黄思佳
- 作品数：13 被引量：21H指数：3
- 供职机构：武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 狂犬病病毒反向遗传系统
- 黄思佳
- 关键词：狂犬病狂犬病病毒基因间重组基因工程疫苗
- 1株甲基杆菌的鉴定
- 2016年
- 目的鉴定1株在生物制品生产车间采集的菌株wh01的种属。方法观察该菌株的形态，并用细菌鉴定仪进行检定。采用PCR法扩增菌株的16SrDNA和甲醇脱氢酶大亚基的mxaF基因，用生物信息学软件进行分析。结果该菌株经细菌鉴定仪检定为沙门菌属，但其形态与沙门菌有很大差别，其16SrDNA和mxaF基因序列与甲基杆菌属序列的相似性高达99％。结论该菌株属于甲基杆菌属。
- 曹璟黄思佳郭蓉刘鹏金文平胡业勤薛红刚
- 关键词：DNA核糖体环境污染
- 我国近期分离的6株狂犬病病毒的糖蛋白基因序列分析
- 2013年
- 目的分析我国近期分离的6株代表性狂犬病病毒（rabiesvirus，RV）的糖（G）蛋白基因序列，了解RV街毒株与疫苗株在核苷酸和氨基酸序列水平的差异。方法对6个RV街毒株G基因进行逆转录和PCR扩增，经纯化、克隆、测序后获得6条G基因全长序列，采用生物信息学软件对G基因序列进行分析。结果6个街毒株的G蛋白在核苷酸水平的同源性为97．7％－100％，在氨基酸水平的同源性为97．9％－100％；与CTN－181疫苗株的核苷酸序列同源性最高，为86．7％－87．2％，氨基酸序列同源性为92．7％～93．1％。结论6个RV街毒株的G蛋白在核苷酸及氨基酸水平上均有变异，但与CTN．181疫苗株关系最近，表明CTN－181疫苗株可能为我国境内流行的狂犬病提供良好的预防作用。
- 黄思佳解庭波吴杰王月季雅琦严家新徐葛林
- 关键词：狂犬病病毒糖蛋白类基因型DNA
- 现代狂犬病疫苗生产用细胞和毒种：现状和前景被引量：5
- 2012年
- 对全球狂犬病预防控制的一个主要挑战是不能充分供应廉价优质的狂犬病疫苗。基于神经组织生产狂犬病疫苗的技术早已过时，现代细胞培养技术提供了适当的病毒培养基质，可以获得高滴度病毒和大规模生产高质量的现代狂犬病疫苗。目前人用疫苗仅使用灭活疫苗，用高度适应细胞的稳定的减毒狂犬病病毒生产的疫苗将是未来的理想疫苗。
- 王月黄思佳严家新
- 关键词：狂犬病狂犬病疫苗VERO细胞
- 1株驴源狂犬病毒的分离鉴定及N、G基因序列分析被引量：2
- 2012年
- 目的对武汉市汉南区新分离的1株驴源狂犬病毒（RABV）街毒株的N、G基因进行遗传学分析，比较其与近年来湖北省及周边地区分离的代表性街毒株以及人用和兽用狂犬病疫苗病毒株之间的差异。方法以直接免疫荧光法检测驴脑组织中的RABV，并将驴脑海马组织研磨后接种乳鼠，观察其发病情况，采用双抗体夹心ELISA法检测驴脑组织及发病乳鼠脑组织悬液中的RABV，然后提取发病乳鼠脑组织RNA，利用RT-PCR扩增RABV的N、G基因，测序后进行遗传学分析。结果在驴脑组织及发病乳鼠脑组织中检出RABV，该病毒株与近年来湖北省及周边地区分离的代表性街毒株以及国内外人用和兽用狂犬病疫苗病毒株相比，N、G基因核苷酸序列的同源性分别为85．7％-99．1％和82．2％-99．7％，推导的氨基酸序列同源性分别为95．6％。99．8％和87．8％～99．4％，与国内分离街毒株核苷酸和氨基酸的同源性高于疫苗株，且与国内疫苗株CTN-181的同源性要高于国外疫苗株。结论该病毒株鉴定为驴源RABV，与湖北省及周边地区分离的代表性街毒株及中国人用狂犬病疫苗株CTN-181处于同一个亚群，有较近的系统进化关系。
- 解庭波俞华吴杰黄思佳徐葛林严家新余滨周敦金
- 关键词：狂犬病毒
- 狂犬病病毒CTN株反向遗传系统的改造及拯救被引量：6
- 2015年
