刘中禄 作品数:22 被引量:100 H指数:7 供职机构: 第三军医大学大坪医院野战外科研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “九五”国家科技攻关计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
松子壳多糖体外诱生小鼠IL-2和TNF-α的研究 被引量:9 2010年 松子壳多糖(Pine nut shell polysaccharide,PSP)是从松子壳(松塔)中提取的酸性多糖成分,其在抗肿瘤、抗病毒和免疫促进剂作用方面研究较多(Sak—agami等,1999;Harada等,1991;吕永俊等,2008),我们在前期试验证实了松子壳多糖对小鼠脾T、B淋巴细胞转化、巨噬细胞的吞噬功能、NK细胞杀伤作用均有明显的促进作用, 刘中禄 吕铁钢 张永亮关键词:壳多糖 TNF-Α IL-2 体外诱生 小鼠 免疫促进剂 3种保存血样方法对猪总DNA制备的影响 被引量:10 1999年 目的:探索不同保存血样方法对猪全血中总DNA制备的影响。方法:采取全血4℃保存(方法Ⅰ)、沉淀白细胞加消化液室温保存(方法Ⅱ)和全血加SDS-EDTANa2缓冲液室温保存(方法Ⅲ)等3种方法保存血样,用常规方法制备总DNA并对其效果进行评价。结果:方法Ⅰ、Ⅱ均能得到较纯净、完整的DNA,方法Ⅲ得率高、简便,但DNA有一定降解。结论:因方法Ⅱ勿需低温冷藏,可作为野外远距离采血的首选方法。 刘中禄 王勇 朱富旭 吴丰春 魏泓关键词:总DNA 重组胸腺素α1PMAL-C2X- Tα1/TB1工程菌的构建与表达 目的 构建表达重组胸腺素α1(Tα1)的PMAL-C2X-Tα1/TB1工程菌.方法将人工合成的Tα1序列进行PCR扩增,将扩增的片段和PMAL- C2X质粒载体分别经BAMHI和ECOR I双酶切后,用T4 DNA快速... 刘中禄 陶翠兰 莘旭妮 李树民关键词:基因克隆 文献传递 网络资源链接 重组胸腺素α_1 pMAL-C2x-Tα_1/TB1工程菌三角摇瓶培养条件的优化 2012年 目的对重组胸腺素α1pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌的培养条件进行优化。方法在摇瓶培养条件下探讨工程菌的生长和表达规律,对pMAL-C2x-Tα1/TB1菌种的培养基装量、接种量、诱导剂异丙基硫化半乳糖苷(IPTG)加入时间和浓度、诱导时间进行了实验和优化。结果由摇瓶培养获得的数据表明pMAL-C2x-Tα1/TB1最优培养条件为:10%接种量、100 mL LB培养基、37℃培养,接种后3 h,入终浓度为0.75 mmol/L的IPTG,诱导4 h后目的蛋白表达量最高。结论优化的培养条件为菌种的发酵工艺奠定了基础。 刘中禄 陶翠兰 莘旭妮 李树民关键词:胸腺素 发酵 猪线粒体DNAD-loop PCR-RFLP分析 被引量:8 2000年 为了应用 RFL P分析猪线粒体 DNA D loop的多态性。应用 PCR对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪、大约克夏猪、荣昌猪和长白猪血液总 DNA样品中线粒体 DNA控制区 (mt DNA D loop)进行扩增 ,2 3种限制性内切酶消化 ,琼脂糖凝胶电泳检测。结果发现 mt DNA D loop扩增带清晰 ,与已知片段长度一致 ,RFL P分析未见长度多态。可见猪线粒体 DNA D loop酶切多态性贫乏。因此根据现用酶 ,应用mt DNA D loop PCR RFL P分析 。 刘中禄 魏泓 曾养志 王爱德 甘世祥关键词:PCR RFLP 多态性 核外遗传 重组胸腺素α1 pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌的构建与表达 被引量:5 2012年 目的构建表达重组胸腺素α1(Tα1)的pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌。方法将人工合成的Tα1序列进行PCR扩增,将扩增的片段和pMAL-C2x质粒载体分别经BamHI和EcoR I双酶切后,用T4 DNA快速连接酶连接构建pMAL-C2x-Tα1融合表达质粒,再经测序正确后,将重组体转化至大肠埃希菌TB1菌中,pMAL-C2x-Tα1/TB1菌在LB液体培养基中培养,经IPTG诱导表达麦芽糖结合蛋白与Tα1的融合蛋白(MBP-Tα1),采用Westernblot对MBP-Tα1进行鉴定。