林小龙
- 作品数：17 被引量：14H指数：2
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省高校科技创新团队支持计划湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学电气工程更多>>
- miRNA-转录因子-靶基因前馈环路:肿瘤与动脉粥样硬化调控新机制被引量：1
- 2013年
- miRNA是一类长约21～25 nt,进化上高度保守的单链非编码RNA。随着对miRNA研究逐渐深入,发现miRNA和转录因子(transcription factor,TF)可以同时调控同一基因,即转录因子又可通过影响miRNA间接的调控该基因表达,这种由miRNA、转录因子与靶基因三者组成的调控环路称为前馈环路(feed-forward loop,FFL)。miRNA-转录因子-靶基因形成的前馈环路在动脉粥样硬化与肿瘤发生发展过程中发挥了重要的调控作用,对这些疾病的机制和防治研究具有重要意义。
- 何兴兰林小龙王佐
- 关键词：MIRNA转录因子靶基因
- 5-Aza-CR调节FXR基因去甲基化抑制载脂蛋白（a）表达被引量：1
- 2013年
- 目的观察5-Aza—CR的DNA去甲基化作用对HepG2细胞载脂蛋白（a）[Apo（a）]表达的影响，并探讨其作用机制。方法选取Apo（a）高表达细胞株HepG2细胞为研究对象，MTT法测定不同浓度的5-Aza—CR处理细胞72h后细胞相对存活率，选取合适药物作用浓度范围；通过Westernblot检测5-Aza—CR不同浓度组和不同处理时间组HepG2细胞Apo（a）、FXR的表达水平，用RT—PCR检测Apo（a）、FXR的mRNA水平；MSP检测5-Aza-CR不同浓度组及不同时间组FXR基因启动子甲基化水平。
- 谭剑凯谭小进赵岳林小龙何兴兰马小峰张凯张海危当恒姜志胜王佐
- 关键词：DNA甲基化FXR
- FGF21对THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制
- 2013年
- 目的探讨FGF21对THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出的影响及机制。方法采用体外培养的THP-1细胞作为研究对象，用PMA诱导为巨噬细胞，加入OX-LDL（50mS／L）诱导泡沫细胞。同时加入不同浓度的FGF21处理，油红0观察细胞的脂质蓄积情况，高效液相色谱法测定细胞内总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）、胆固醇酯（CE）变化，液体闪烁计数仪测定胆固醇流出率，低pH值EUSA测定细胞内cAMP水平，采用实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测细胞中ABCAl、ABCGl、LXRα、PPA脚的表达变化。结果泡沫细胞模型组脂质蓄积远多于正常组。而FGF21处理组（200ng／L、400ng／L）与泡沫细胞模型组相比脂质蓄积明显减少，并可以显著减少细胞内TC、FC、CE及CE／TC，同时显著提高细胞胆固醇流出率、细胞内cAMP水平及ABCAl、ABCGl表达。结论FGF21可以促进THP-1源性巨噬细胞ABCAl、ABCGl表达促进细胞内胆固醇流出，抑制泡沫细胞形成。其机制可能是通过上调细胞内cAMP水平起作用。
- 唐雅玲林小龙何兴兰张海张凯谭建凯莫学靓危当恒姜志胜王佐
- 关键词：胆固醇流出脂质蓄积泡沫细胞
- FGF21通过FGFR1-ERK1/2-Elk-1通路抑制HepG2细胞载脂蛋白(a)表达
- 目的 探讨FGF21对HepG2细胞中载脂蛋白(a)[Apo(a)]表达的影响及其作用机制.方法 以HepG2细胞为研究对象,用不同浓度FGF21(0、50、100、200及400 μg/L)或相同浓度FGF21(200...
- 林小龙何兴兰马小峰张凯张海莫学靓危当恒姜志胜王佐
- 关键词：HEPG2细胞
- 影响血管内皮细胞自噬的因素及其相关机制探讨被引量：4
- 2012年
- 自噬对维持细胞自身的稳定及细胞成分更新、保持正常的生理状态起着至关重要的作用.机体在生理和病理过程中都存在自噬,基础状态下的自噬对细胞具有保护和修复作用,而自噬过度激活会引起细胞的损伤及死亡.近年来,对自噬的研究主要集中于肿瘤细胞,而对正常细胞的自噬研究较少.血管内皮细胞作为人体中最活跃的细胞之一,其功能变化与心血管疾病的发生和发展有密切相关.本文对影响血管内皮细胞自噬的因素及其相关机制进行综述.
