夏定国 作品数:79 被引量:137 H指数:7 供职机构: 江苏科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
基于HRM分析技术和SSR分子标记对家蚕伴性早熟基因Lm^e的精细定位 2014年 化性是家蚕的重要生理特性,受第6染色体上的化性主基因V及Z染色体上的伴性成熟基因Lm的影响,伴性早熟基因Lme促进家蚕化性趋向多化性。采用多化性家蚕品种nistari和二化性家蚕品种p50配制BC1M群体[p50×(nistari×p50)],选择其中734头产非滞育卵的雌蛾个体作为定位群体,以其基因组DNA为模板进行SSR标记的PCR扩增,应用高分辨率熔解曲线分析(HRM)技术进行各个标记位点的基因型分析,绘制出遗传总距离为12.91 c M的分子遗传连锁图,Lme基因位于标记s2734-299和s2734-525之间,与2个标记的遗传距离均为0.41 c M。s2734-299和s2734-525间的物理距离为226 kb,其间有18个预测基因,有2个属于DNA序列特异性结合转录因子基因,但尚不能判定这2个基因是否与Lme有明确的关联。 余俊杰 刘晓晓 张业顺 夏定国 张美蓉 张国政关键词:家蚕化性 高分辨率熔解曲线 SSR分子标记 家蚕淡红卵突变体(rep-1)的发现及卵色相关基因MFS的结构分析 被引量:1 2017年 在家蚕品种C1(H)中发现了一种新的卵色突变体。该突变体卵色为淡红色,成虫复眼为红色,遗传分析表明该突变性状由1个隐性基因控制,可能与红卵突变基因re互为等位基因,命名为淡红卵突变体(pale red egg,re^p-1)。红卵突变体(re)被认为是MFS(major facilitator superfamily)基因的序列发生了改变,故对re^p-1突变体MFS基因的结构及表达进行分析。与C1(H)卵色正常型品系的MFS基因比较,re^p-1突变体的MFS基因在第6外显子中的一段长59 bp片段被长14 bp的片段所替换,但编码蛋白质的跨膜结构未发生根本改变,而re突变体中MFS基因的结构变化对表达产物的功能有显著影响。此外,利用qRT-PCR检测MFS基因在C1(H)的卵色正常型品系、re^p-1突变体和re突变体3个家蚕品系5龄幼虫各个组织中均有表达,但表达水平存在差异:相较于C1(H)卵色正常型品系和re^p-1突变体,re突变体所有组织中MFS基因的表达量普遍偏低;相较于C1(H)卵色正常型品系,re^p-1突变体的后部丝腺和精巢中MFS基因具有较高的表达量,在其他组织中的表达量无明显差异。上述结果将有助于对re^p-1突变基因定位分析和卵色突变形成机制的研究。 何芬 赵巧玲 赵巧玲 王平阳 夏定国 裘智勇 夏定国 沈兴家关键词:家蚕 调控家蚕细胞糖酵解过程的关键基因BmTPT、编码蛋白及应用 本发明公开了调控家蚕细胞糖酵解过程的关键基因BmTPT、编码蛋白及应用,所述基因编码的氨基酸序列为SEQ ID NO:1,所述基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。与现有技术相比,其优点在于:(1)所述BmTPT基因... 夏定国 贾开放 赵巧玲 沈东旭 江丹 王金阳农药氰戊菊酯和杀虫双诱导家蚕血液蛋白的变化 被引量:9 2010年 为了解析家蚕对常用农药氰戊菊酯和杀虫双的解毒机制,分别给家蚕5龄幼虫添食2种农药,观察家蚕对农药的中毒症状,采用双向电泳(2-DE)技术对添食农药的家蚕幼虫的血液蛋白进行分离,利用电喷雾电离(ESI)质谱对具有2次以上重复的显著差异蛋白点进行鉴定,并用生物信息学方法进行分析。