结果 pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌能有效表达MBP-Tα1,融合蛋白占菌体蛋白的33.6%,分子量约为45×103。结论工程菌的成功构建和表达为重组Tα1的纯化、生物学活性等研究奠定了基础。 刘中禄 陶翠兰 莘旭妮 李树民关键词:基因克隆 姜黄素对实验性肝纤维化大鼠结缔组织生长因子表达的影响 被引量:3 2009年 目的观察中药姜黄素抗四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。方法将50只Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、中药治疗1组及2组,于造模第1周及第4周开始用姜黄素治疗。免疫组织化学技术检测结缔组织生长因子(CTGF)在肝内表达及其在细胞中的定位含量。结果经中药姜黄素治疗后肝纤维化大鼠肝组织内CTGF表达降低,CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞质。结论中药姜黄素能有效地减轻CCl4诱导肝纤维化大鼠的损伤及纤维化程度,其机制可能是抑制肝内CTGF表达。 刘中禄 孙仁山 冉新泽关键词:姜黄素 肝硬化 胞间信号肽类和蛋白质类 松子壳多糖对小鼠主要免疫细胞功能的影响 目的:探讨松子壳多糖(pine nut shell polysaccharide,PSP)对小鼠主要免疫细胞的影响.方法:应用MTT法测定PSP对小鼠脾淋巴细胞的毒性和对ConA或LPS诱生小鼠脾T、B淋巴细胞的转化,用... 刘中禄 吕铁钢 张永亮关键词:免疫细胞 免疫活性 免疫细胞功能 文献传递 中国三种实验用小型猪线粒体DNA D-loop多态性分析(英文) 被引量:13 2001年 分析中国三种实验用小型猪线粒体DNA (mtDNA)D-loop的多态性,建立各品种品系猪的遗传标记,为各品种、品系猪的鉴别提供依据。应用PCR技术分别对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪和长白猪的血液总DNA样品中mtDNA Dloop进行扩增,用23种限制性内切酶消化,观察其酶切多态。PCR扩增其mtDNA Dloop 5′端227bp高变区域,应用PCR–SSCP和PCR直接测序分析,观察其单链构象多态和序列多态。结果显示:三种小型猪之间未见酶切长度多态、单链构象多态和序列多态。与长白猪之间表现出单链构象多态和序列多态。本研究认为:三种实验用小型猪之间mtDNA多态性贫乏,证明其亲源关系很近,在母系起源和进化上有一致性,应用PCR–RFLP、PCR–SSCP和PCR直接测序分析,尚不能作为三种实验用小型猪品种、品系鉴定的依据,但与长白猪等欧系猪比较有一定差异。 刘中禄 魏泓 曾养志 王爱德 甘世祥关键词:小型猪 聚合酶链反应 线粒体DNA控制区 多态性 松子壳多糖对小鼠主要免疫细胞功能的影响 被引量:18 2010年 目的探讨松子壳多糖(pine nut shell polysaccharide,PSP)对小鼠主要免疫细胞的影响。方法应用MTT法测定PSP对小鼠脾淋巴细胞的毒性和对ConA或LPS诱生小鼠脾T、B淋巴细胞的转化,用中性红吞噬试验测定腹腔巨噬细胞的吞噬功能,应用乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞的杀伤活性。结果 PSP对脾细胞毒性很低,各种浓度对小鼠脾淋巴细胞的增殖均有较强的促进作用(P<0.01);PSP在浓度50~300μg/mL时,明显促进T淋巴细胞的转化(P<0.01),但是当浓度达到300μg/mL时表现出一定的抑制作用(P>0.05);PSP在25~200μg/mL时显著促进了小鼠脾B淋巴细胞的转化(P<0.05),但是当浓度达到300μg/mL时,抑制作用极显著(P<0.01);不同浓度均可以增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力及其代谢功能,当浓度在100μg/mL时能显著的促进巨噬细胞吞噬中性红的能力(P<0.01);PSP在浓度100~300μg/mL时,能极显著的促进NK细胞对Yac-1的杀伤作用(P<0.01),当浓度达到400μg/mL,对NK细胞杀伤性的促进作用开始减弱。结论 PSP对小鼠脾淋巴细胞的毒性较低,能增强免疫细胞活性,有望成为新一代免疫调节剂。 刘中禄 吕铁钢 张永亮关键词:免疫细胞 免疫活性