郭恒 作品数:21 被引量:46 H指数:4 供职机构: 吉林大学人兽共患病研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国际科学基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
复杂山地地区野外地震勘探数据采集——以山西沁水三维地震勘探为例 我国北方山区煤炭资源的储量丰富,但是复杂的地质地表条件严重限制了地震勘探的步伐。北部山地表层地震地质条件较为复杂,地形起伏大,存在陡崖、陡坎、陡坡、半边山、山前破碎带、滑坡、岩石裸露及破碎地区、薄表土区、植被密集区及表土... 郭恒关键词:地震勘探 地震资料解释 文献传递 HPV18-L1基因真核表达载体的构建及其表达 2012年 目的:从人乳头瘤病毒(HPV)阳性的宫颈癌组织中克隆HPV18型主要衣壳蛋白L1基因全长,构建真核表达载体及验证目的蛋白的表达。方法:根据HPV18-L1基因全长设计一对特异引物,用PCR方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,构建pMD18T重组质粒扩增L1基因,以pVAX1为真核表达载体构建重组表达质粒,转染入地鼠肾细胞BHK,采用免疫细胞化学方法检测HPV18-L1蛋白的表达。结果:从长春地区宫颈癌临床标本克隆到的HPV18-L1基因序列与Genebank报道序列高度同源,其真核表达产物能够与特异性抗体发生特异性结合。结论:成功构建pVAX1-HPV18-L1重组真核表达质粒,为研制地区特异性HPV预防性疫苗提供基础实验参考。 张凌怡 赵丽晶 郑晶莹 郭恒 赵淑华关键词:人乳头瘤病毒 L1基因 真核表达载体 狂犬病疫苗株生物学特性的探讨 被引量:2 2011年 狂犬病(Rabies)是一种危害严重的人兽共患病毒病。尽管应用狂犬病疫苗控制狂犬病在世界范围内已取得了显著成效,但每年全球仍有1千多万人接受暴露后治疗,约55 000人死亡,其中约40%是儿童,而且死亡人数在很大程度上被低估。狂犬病的高致死性使其成为第七个重要的全球感染性疾病。 徐德启 郭恒 扈荣良关键词:狂犬病病毒 原核表达HPV16 L1蛋白ELISA方法检测血清抗体 2010年 目的:从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建原核表达载体,表达并纯化蛋白用于ELISA检测。方法:根据基因序列设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pet28a为载体构建表达质粒,IPTG诱导表达蛋白,DEAE及葡聚糖凝胶分离纯化目的蛋白,将蛋白包被平底96孔板用于ELISA检测。结果:从宫颈癌临床标本克隆到HPV16型L1蛋白编码序列,其原核表达产物纯化后可用于ELISA检测。结论:成功获得人有抗原性的HPV16L1蛋白,可用于ELISA检测。 赵丽晶 王学林 许多 梁作文 郭恒 孙树民 赵淑华 赵雪俭 郑晶莹关键词:HPV16 L1蛋白 原核表达 ELISA检测 嗜水气单胞菌重组Aer毒素的纯化和抗原性分析 被引量:7 2005年 对原核表达的重组嗜水气单胞菌Aer毒素进行初步纯化,比较了它与天然Aer毒素的抗原性,为建立检测该毒素的免疫学方法奠定了基础。将原核表达的重组Aer毒素经SDS-PAGE后,切下目的蛋白,利用电洗脱法将蛋白洗脱出来,后经透析、PEG8000浓缩、定量,对獭兔进行免疫,采集血清,提纯IgG,在W estern b lotting试验中可与天然Aer毒素起反应,说明,体外表达的重组Aer毒素保留了天然Aer毒素所具有的抗原性。同时,将嗜水气单胞菌AHCS02菌接种于兔鲜血平板,30℃、培养15 h后,将具有β-溶血的单菌落于LB液体培养基中培养后,用饱和硫酸铵法提取上清液中的天然Aer毒素,用甲醛脱毒后,以同样免疫方法免疫獭兔,免疫结束后,采集血清提取IgG,在W estern b lotting试验中,可以检测到重组Aer毒素。试验说明:原核表达的重组Aer毒素和天然Aer毒素诱导獭兔产生的血清IgG抗体可以互相识别重组Aer毒素和天然Aer毒素,重组Aer毒素和天然Aer毒素有相似的抗原性。 李莲瑞 卢强 刘明远 付宝权 韩文瑜 孙树民 郭恒 崔国祯关键词:嗜水气单胞菌 重组毒素 纯化 天然毒素 抗原性分析 狂犬病口服疫苗研究进展 被引量:2 2010年 狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies irus,RV)感染引起的一种人兽共患急性传染病。