刘颖 作品数:25 被引量:91 H指数:5 供职机构: 河北医科大学第四医院 更多>> 发文基金: 河北省医学科学研究重点课题 国家自然科学基金 河北省卫生厅医学科学研究重点课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 社会学 经济管理 更多>>
miRNA-200c逆转胃癌SGC7901/DDP细胞对顺铂的耐药性及其相关机制 被引量:24 2010年 目的:探讨微RNA-200c(microRNA-200c,miRNA-200c)在逆转胃癌SGC7901/DDP细胞对顺铂(cisplatin,DDP)耐药中的作用及其可能的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)法检测对DDP耐药的胃癌细胞SGC7901/DDP及其亲本细胞SGC7901中miRNA-200c的表达差异,同时检测SGC7901/DDP细胞转染miRNA-200c前体片段后miRNA-200c表达的变化;应用MTT法检测转染后SGC7901/DDP细胞对DDP药物敏感度的改变;Western印迹法检测转染后细胞bax、10号染色体同源丢失性磷酸酶与张力蛋白(phosphatase and tensin homology deleted onchromosome ten,PTEN)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)的表达变化。结果:SGC7901/DDP细胞中miRNA-200c的相对表达量显著低于DDP敏感细胞株SGC7901中的表达量(P<0.05),SGC7901/DDP细胞转染miRNA-200c前体片段24h后细胞中miRNA-200c的表达水平比转染阴性对照片段的细胞明显提高(P<0.05)。DDP对转染miRNA-200c前体片段细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)显著低于转染阴性对照片段的细胞(P<0.05)。转染miRNA-200c前体片段后,SGC7901/DDP细胞的bax、PTEN和E-cad的蛋白表达水平明显高于转染阴性对照片段的细胞(P<0.05)。结论:miRNA-200c可能通过上调E-cad、PTEN和bax蛋白表达而逆转SGC7901/DDP细胞对DDP的耐药。 陈勇 左静 刘颖 高鸿 刘巍关键词:胃肿瘤 抗药性 肿瘤 胃癌组织Skp2表达的意义及与p27表达的关系 被引量:3 2006年 目的探讨人胃癌S期激酶相关蛋白2(S-phase k inase-assoc iated prote in 2,Skp2)表达的意义及与p27表达的关系。方法采用免疫组化方法检测138例原发性胃癌,配对癌旁胃黏膜,102例配对淋巴结转移胃癌组织,30例非典型增生,30例肠上皮化生(肠化),10例慢性浅表性胃炎和5例正常胃黏膜Skp2的表达及138例原发性胃癌p27的表达。结果Skp2表达的阳性率(%),肠化(12.68±0.86)及癌旁胃黏膜(19.32±1.22)均明显高于慢性浅表性胃炎(0.53±0.13)及正常胃黏膜(0.47±0.19)(P=0.000),后两者差异无显著性(P=0.716);非典型增生(16.74±0.82)明显高于肠化(P=0.000);原发性胃癌(31.34±2.17)明显高于非典型增生及癌旁胃黏膜(P值均=0.000);淋巴结转移胃癌组织(39.76±2.00)明显高于原发性胃癌(P=0.037)。胃癌Skp2的阳性率与分化程度(rho=0.315,P=0.000)、脉管内瘤栓(rho=0.303,P=0.000)及淋巴结转移(rho=0.254,P=0.000)呈正相关。胃癌Skp2表达与靶蛋白p27表达呈负相关(rho=-0.451,P=0.000)。结论Skp2蛋白过表达与胃癌的发生及转移有关;胃癌Skp2蛋白过表达与p27蛋白降解有关,提示Skp2蛋白过表达在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用。 