陈剑英
- 作品数：36 被引量：174H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省“十一五”科技攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 改进的痔环形切除术与吻合器痔切除手术治疗Ⅲ、Ⅳ度痔的对比观察被引量：5
- 2004年
- 陈剑英王国斌饶志强卢建华陈振勇陈道达
- 关键词：吻合器痔手术切除
- 外源性PTEN基因转染对炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞株体外生物学行为的影响被引量：1
- 2006年
- 目的研究外源性PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10)基因表达对炎性乳腺癌MDA-MB-468细胞株体外生物学行为的影响。方法应用基因重组技术构建并鉴定pcDNA3.1-PTEN真核表达质粒,重组质粒被BglⅡ酶切线性化后运用脂质体介导基因转染法,将外源性PTEN基因导入乳腺癌细胞系MDA-MB-468中,经G418筛选阳性克隆,空载体pcDNA3.1(-)转染入细胞作为对照,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分析目的基因及蛋白表达,膜联蛋白Ⅴ-FITC(FITC-AnnexinⅤ)和碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1-PTEN经限制性内切酶XbaⅠ和BamHⅠ双酶切,电泳后显示约1.4kb的PTEN目的片段和5.4 kb的pcDNA3.1(-)载体片段,证明重组质粒连接正确。RT-PCR、Western blot均显示pcDNA3.1-PTEN转染组有PTEN mRNA及其蛋白表达,流式细胞分析显示恢复PTEN蛋白表达后其凋亡率较其它两组细胞凋亡率增高(均P<0.01)。结论成功地构建了pcDNA3.1-PTEN真核表达质粒,外源性PTEN基因可通过诱导细胞凋亡而抑制乳腺癌细胞的增殖。
- 陈庆永蒋春舫陈剑英王春友
- 关键词：乳腺癌PTEN基因基因转染
- 早期胃癌诊断中的问题及可行对策被引量：4
- 2006年
- 陈道达陈剑英
- 5-Aza-CdR对乳腺癌细胞增殖及Maspin基因表达的影响
- 2007年
- 目的研究5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对乳腺癌MDA-MB-435S细胞增殖及抑癌基因Maspin表达的影响。方法用特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理乳腺癌细胞株MDA-MB-435S8d后,采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞在药物处理前后的生长活性,应用流式细胞仪进行细胞周期的检测,RT-PCR检测细胞处理前后Maspin mRNA的表达。结果 5μmol/L5-Aza-CdR处理乳腺癌细胞株MDA-MB-435S8d后,与对照组比较能明显抑制肿瘤细胞的生长。流式细胞仪检测发现5μmol/L5-Aza-CdR作用72h后可导致MDA-MB-435S细胞G2/M期阻滞,减少进入有丝分裂期的细胞百分比。RT-PCR显示Maspin mRNA在5μmol/L5-Aza-CdR作用72h后重新表达。结论在人乳腺癌MDA-MB-435S细胞中,Maspin基因可能因高甲基化而导致转录失活,经特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理可使Maspin基因重新表达,后者能导致该肿瘤细胞G2/M期阻滞,并抑制细胞生长。
- 张波刘科陈剑英王国斌
- 关键词：MASPIN基因甲基化
- 痔处理方法的选择
- 2008年
- 陈道达陈剑英卢建华
- 关键词：纤维结缔组织疏松结缔组织退行性变化静脉血回流静脉吻合
- 肿瘤抑制基因DBC2抑制乳腺癌MDA-MB-435S细胞增殖并诱导凋亡被引量：3
- 2010年
- 目的观察肿瘤抑癌基因DBC2（deletioninbreastcancer2）的过表达在乳腺癌MDA—MB-435S细胞中的功能。方法野生型DBC2基因的真核表达载体pEBG—DBC2瞬时转染MDA—MB-435S细胞72h，噻唑蓝（MTF）比色法绘制DBC2转染前后MDA—MB-435S细胞生长曲线；流式细胞术检测DBC2的瞬时过表达对MDA—MB-435S细胞周期的影响，TUNEL方法原位检测DBC2的过表达诱导MDA—MB-435S细胞凋亡。结果DBC2基因在MDA—MB-435S细胞中的过表达可显著抑制该细胞的增殖，同时DBC2基因的过表达可诱导该乳腺癌细胞周期的G，期阻滞（64．05％比71．72％）和细胞凋亡（0．09％比5．29％）。TUNEL实验证实DBC2诱导MDA—MB-435S细胞凋亡的百分比为8％。结论DBC2基因体外抑制乳腺癌细胞生长的功能，可能通过细胞周期G，期停滞，以及诱导细胞凋亡等机制实现。