- 林小龙马晓峰李爽赵岳王佐
- 关键词：内皮细胞自噬氧化低密度脂蛋白
- miR23b-3p和miRl25b-5p通过Etsl下调载脂蛋白（a）水平被引量：1
- 2013年
- 目的探讨miR23b-3p和miRl25b-5p对HepG2细胞中载脂蛋白（a）[Apo（a）]表达的影响及其作用机制。方法以HepG2细胞为研究对象，EtslsiRNA通过Lipo2000转染HepG2细胞，Westernblot检测细胞内Etsl及Apo（a）蛋白水平；通过Lipo2000分别将miR23b一3pmimic和miRl25b-5pmimic转染HepG2细胞，
- 赵岳林小龙何兴兰马小峰谭剑凯张凯张海危当恒姜志胜谭小进王佐
- 关键词：靶基因
- 载脂蛋白（a）对小鼠骨髓源性内皮祖细胞血管生成能力的影响被引量：1
- 2013年
- 背景改善血流、促进血管新生是缺血性外周血管疾病的重要治疗措施。由于载脂蛋白（a）[Apo（a）]与纤溶酶原具有75％～98％的结构同源性，因此，Apo（a）也可能通过类似纤溶酶原的方式抑制内皮祖细胞（EPC）增殖、黏附及迁移而影响血管发生能力。目的研究Apo（a）对EPC血管发生的影响及机制。方法编码人Apo（a）全长eDNA序列的pSG-5表达载体转染COS-7细胞株后进行培养，收集培养液，免疫亲和层析法分离纯化Apo（a）蛋白；从转Apo（a）基因小鼠、野生型对照鼠及正常对照鼠骨髓分离培养EPC，经Apo（a）处理后移植下肢缺血实验小鼠，于移植后第3、7、14天后观察Apo（a）对EPC黏附、迁移及血管发生能力的影响。结果Apo（a）能显著降低EPC黏附、迁移能力，EPC血管腔样结构严重破坏；体内实验揭示，EPC归巢至Apo（a）转基因小鼠缺血组织血管周围的数量及毛细血管数量显著减少。结论Apo（a）能损伤EPC黏附、迁移及归巢，最终损伤EPC的血管发生能力。
- 王仁张凯刘峰涛赵战芝赵岳林小龙王佐姜志胜
- 关键词：内皮祖细胞血管新生
- 通过调控载脂蛋白(a)基因表达降低脂蛋白(a)血浆水平被引量：1
- 2013年
- 脂蛋白（a）是1963年由Berg等[1]从血浆中分离出来的一种与低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）相似的蛋白质.与LDL相比,脂蛋白（a）具有更强的氧化活性及致炎作用,因此其致动脉粥样硬化（As）的能力更强[2-3].这与其分子组成密切相关.脂蛋白（a）是由载脂蛋白B100[apolipoprotein B100,apo B100]和富含神经氨酸的糖蛋白apo（a）[apolipoprotein（a）,apo（a）]通过二硫键共价结合而成[1,4].脂蛋白（a）的致病作用主要源于其脂质成分和apo（a）,前者可以增加胆固醇在动脉壁沉积和LDL胆固醇的氧化易感性,后者由于其结构和纤溶酶原高度同源,可以竞争性抑制纤溶酶原的激活从而干预纤维蛋白溶解,加速血栓形成[5-6].研究显示血浆中脂蛋白（a）的水平主要由遗传所决定,在不同的人种中变化较大,但不受年龄、性别及饮食的影响[7],高脂蛋白（a）被认为是引起心血管疾病独立的危险因素.因此,降低高脂蛋白（a）血症患者中的血浆中脂蛋白（a）浓度成为防治心血管疾病发生发展的重要策略.但目前还缺乏专一有效的方法.……
基金项目：国家自然科学基金（81070221）.
- 林小龙王佐
- 关键词：动脉粥样硬化成纤维细胞生长因子
- FGF21对THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制
- 目的 探讨FGF21对THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出的影响及机制。方法 采用体外培养的THP-1细胞作为研究对象,用PMA诱导为巨噬细胞,加入ox-LDL(50 mg/L)诱导泡沫细胞,同时加入不同浓度的FGF21处理...
- 唐雅玲林小龙何兴兰张海张凯谭建凯莫学靓危当恒姜志胜王佐
- 关键词：胆固醇流出脂质蓄积泡沫细胞
- 胆酸通过FXR／miR-23b-3p／HNF4途径下调载脂蛋白（a）表达
- 2013年
- 目的前期研究发现miR-23b-3p高效降HepG2细胞载脂蛋白（a）[Apo（a）]表达，本研究拟在基础上分析胆酸降Apo（a）效用与miR．23b．3p的关系，并检测胆酸调控miR．23b．3p表达的机制，分析miR一23b一3p作用靶基因。研究胆酸降Apo（a）作用新机制。方法首先用miRanda、Targetscan、PITA三个生物信息学在线工具对miR-23b一3p与调控筛选调控LPA基因的转录因子HNF4进行靶基因分析，然后验证胆酸对高表达Apo（a）细胞株HepG2的降Apo（a）效用的时间（0h、6h、12h、24h、48h）和量效（0、0．5、2、8、32mtg／L）关系，然后分析胆酸抑制Apo（a）表达与MAPK和miR-23b一3p的关系，分析胆酸活化MAPK并上调miR-23b．3p表达作用，分析胆酸调控miR-23b．3p表达与FXR及MAPK的关系，分析FXR、MAPK结合转录miR一23b-3p的基因启动子情况，最后使用荧光素酶报告系统对miR-23b一3p与调控筛选调控LPA基因的转录因子HNF4进行靶基因验证实验。用Westernblot检测Apo（a）表达水平、p38MAPK及p-p38MAPK、实时定量PCR检测miR-23b一3p表达水平。结果miRanda、Targetscan、PITA三个生物信息学分析工具表明HNF4G可作为miR-23b-3p的靶基因，胆酸呈时间和剂量依赖性调控HepG2细胞Apo（a）的表达，以32mg／L和24h的作用效果最显著，48h作用效果下降，胆酸抑制Apo（a）表达与MAPK和miR-23b．3p有关，胆酸能活化MAPK并上调miR-23b．3p表达，胆酸调控miR-23b-3p表达与FXR及MAPK，FXR在转录miR-23b-3p的基因启动子区域有8个结合位点，未发现MAPK的结合位点，MAPK可能通过间接作用于转录miR-23b-3p的基因启动子区域而发挥下调miR-23b-3p作用。使用FXR拮抗剂抑制miR-23b-3p表达的效用要强于抑制MAPK，可能胆酸更多地通过FXR来介导其上调miR-23b．3p效用，而MAPK只是胆酸发挥效用的信号途径的一个分支，转染miR-23b-3p处理组细胞裂解后荧光强度显著低于对照组，验证了HNF
- 莫学靓林小龙何兴兰马小峰张凯张海危当恒姜志胜王佐
- 关键词：胆酸HEPG2细胞靶基因