马秀梅 刘江惠 郭建文 刘颖 左连富关键词:S期激酶相关蛋白2 蛋白质P27 肿瘤转移 细针穿刺细胞学诊断胃食管交界处SMARCA4缺失型未分化癌转移1例 2023年 细针穿刺细胞学在诊断淋巴结转移癌上, 具有简单、微创、快速等优点。本文报道1例胃食管交界处SMARCA4缺失型未分化癌, 左锁骨上细针穿刺细胞学作出最初诊断的病例。患者男, 65岁。主因间断性上腹部不适2个月余就诊, 体检左锁骨上可触及肿大淋巴结, 直径1.5 cm, 质硬。随后进行了细针穿刺细胞学检查, 细胞学显示:肿瘤细胞单个散在或成团分布, 肿瘤细胞异型性大, 多呈圆形, 胞质量多少不等, 嗜酸性, 核圆形, 空泡状, 核仁明显。免疫细胞化学染色显示广谱细胞角蛋白阳性, CDX2、癌胚抗原、CK5/6、villin、突触素、波形蛋白、MART1、HMB45、SMARCA4/BRG1阴性。细胞病理学诊断为SMARCA4缺失型未分化癌转移。最终胃镜下的病理活检证实了本例的诊断。本文描述了该例的细胞学及免疫细胞化学染色特点, 着重讨论了细胞病理学的鉴别诊断。 王蕊 赵银环 王珩 刘颖 杜芸关键词:未分化癌 左锁骨 淋巴结转移癌 胸腔积液肺腺癌细胞中CXCR4、Ki67、MDM2、N-cadherin的表达及其与EGFR突变状态的关系 2022年 目的:研究胸腔积液肺腺癌细胞中趋化因子受体4(CXCR4)、增殖细胞核抗原Ki67、鼠双微体2(MDM2)和N-钙黏蛋白(Ncadherin)的表达与表皮生长因子受体(EGFR)突变状态的相关性。方法:收集46例晚期肺腺癌患者的胸腔积液,采用HE染色联合免疫细胞化学染色(ICC)法检测胸腔积液中是否含肿瘤细胞,突变扩增系统(ARMS)检测胸腔积液中癌细胞的EGFR基因突变状态,将癌细胞分为EGFR-TKI敏感突变组和EGFR野生型组。采用ICC法检测胸腔积液中肺腺癌细胞CXCR4、Ki67、MDM2和Ncadherin的表达,分析这些蛋白的表达阳性率和EGFR突变状态的相关性。结果:46例肺腺癌患者的恶性胸腔积液细胞中,31例(67.4%)存在EGFR-TKI敏感突变。CXCR4、Ki67、MDM2、N-cadherin表达阳性率与EGFR突变状态相关(r分别为0.452、0.428、0.417、0.524,均为P<0.05),且EGFR-TKI敏感突变组细胞CXCR4、Ki67、MDM2、N-cadherin表达的阳性率明显高于EGFR野生型组(P<0.05)。结论:EGFR突变状态与CXCR4、Ki67、MDM2和N-cadherin的表达相关,EGFR突变状态下,胸腔积液肺腺癌细胞的CXCR4、Ki67、MDM2和N-cadherin的表达阳性率高于非突变状态下的表达阳性率。 王蕊 刘颖 吴娟 纪晓坤 马阳 郭晓 杜芸关键词:胸腔积液 趋化因子受体4 胃癌组织Skp2表达的意义及其与P27、PTEN表达的关系 被引量:21 2006年 背景与目的:S期激酶相关蛋白2(S-phaseKinase-associatedProtein2,Skp2)促进泛素介导的细胞周期素依赖激酶抑制剂P27蛋白降解,是细胞G1-S期转化所必需。研究发现Skp2过表达参与细胞转化和肿瘤的形成。本研究旨在探讨人胃癌Skp2表达的意义及Skp2与P27和PTEN表达的关系。方法:采用免疫组化法检测胃癌组织及配对癌旁胃粘膜138例、配对淋巴结转移癌组织102例、非典型增生30例、肠上皮化生30例、慢性浅表性胃炎10例和正常胃粘膜5例Skp2表达及138例胃癌P27和PTEN的表达。结果:Skp2的标记率(%)在肠化(12.68±0.86)及癌旁胃粘膜(19.32±1.22)均明显高于慢性浅表性胃炎(0.53±0.13)及正常胃粘膜(0.47±0.19)(P<0.001),后两者无显著性差异(P﹥0.05);非典型增生(16.74±0.82)明显高于肠化(P<0.001);原发胃癌(31.34±2.17)明显高于非典型增生及癌旁胃粘膜(P<0.001);淋巴结转移胃癌组织(39.76±2.00)明显高于原发胃癌(P=0.037)。