- 张波卢建华刘科陈剑英
- 关键词：肿瘤抑癌基因增殖细胞周期脱噬作用
- 合并肛裂或肛瘘的痔环形切除术被引量：5
- 2002年
- 目的探讨改进的痔环形切除术能否应用于既行肛裂或肛瘘切除,又同时行痔环形切除手术。方法采用改进的痔环形切除方法,对痔病患者42例(合并肛裂20例、肛瘘22例),既行肛裂或肛瘘切除同时又行痔环形切除术。结果本组病例术后恢复顺利,无切口感染、出血,术后平均住院3～7d。术后随访1～6年,无肛门狭窄或大便失禁,无肛裂或肛瘘复发;亦无肛门部不适,无大便带血,无肿块脱出。结论合并肛裂或肛瘘的严重环形痔病同时手术治疗是安全、可行的。
- 陈道达陈剑英张波陈振勇张竹慧
- 关键词：肛裂肛瘘
- Cyelin E影响DNA损伤药物对乳腺癌细胞的治疗敏感性被引量：5
- 2007年
- 目的探讨Cyclin E的表达水平对乳腺癌细胞化疗敏感性的影响。方法Western blot检测不同乳腺癌细胞系中Cyelin E表达水平的差异；RNAi技术敲低Cyclin E在乳腺癌细胞中的表达水平后，用流式细胞术和细胞衰老相关β-gal染色检测Cyclin E敲低前后乳腺癌细胞对DNA损伤药物的反应敏感性。结果乳腺癌中Cyclin E的表达与ER状态没有直接关系，DNA损伤药物阿霉素可以明显导致Cyclin E表达敲低MDA-MB-435细胞的G1期阻滞，进而减少进入S期的细胞数，Cyclin E表达较高的MDA—MB-435细胞处于G1期的细胞百分比为56．21％，S期的细胞百分比为15．68％；而Cyclin E表达敲低的MDA—MB-435细胞处于G1期的细胞百分比为65．85％，S期的细胞百分比为11．91％。同时，阿霉素导致Cyclin E表达敲低MDA-MB-435的衰老细胞增加，减少有增殖能力的细胞数，有效的控制细胞分裂和增殖。结论Cyclin E可能作为一种独立的预后因素评估乳腺癌的化疗敏感性。
- 张波陈剑英陈道达王国斌
- 关键词：CYCLIN乳腺肿瘤DNA损伤
- 组蛋白去乙酰酶抑制剂对结肠癌细胞增殖和ID4基因表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:研究组蛋白去乙酰酶抑制剂曲古菌素A (TSA)对结肠癌细胞Caco2增殖的影响和机制.方法:5-500μg/L TSA处理结肠癌Caco2细胞0-5d,在药物处理前及36h后用MTT法检测细胞增殖状况.流式细胞仪检测细胞周期的改变.RT-PCR检测ID4 mRNA的表达.结果:TSA在100μg/L浓度以上可以明显抑制结肠癌Caco2细胞的增殖(P<0.05),但在5和20μg/L浓度时抑制作用不明显.100μg/L TSA可导致细胞G_1期阻滞,但没有诱导明显的细胞凋亡.RT-PCR显示20μg/L TSA作用36 h后ID4 mRNA表达增强(P<0.05),在100μg/L其表达显著增强(P<0.01).结论:TSA可以通过阻滞Caco2细胞的G_1期和重新表达ID4来发挥抑癌作用.
- 张波陈剑英王国斌陈道达
- 关键词：组蛋白去乙酰酶抑制剂结肠癌ID4基因
- 腺病毒介导野生型PTEN基因对乳腺癌MDA-MB-468细胞周期的影响
- 2007年
- 目的探讨腺病毒介导野生型PTEN基因对乳腺癌MDA-MB-468细胞周期时相的影响。方法构建含PTEN目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-PTEN与骨架质粒pAdEasy-1,将重组腺病毒pAd-PTEN制备成纯化高效的含绿色荧光蛋白(GFP)的PTEN腺病毒,体外转染人乳腺癌MDA-MB-468后,检测PTEN表达后对乳腺癌MDA-MB-468细胞周期的影响。结果携带PTEN基因重组腺病毒载体成功构建,检测病毒滴度为2.5×1010pfu/mL。表明重组腺病毒已含有PTEN蛋白。流式细胞术显示对照组处于G1期的细胞占41.18%,PTEN蛋白表达后处于G1期的细胞占56.47%。结论利用腺病毒载体系统AdEasy-1可快速构建表达PTEN基因的腺病毒载体,可高效制备均一的高滴度重组病毒;野生型PTEN基因转染使乳腺癌细胞周期停滞于G1期。
- 陈庆永陈道达蒋春舫陈剑英
- 关键词：腺病毒科细胞周期转染