- 目的对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行改造,并拯救改造后的狂犬病病毒。方法应用基因定点突变技术分别对狂犬病病毒CTN株G蛋白的第194位和333位氨基酸进行定点突变,将突变后的G蛋白基因替换原有反向遗传系统中的G蛋白基因,同时对突变后的G蛋白基因进行拷贝,分明构建含有1、2和3个改造后G蛋白基因全长序列的感染性克隆,并将其分别与辅助质粒共转染BSR细胞,采用直接免疫荧光实验(DFA)和RT-PCR法鉴定重组病毒。结果 G蛋白的第194位天冬酰胺突变为丝氨酸,第333位谷氨酰胺突变为谷氨酸,获得含有1、2和3个突变后G蛋白基因的狂犬病病毒CTN株反向遗传系统,并拯救出重组狂犬病病毒。结论成功对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行了改造,并拯救出了重组病毒,为研制安全、稳定、高效的新型狂犬病病毒疫苗奠定了基础。
- 解庭波明平刚唐芳黄思佳沈智俊王月徐葛林严家新
- 关键词：狂犬病病毒反向遗传学定点突变G基因
- 我国六株狂犬病毒核蛋白和糖蛋白基因序列分析
- ＜正＞目的分析我国境内6株狂犬病毒的核蛋白基因和糖蛋白基因,了解狂犬病毒街毒株与疫苗株在核苷酸和氨基酸序列水平的差异,为有效地控制狂犬病疫情提供科学的依据。方法使用RT-PCR法扩增6株狂犬病毒街毒株,6株狂犬病毒街毒株...
- 黄思佳
- 关键词：狂犬病毒核蛋白糖蛋白
- 文献传递
- 一例人狂犬病病例的病毒分离及鉴定
- 2014年
- 目的对2013年武汉市新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行病毒分离及鉴定。方法采用直接荧光抗体法(DFA)和ELISA法检测狂犬病病毒(rabies virus,RABV)抗原;提取病毒RNA,设计12对引物,分段扩增全基因组,克隆后测序,应用DNAStar软件包中的MegAlign模块对基因所编码的氨基酸进行对位分析;Clustal X 1.83软件和GENEDOC软件用于序列比对;MEGA 4.1软件以Kimura two-parameter模型邻位相连法(Neighbor-Joining,NJ)构建系统进化树(Bootstrap-l000),并与国内外疫苗株及近期湖北省及周边地区分离的代表性街毒株进行同源性分析。结果分离的街毒株13WH10的RABV抗原呈阳性;13WH10街毒株基因组全长11 924 bp,属基因Ⅰ型狂犬病病毒;13WH10与湖北省及周边街毒株处于同一亚群,与CTN-1疫苗株及东南亚地区的街毒株同源性较高,高于欧美国家疫苗株。结论成功对武汉市2013年新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行了病毒分离及鉴定;CTN-1与RABV国内分离株同源性较高,系统进化关系较近,提示采用CTN-1疫苗株生产的狂犬病疫苗可有效预防中国狂犬病的流行。
- 王月任亮吴杰周亦武郑新雄解庭波黄思佳刘良王荣帅屈国强明平刚翟珑山王泽鋆霍玉奇季雅琦徐葛林严家新
- 关键词：狂犬病病毒同源性分析
- 环介导等温扩增反应的原理及应用被引量：6
- 2011年
- 环介导等温扩增反应(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是日本学者Notomi于2000年在NucleicAcids Res杂志上公开的一种新的基因诊断技术,该法操作简便,扩增效率及灵敏度高,已广泛应用于食品、临床、农业等领域,有望成为主流的基因诊断方法。本文对LAMP的反应特征及原理、优缺点、临床应用作一综述。
- 黄思佳解庭波严家新
- 关键词：核酸扩增技术
- 一株人源狂犬病毒的分离鉴定及N、G基因序列分析
- 目的：对武汉市东西湖区一株人感染狂犬病毒(RABV)的N、G基因进行遗传学分析,比较其与近年来湖北省及周边地区分离的代表性街毒株、亚洲国家(或由其输出)人源街毒株,及人用和兽用狂犬病疫苗病毒株之间的差异.方法：以直接...
- 王月严家新任亮吴杰郑新雄解庭波黄思佳翟珑山王泽鋆季雅琦
- 关键词：狂犬病毒遗传学分析
- 文献传递