胃癌Skp2标记率与分化程度(rs=0.315,P=0.000)、脉管内瘤栓(rs=0.303,P=0.000)及淋巴结转移(rs=0.254,P=0.000)呈正相关。胃癌Skp2表达与靶蛋白P27表达(rs=-0.451,P=0.000)和肿瘤抑制蛋白PTEN(rs=-0.480,P=0.000)表达呈负相关;胃癌PTEN表达与P27表达呈正相关(rs=0.642,P=0.000)。结论:胃癌Skp2蛋白过表达与P27蛋白降解及PTEN蛋白低表达有关,提示Skp2蛋白过表达可能是胃癌发生和发展的一个重要原因。 马秀梅 刘江惠 郭建文 刘颖 左连富关键词:S期激酶相关蛋白2 P27 PTEN HE染色细胞学涂片和FFPE标本用于EGFR突变检测的对比分析 被引量:3 2020年 目的探讨HE染色细胞学涂片与FFPE标本中EGFR检测的一致性。方法收集275例HE染色细胞学涂片标本,经HE染色及免疫细胞化学染色确诊为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),刮取HE染色细胞学涂片中的肿瘤细胞进行DNA提取,并行EGFR检测,与配对的275例FFPE标本应用荧光PCR法检测EGFR突变。结果113例HE染色细胞学涂片检测有EGFR突变,阳性率为41.1%;其中G719X突变4例,19del 41例,L858R突变58例,20ins 3例,获得性耐药T790M和19del双突变6例,L858R和S768I双突变1例。113例FFPE标本检测到EGFR突变,其中G719X、L858R、20ins、L858R和S768I双突变结果与细胞学结果一致,19del 47例,未检测到T790M和19del双突变。2例EGFR野生型FFPE标本检测失败。结论HE染色细胞学涂片与FFPE标本EGFR检测比较,具有较好的敏感性和特异性。HE染色细胞学涂片可广泛用于EGFR检测,是一种稳定、结果可靠的检测方法,尤其对于不能获得组织标本进行病理诊断的患者,可以指导临床酪氨酸激酶抑制剂的治疗。 纪晓坤 杜芸 王蕊 吴娟 马阳 郭晓 刘颖 张艳关键词:HE染色 细胞学涂片 EGFR突变 FFPE 酪氨酸激酶抑制剂 15-脱氧-Δ^(12,14)-前列腺素J2对胃癌细胞生长的抑制作用 被引量:6 2006年 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的配体15-脱氧-△^(12,14)-前列腺素J2(15d-PGJ_2)对人胃癌MGC803细胞生长的影响。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及Survivin mRNA表达,Western blot检测PPARγ、Sur- vivin蛋白的表达。噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞术检测增殖、凋亡。Hoechst33342染色观察凋亡的形态学变化。结果PPARγmRNA和蛋白在MGC803细胞均表达,15d-PGJ_2(5、10、20、30和40μmol/L)抑制MGC803细胞增殖和诱导其凋亡,增殖抑制率和凋亡率随浓度的增加和时间的延长而升高。MGC803细胞Survivin mRNA和蛋白表达随15d-PGJ_2作用浓度的升高而降低。结论15d-PGJ_2可能通过诱导凋亡抑制人胃癌MGC803细胞的生长,Survivin mRNA和蛋白表达变化在此过程中起重要作用,提示15d-PGJ_2可能对治疗胃癌有效。 马秀梅 左连富 刘颖关键词:胃癌 脱噬作用 SURVIVIN PPARΓ 人胃癌组织中PPARγ的表达及其配体对胃癌细胞生长的影响 被引量:12 2006年 目的探讨过氧化物酶体增殖激活物受体γ(PPARγ)在人类胃癌中表达的意义及其配体15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对人类胃癌MGC803细胞生长的影响及机制。