朱乃硕
- 作品数:122 被引量:288H指数:9
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 乙肝表面抗原结合蛋白SBP在毕赤酵母中的表达纯化及功能鉴定被引量:2
- 2009年
- 乙肝表面抗原结合蛋白(HBsAg binding protein,SBP)是本实验室发现的一种人源蛋白,该蛋白与人乙型肝炎病毒HBV表面抗原HBsAg存在特异性的结合能力。此前的研究证实SBP具有增强乙肝疫苗免疫效果的作用。为进一步研究该蛋白的生理功能和作用机制,利用毕赤酵母表达系统进行了SBP的表达菌株构建,筛选得到了SBP的高效表达菌株。发酵产物经过分离纯化,最终得到了大量高纯度的真核来源的目的蛋白。通过SDS-PAGE、高效液相色谱、Western blotting和质谱鉴定,证实所得到的蛋白具有较高的纯度和完整性。通过ELISA方法初步证实了其与乙肝表面抗原具有较好的结合能力。该研究为进一步进行SBP的体内外功能研究及免疫增效研究打下了基础。
- 庞云龚立彭思扬朱乃硕
- 关键词:毕赤酵母
- 两种核酶对烟草花叶病毒RNA片段的体外剪切被引量:2
- 1997年
- 两种核酶对烟草花叶病毒RNA片段的体外剪切于善谦吴政宏朱乃硕秦进赵立山章道道(复旦大学微生物系,上海200433)关键词核酶,烟草花叶病毒,体外剪切核酶(Ribozyme)是具有特殊结构的RNA分子,表现酶解活性,对核酸的切割有顺序专一性。...
- 于善谦吴政宏朱乃硕秦进赵立山章道道
- 关键词:植物病毒核酶烟草花叶病毒RNA
- TIL的培养方法及研究进展被引量:3
- 2019年
- TIL是从肿瘤组织中分离出的浸润性淋巴细胞。1986年Rosenberg研究组首先报道了在黑色素瘤患者的肿瘤组织中存在渗入性的淋巴细胞——TIL,这些细胞从瘤体中分离并经IL-2激活后可大量扩增,并对自身肿瘤有高度特异性杀伤活性。一般来说,TIL中绝大多数细胞是CD3^+T细胞,不同肿瘤来源的TIL中,CD4^+T细胞、CD8^+T细胞的比例也有所差异,但大多数情况下以CD8^+T细胞为主,其属于肿瘤过继免疫治疗中的高效效应细胞,其抗瘤效力相比LAK细胞强50~100倍。近年来,TIL的生物学表型及功能研究有了较大发展,这为TIL的临床应用带来了有利的价值,但目前国内外依然没有统一的培养技术规范。因此文章就目前TIL的研究进展以及各大实验室关于TIL的培养技术经验做一简要总结,以帮助基础科研及临床转化有效顺利地进行。
- 李雪罗华灶朱嗣博朱乃硕
- 关键词:肿瘤肿瘤浸润性淋巴细胞抗肿瘤
- 退隐的胸腺:有关T细胞发生的研究被引量:1
- 2000年
- 王卉朱乃硕
- 关键词:胸腺T细胞受体免疫学
- 用于前列腺癌危险度诊断和疗效评估的分子指标、试剂盒
- 本发明属于肿瘤诊断和治疗效果评估的技术领域,具体为用于前列腺癌危险度诊断和疗效评估的分子指标、试剂盒。本发明用iTRAQ大量检测前列腺癌治疗前后的血清蛋白的含量变化,发现Albumin蛋白与前列腺癌的危险分级和治疗疗效密...
- 谢君梁雨来朱乃硕
- 中国小型猪FasL的cDNA克隆及序列分析被引量:1
- 2002年
- 以广西巴马小型猪活化的外周血淋巴细胞为材料,抽提总RNA,反转录成cDNA.参照人FasL基因保守序列设计引物,扩增得到包括全长阅读框序列的特异性DNA片段.将其克隆于T vector,以双脱氧法完成测序.在国际上首次完成中国小型猪FasL基因序列(GenBank登录号:AY033634).该序列全长846bp,编码282个氨基酸的CD95L分子,为Ⅱ型膜蛋白,其膜内部分富含脯氨酸残基.通过比较分析发现,小型猪与人FasL基因的核苷酸序列同源性为87%,氨基酸序列同源性为88%,比人的FasL基因多一个氨基酸.这些数据将为进一步用小型猪作为实验动物进行生物学和免疫应答研究提供必要的资料.
- 朱乃硕杨毅
- 关键词:LIGAND小型猪
- 抗单纯疱疹病毒-2感染的多表位DNA疫苗及其制备方法
- 本发明属医药和基因工程技术领域,具体为一种抗单纯疱疹病毒-2的多表位DNA疫苗及其制备方法。本发明的DNA疫苗是将HSV-2的gB、gC、gD和即刻早期蛋白ICP27的主要抗原表位区域加间隔序列串连到真核表达载体pcDN...
- 朱乃硕徐金华许炎夏天郑志忠
- 文献传递
- 可对HBV的DNA进行表观甲基化修饰的蛋白分子及其应用
- 本发明属于基因工程生物医药技术领域,具体为可对乙型肝炎病毒基因的DNA进行表观甲基化修饰的蛋白分子及其应用。本发明根据生物信息学及表观遗传工程和免疫学原理,设计了具有针对乙肝病毒基因靶向特异性亲和作用、且可对HBV基因的...
- 朱乃硕王桂良
- AS1411介导STAT3反义寡核苷酸靶向抗肿瘤的作用被引量:2
- 2017年
- 目的研究核仁素核酸适配体(AS1411)介导信号转导与转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)靶向抗肿瘤的作用。方法以RNA为耦联分子,连接靶向分子AS1411和效应分子ASO。以RNA Structure软件对预合成的不同RNA碱基耦联构建的嵌合体分子二级结构进行预测分析。以琼脂糖凝胶电泳检测嵌合体分子在血清及细胞裂解液中的稳定性。通过流式细胞术和荧光共聚焦实验检测AS1411介导STAT3 ASO进入肿瘤细胞的情况。通过CCK-8试剂盒检测STAT3 ASO对肿瘤细胞生长的抑制情况。通过RT-PCR和Western blot分析ASO对肿瘤生长相关基因表达的影响。结果AS1411可介导STAT3 ASO高效进入肿瘤细胞,抑制C-myc、Cyclin D1、Bcl-xl和PD-L1基因的转录和翻译,并能抑制Du145细胞的生长。结论 AS1411可介导STAT3 ASO靶向进入肿瘤细胞,从而发挥抗肿瘤的作用。
- 刘宝修黄建胜朱乃硕
- 关键词:反义寡核苷酸抗肿瘤靶向
- 心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立被引量:4
- 2005年
- 为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4 × 10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109 mol-1.Western blotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI,cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9 ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1~2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%.
- 李瑞朱乃硕
- 关键词:心肌肌钙蛋白I单克隆抗体酶联免疫吸附测定生物素