多肽，是理想的抗生素替代品。; 王亮赵协常维山; 关键词：抗菌肽抗生素替代品相对分子质量生物细胞抗感染药物基因编码

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赵协