方法RT-PCR检测PPARγ及survivin mRNA表达;Western blot检测MGC803细胞PPARγ、survivin、S期激酶相关蛋白2(Skp2)及p27蛋白表达;免疫组化检测组织PPARγ蛋白表达。MTT法检测增殖;流式细胞术检测凋亡及细胞周期;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态学变化。结果PPARγ蛋白阳性表达率,胃癌75.0%(40例)明显高于癌旁胃黏膜25.0%(40例)及正常胃黏膜20.0%(40例)(P<0.001),后两者无明显差别。PPARγmRNA及蛋白阳性表达率,肠型胃癌95.0%(20例)明显高于弥漫型胃癌55.0%(20例)(P<0.05)。15d-PGJ2作用MGC803细胞24 h后,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L和40μmol/L组增殖抑制率(%)和凋亡率(%)均高于0μmol/L组(P<0.001),且随浓度的增加而升高;30μmol/L组的增殖抑制率(%)和凋亡率(%),也随时间的延长而升高;G1/G0期细胞比例,30μmol/L组[(61.33(1.53)%]明显高于0μmol/L组[(31.33(2.31)%](P<0.01)。随15d-PGJ2作用MGC803细胞浓度的升高,survivin mRNA和蛋白及Skp2蛋白表达均降低,p27蛋白表达升高,而PPARγmRNA及蛋白表达却没有变化。结论PPARγ表达与胃癌组织学类型有关。15d-PGJ2可能通过诱导凋亡及将细胞阻滞在G1/G0期,抑制人类胃癌MGC803细胞的生长,survivin和Skp2表达下调及p27表达上调可能在这个过程中起重要作用,这些可能不依赖PPARγ。提示15d-PGJ2可能是治疗胃癌的有效试剂。 马秀梅 左连富 刘江惠 郭建文 刘颖关键词:PPARΓ 15D-PGJ2 胃癌 细胞周期 胃癌SGC7901/DDP细胞microRNA的表达谱分析及其在耐药逆转中的作用 被引量:4 2012年 目的分析胃癌SGC7901/DDP细胞microRNA表达谱及其耐药特性,研究筛选出的microRNA-200c对SGC7901/DDP细胞耐药的影响。方法采用MTT法检测细胞的药物敏感性;应用microRNA芯片进行表达谱分析;运用生物信息学对筛选出的microRNA进行靶点预测和生物学进程分析。采用实时荧光定量RT-PCR检测microR-NA-200c的表达;采用细胞转染分析microRNA-200c对SGC7901/DDP细胞药物敏感性的影响。结果 SGC7901/DDP细胞对顺铂、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的IC50均显著高于SGC7901细胞(P<0.05)。与SGC7901细胞相比,SGC7901/DDP细胞中表达上调和下调超过2倍的microRNA分别有5和14个。microRNA高低表达组预测的靶点均广泛参与信号传导、细胞周期、分化、凋亡及增殖等生物学进程。实时荧光定量PCR分析证实microRNA-200c在SGC7901/DDP细胞中的表达显著降低(P<0.05),microRNA-200c能够显著降低SGC7901/DDP细胞对顺铂、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的IC50(P<0.05)。结论 SGC7901/DDP细胞的多药耐药特性可能与microRNA表达谱的改变有关,其耐药表型的逆转可能与microRNA-200c的表达有关。 左静 陈勇 刘颖 高鸿 刘巍关键词:MICRORNA 胃癌 耐药 表达谱 利用流式细胞术双内标进行胃癌DNA倍体分析的新方法 目的:利用正常二倍体细胞及鸡血红细胞对胃癌细胞进行双内标记,计算正常细胞和鸡血红细胞DNA含量的比值,从而更加准确的计算胃癌细胞和鸡血红细胞DNA 含量的比值关系,也就更加准确的计算出胃癌细胞的DNA 倍体,为良、恶性肿... 郭建文 左连富 刘江惠 刘颖 刘亮关键词:流式细胞术 文献传递