李永菊
- 作品数:27 被引量:56H指数:6
- 供职机构:遵义医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”贵州省国际科技合作计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 局部湿热对小鼠乳腺癌组织中miRNA-7和miRNA-126表达的影响
- 2013年
- 目的:观察局部湿热对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤局部miRNA-7和miRNA-126表达的影响,并探讨其意义。方法:建立小鼠乳腺癌实验动物模型,进行局部湿热处理。28 d后,用Real-time PCR探针法分别检测肿瘤局部miRNA-7和miRNA-126的表达变化;同时用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡变化。结果:与对照组相比,局部湿热处理组中肿瘤组织miRNA-7和miRNA-126的表达均显著上调(P<0.05)。同时,肿瘤局部细胞凋亡率也明显增加(P<0.05)。结论:湿热治疗可改变肿瘤局部中特定miRNAs分子的表达,这可能是其导致肿瘤细胞凋亡的重要原因。
- 周涯李永菊周洪练任社华
- 关键词:乳腺癌凋亡
- microRNA-126基因敲减小鼠模型及其血糖水平变化的检测
- 目的:检测microRNA-126-3p(miR-126)基因敲减小鼠各组织器官中miR-126的表达,并观察其血糖水平变化,初步探讨其意义。方法:分别提取野生型(Wild type,WT)和miR-126敲减(Knoc...
- 胡燕李永菊陈超朱顺飞郭萌萌徐林
- 关键词:海绵体血糖
- 文献传递
- miR-155对人肺癌95D细胞生物学行为的影响被引量:1
- 2014年
- 目的:构建携microRNA-155(miR-155)的真核表达载体并观察其转染高转移性人巨细胞肺癌95D细胞后细胞的生物学行为变化。方法:以95D细胞基因组RNA为模板,经PCR法扩增miR-155的前体序列,由BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体pcDNA 3.1(-),并进行双酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-pri-miR-155载体(命名为p-miR-155)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用Real-time PCR探针法检测miR-155成熟体的表达水平,并利用CCK-8法、克隆形成实验和划痕法检测95D细胞的增殖、克隆形成以及体外迁移能力。结果:成功构建携miR-155的真核表达载体;与空白(Mock)和对照组(p-Ctrl)相比,转染后的95D细胞过表达miR-155[(2.04±0.62)vs(0.76±0.62)、(1.00±0.45),均P<0.01]、p-miR-155载体转染组95D细胞的增殖抑制明显增加[(46.70±6.89)%vs(3.70±1.40)%、(1.11±0.75)%,P<0.01]、克隆形成能力(在100和1 000个细胞/孔接种条件下)明显下降[(12±3)vs(34±3)、(35±3)个,P<0.01;(78±4)vs(159±4)、(165±4)个,P<0.01)],此外,细胞的迁移细胞数也明显减少[(110±5)vs(295±5)、(325±5)个,P<0.01]。结论:通过miR-155真核表达载体转染产生的过表达miR-155可显著抑制人肺癌95D细胞的增殖和迁移能力。
- 赵娟娟李永菊陈超郭萌萌陶弋婧任涛徐林
- 关键词:真核表达肺癌增殖迁移
- 过表达microRNA-7通过下调CGG结合蛋白1的表达抑制人肺癌细胞生长被引量:16
- 2014年
- 目的探讨过表达microRNA-7(miR-7)对人肺癌细胞体内外生长的作用和可能机制。方法利用真核表达载体pcDNA3.1(-)-pri-miR-7(p-miR-7),体外瞬时转染95D人肺癌细胞,MTT法和克隆形成实验检测95D细胞的增殖变化;免疫荧光技术检测95D细胞Ki-67和CGG结合蛋白(CGGBP1)的表达;建立人肺癌裸鼠肿瘤模型,肿瘤局部注射p-miR-7真核表达载体,测量肿瘤大小并观察小鼠生存时间;实时PCR检测肿瘤组织中miR-7表达水平;免疫组织化学技术检测组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达。结果过表达miR-7可明显抑制肺癌细胞的体外增殖(P<0.05),Ki-67和CGGBP1的表达显著减少(P<0.05);体内实验结果显示,局部注射p-miR-7组中miR-7表达水平明显增加,同时荷瘤裸鼠的肿瘤生长缓慢,生存时间明显延长(P<0.05)。肿瘤组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达量均显著减少(P<0.05)。结论过表达miR-7可显著抑制人肺癌细胞的体内外生长,可能与其下调肿瘤生长相关蛋白CGGBP1的表达有关。
- 胡燕廖珍媛陈超秦娜琳郑静田丹李永菊朱顺飞罗军敏徐林
- 关键词:肺癌细胞生长
- 一种下调微小RNA-7表达的载体及其应用
- 本发明公开了一种下调微小RNA-7表达的载体及其应用,所述的载体为含miR-7-sponge(海绵)核苷酸序列的真核表达载体。本发明的载体不仅可以方便、快速、长效地下调miR-7的表达,同时还可快捷地观察miR-7下调表...