家蚕5龄幼虫分别添食1/4LD50剂量浓度的2种农药后,均在3~12h内出现中毒症状,且血液蛋白的表达也发生了变化:在氰戊菊酯诱导下,幼虫血液中增加了纤维样蛋白、果糖-1,6-二磷酸醛缩酶、半胱氨酸蛋白酶抑制剂;在杀虫双诱导下,幼虫血液中增加了丝氨酸蛋白酶抑制剂-13;经2种农药分别诱导处理后3h,幼虫血液中都减少了体液低分子蛋白-Ⅲ的表达。推测家蚕对氰戊菊酯和杀虫双具有一定的免疫反应。 吴立娜 赵巧玲 裘智勇 覃光星 夏定国 沈中元 沈兴家 郭锡杰关键词:家蚕 血液蛋白 氰戊菊酯 杀虫双 双向电泳 家蚕多肽功能研究方法及其应用 本发明公开了家蚕多肽功能研究方法及其应用,所述方法通过先敲出体内编码多肽的基因,然后利用多肽通过体液运输的特性,通过活体注射补充多肽来回复因基因敲出而出现的表型变化,从而筛选出起作用的多肽,过程中也明确了该多肽的功能,该... 赵巧玲 王平阳 何小柏 裘智勇 夏定国 沈兴家家蚕茧丝均匀度的遗传研究 2003年 茧丝的平均纤度及其最大开差、茧丝纤度综合均方差等特征数据和每百回茧丝纤度分布曲线是原料茧的重要特征之一,它关系到缫制生丝的规格、定粒配茧工艺设计、生丝品位(如生丝偏差、总差与均匀一、二度变化)等. 夏定国 裘智勇 赵巧玲关键词:家蚕 一种来源于食木天牛的功能基因及其表达产物和应用 本发明公开了一种来源于食木天牛的功能基因及其表达产物和应用,所述基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1,及由该基因编码的多功能纤维素酶,氨基酸序列为SEQ ID NO:2。本发明利用RACE方法从云斑天牛中克隆出编码多... 夏定国 梅慧珍 赵巧玲氰戊菊酯和杀虫双诱导家蚕两种解毒酶的变化 为了解析家蚕解毒机制,研究了家蚕在常用农药氰戊菊酯和杀虫双诱导下主要解毒酶的变化。分别给家蚕5龄幼虫添食2种农药,采用酶活性测定和荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对家蚕不同组织的羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽-S-转... 吴立娜 赵巧玲 夏定国 裘智勇 唐顺明 沈中元 沈兴家 郭锡杰关键词:家蚕 氰戊菊酯 杀虫双 羧酸酯酶 谷胱甘肽-S-转移酶 家蚕黑缟基因(pS)的精细定位及色素合成相关基因分析 被引量:3 2014年 p-复等位基因位于家蚕第2连锁群,普通斑纹(+p)与黑缟斑纹(pS)基因均属其中。采用分子标记和HRM结合的基因型分析技术对家蚕黑缟基因进行精细定位,通过RNA-Seq差异表达基因分析筛查与色素合成相关的基因。以幼虫斑纹为黑缟(pS/pS)的品系为母本,普通斑(+p/+p)的品系p50为父本和回交亲本,经杂交及连续多次回交构建BC7M分离群体,以其中的585头黑缟斑纹个体作为定位群体,PCR扩增筛选具有HRM多态性的SSR分子标记,并进行基因型定位分析,将pS基因精细定位于家蚕第2连锁群nscaf2623:97 113~222 422之间,pS基因与相邻的2个标记S2623-97和S2623-222之间的遗传距离分别为0 cM、0.3 cM。用p50继续回交得到BC8,对黑缟斑与普通斑表型个体的幼虫在3眠期每隔2 h分别解剖获取体壁组织,利用RNA-Seq高通量测序技术,在不同斑纹表型个体的样本间筛选出60个显著差异表达基因,对其中与色素合成相关基因的分析表明,黑缟斑纹形成主要是通过加快酪氨酸向多巴的转化速度来实现黑色素的合成。 刘丽丽 刘晓晓 余俊杰 张业顺 夏定国 张国政关键词:差异表达基因 葡萄糖添食对家蚕磷酸果糖激酶及茧质的影响 给5龄饷食至上蔟的蚕儿采用添食4%(W/L)葡萄糖饱食、饱食、半饱食3种方法饲养。采用实时定量RT-PCR方法,对家蚕中肠的糖酵解的关键酶磷酸果糖激酶(BmPFK)的表达量进行了定量分析;并调查了蚕茧茧质成绩。结果发现3... 夏定国 张国政 赵巧玲 裘智勇 张业顺 鲁成关键词:家蚕 实时定量RT-PCR 文献传递