狂犬病在世界范围内广泛流行。调查表明,我国农村地区犬只免疫率仅为10%~20%,猫则几乎没有进行过免疫,形成不了免疫屏障。 刘娟 王学林 郭恒 孙树民关键词:狂犬病病毒 口服疫苗 急性传染病 免疫率 人兽共患 调查表 旋毛虫抗原基因T668重组蛋白对鼠结肠炎的保护效应 被引量:2 2014年 旋毛虫感染已被证实对Th1型免疫应答为主的炎症性肠病具有良好的干预作用。寄生虫特异性抗原基因表达的蛋白在发挥免疫调节过程中扮演重要角色。本研究目的是探讨旋毛虫表达T668重组蛋白对肠炎模型鼠的保护作用。BALB/c小鼠腹腔注射50μg T668蛋白1次/10d,共3次,直肠内灌注5mg三硝基甲苯磺酸(TNBS)以诱导肠炎发生,通过检测疾病活动指数、组织病理变化进行评估及Th1、Th2型免疫反应相关细胞因子变化情况。T668重组蛋白明显改善疾病活动指数(DAI)及宏观和微观上病理评分。肠道细胞ELISA检测显示,T668蛋白免疫造模后3、7dIL-10和TGF-βLPMC产生水平高差异显著(P<0.05),而3、7dIFN-γ、IL-17和3d后的IL-12LPMC产生水平低差异显著(P<0.05);免疫细胞检测7d的蛋白免疫组CD4+CD25+Foxp3+Treg表达比未免疫组显著降低(P<0.05)。T668表达的重组蛋白对IBD是一个潜在的保护剂。 孙树民 王学林 郭恒 刘明远关键词:旋毛虫 炎症性肠病 旋毛虫A200711蛋白的原核表达、纯化及其对H7402细胞增殖的影响 被引量:3 2012年 目的原核表达旋毛虫抗肿瘤基因A200711,并纯化该蛋白,CCK-8检测其对H7402人肝癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR获得A200711基因片段,构建重组表达载体pET-28a(+)-A200711,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)。SDS-PAGE及Western blot检测IPTG诱导后重组菌,采用Ni-NTA亲合层析柱纯化并柱上复性目的蛋白。细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测A200711蛋白对H7402细胞的生长抑制作用。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-A200711,目的蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;SDS-PAGE及Western blot分析显示,相对分子量约22KD处出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲合层析柱获得了高纯度可溶性的A200711蛋白;H7402细胞增殖抑制率与A200711蛋白浓度存在量效关系,同时随作用时间的延长增殖抑制率也明显增加。结论成功克隆、表达并纯化了旋毛虫A200711蛋白。A200711蛋白可抑制H7402细胞的增殖,且呈现时效和量效关系,本研究表明旋毛虫A200711蛋白作为潜在的抗肝癌生物制剂有进一步研究的价值。 李慧萍 刘学 张馨月 郭恒 赵丽晶 刘攀 孙树民 褚丽新 刘娟 刘明远 王学林关键词:旋毛虫 抗肿瘤 原核表达 旋毛虫和伪旋毛虫基因表达比较研究 旋毛线虫可造成一种危害严重的人兽共患病旋毛虫病。旋毛虫(Trichinella spiralis,T1)和伪旋毛虫(T.pseudospiralis,T4)是旋毛虫属中的两个不同的种,二者在寄生和致病行为上存在多方面差别... 唐艺芝 吴秀萍 高飞 郭恒 王学林 杜靖 唐斌 刘明远文献传递 基于冰核蛋白的狂犬病毒糖蛋白细菌表面展示 被引量:3 2010年 为验证冰核蛋白表面展示系统的可行性与优越性,将编码狂犬病毒(Rabies virus,RV)主要免疫保护性抗原糖蛋白G基因片段融合到丁香假单胞菌冰核蛋白截断的N端,构建表面展示载体pET28a-INP-RVG。转化大肠埃希菌BL21(DE3)后16℃低温诱导表达,SDS-PAGE检测表明在约78 ku和56 ku处有明细的蛋白带出现,大小与理论值相符。完整细胞ELISA实验结果表明,重组蛋白在大肠埃希菌表面成功展示。为进一步研制基于沙门菌的多抗原表位展示性重组疫苗、新型狂犬病疫苗奠定基础。 郭恒 刘娟 李慧萍 王学林 孙树民 张茂林 高丽芳 徐德启 刘明远关键词:狂犬病毒 大肠埃希菌