- 徐林李永菊周涯陶弋婧
- 文献传递
- 微波消融联合树突状细胞瘤苗免疫治疗小鼠乳腺癌的疗效及免疫学机制探讨
- 2014年
- 目的 观察微波消融联合树突状细胞(DC)瘤苗免疫治疗小鼠乳腺癌的疗效并探讨其免疫学机制.方法 采用随机数字表法将48只BALB/c小鼠分为模型组、微波消融组、DC瘤苗免疫组及联合治疗组.将上述小鼠制成乳腺癌实验动物模型,微波消融组于荷瘤14d时给予微波消融治疗,DC瘤苗免疫组于荷瘤7d时给予DC瘤苗免疫,联合治疗组分别于上述时间点给予DC瘤苗免疫及微波消融治疗.观察各组小鼠存活、肿瘤生长及肺转移情况;于微波消融处理完后第14天时采用流式细胞术检测各组小鼠脾细胞中CD3+、CD4+ T细胞比例变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测各组小鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)水平.结果 联合治疗组小鼠存活时间[(56.4±4.3)d]、肿瘤面积[(67.3±6.1)mm2]及肺转移指数(0.6±0.4)均明显优于微波消融组及DC瘤苗免疫组(P<0.05);联合治疗组脾细胞中CD3+T细胞比例[(27.8±10.3)%]、CD4+T细胞比例[(16.7±8.3)%]均较微波消融组及DC瘤苗免疫组明显增加(P<0.05);另外联合治疗组血清中IFN-γ浓度[(41.8±22.9)pg/ml]较微波消融组及DC瘤苗免疫组显著升高(P<0.05),而IL-4浓度[(15.4±6.4) pg/ml]则较微波消融组及DC瘤苗免疫组明显降低(P<0.05).结论 联合采用微波消融及DC瘤苗免疫治疗乳腺癌小鼠具有协同作用,与单纯微波消融或DC瘤苗免疫比较,该联合疗法能进一步抑制实验小鼠乳腺癌肿瘤生长,其治疗机制可能与增强小鼠免疫反应有关.
- 周涯任社华李永菊张明周洪练
- 关键词:乳腺癌微波消融树突状细胞瘤苗肿瘤转移
- 下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响
- 目的:研究下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响。方法:利用反义核酸技术设计针对miRNA-21成熟体的ASO序列,构建pcDNA-6.2-miRNA-21-ASO真核表达载体(命名为P-miR...
- 陶弋婧赵娟娟李永菊郭萌萌周涯秦娜琳郑静罗军敏徐林
- 关键词:MIRNA-21结肠癌真核表达
- 文献传递
- 下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响
- 目的:研究下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响.方法:利用反义核酸技术设计针对miRNA-21成熟体的ASO序列,构建pcDNA-6.2-miRNA-21-ASO真核表达载体(命名为p-miR...
- 陶弋婧赵娟娟李永菊郭萌萌周涯秦娜琳郑静罗军敏徐林
- 关键词:MIRNA-21结肠癌真核表达
- microRNA-126基因敲减小鼠模型及其血糖水平变化的检测
- 目的:检测microRNA-126-3p (miR-126)基因敲减小鼠各组织器官中miR-126的表达,并观察其血糖水平变化,初步探讨其意义.方法:分别提取野生型(Wild type,WT)和miR-126敲减(Kno...
- 胡燕李永菊陈超朱顺飞郭萌萌徐林
- 关键词:海绵体血糖
- 诱导性CD4^+ CD25^+调节性T细胞的研究进展被引量:1
- 2013年
- 诱导性CD4+CD25+调节性T细胞(iTreg)是调节性T细胞的一个重要亚群,在维持机体免疫稳态和免疫相关疾病的发生发展中起重要作用。本文综述了iTreg的分子标记、外周诱导、稳定性以及与疾病的关系等相关方面的研究进展。
- 李永菊徐林
- 关键词:免疫性疾病移植免疫免疫耐受