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付宝权: 作品数：207 被引量：371H指数：11; 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划甘肃省科技重大专项计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>

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旋毛虫新生幼虫p46000抗原基因的表达与抗原性分析被引量：8: 2005年; 目的　对旋毛虫新生幼虫p460 0 0抗原基因进行原核表达并检测重组抗原的抗原性。　方法　利用聚合酶链反应 (PCR)扩增目的基因 ,克隆到原核表达载体 pET 2 8a ,构建重组表达质粒 ,经酶切及测序鉴定后转化大肠埃希菌BL2 1(DE3 ) ,以异丙基 β D 硫代半乳糖苷诱导表达。十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)、酶联免疫吸附测定 (ELISA)和蛋白质印迹法 (Westernblotting)分析表达产物。　结果　SDS PAGE结果显示表达产物的分子量约为Mr 480 0 0 ,与理论值相符。ELISA和Westernblotting结果表明 ,重组蛋白可被旋毛虫感染的猪血清和兔抗重组蛋白血清识别 ;兔抗重组蛋白血清可识别旋毛虫新生幼虫抗原Mr 460 0 0蛋白。　结论　成功表达了旋毛虫新生幼虫p460 0 0抗原基因 ,重组抗原具有良好的抗原性。; 原丽红付宝权刘明远高飞张亚兰吴秀萍林本夫李莲瑞卢强陈启军P.Boireau; 关键词：抗原基因旋毛虫重组抗原抗原性分析 SDS-PAGE 猪血清

一株牛皮肤成纤维细胞BEF及其应用: 本发明属于细胞生物学与生物技术领域，具体涉及一株牛皮肤成纤维细胞BEF及其应用。本发明提供的牛皮肤成纤维细胞BEF用于结节性皮肤病病毒的分离、培养，具有病毒传代稳定、病毒滴度高，而且可以防止因使用原代细胞而使所分离的病毒...; 贾怀杰景志忠邓瑞雪王晓霞郑海学郭建宏刘学荣付宝权刘湘涛罗建勋潘玉平胡小慧郭爱民娄忠子蒙泽菁邵文华陈国华房永祥何小兵安芳兰武发菊谭金龙董文教

一种基于流式细胞技术分离单个球虫卵囊的方法: 本发明提供了一种基于流式细胞技术分离单个球虫卵囊的方法,属于生物技术领域。本发明确定了针对球虫卵囊单个分离的参数，在流式细胞仪从细胞群中高速分选出被指定的细胞，具有分选准确度高、分选速度快等优点。其分选时间较短，且分选得...; 曲自刚付宝权黎玉琼李文卉张念章杨峰

旋毛虫属分类方法研究进展被引量：1: 2009年; 姚春雨汪明刘明远付宝权; 关键词：旋毛虫病分子生物学分子遗传学物种进化分子水平

重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2在制备抗旋毛虫感染疫苗中的应用: 本发明提供了重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2在制备抗旋毛虫感染疫苗中的应用，属于免疫调节技术领域，所述重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2能够诱导小鼠机体产生Th2型免疫应答，诱导小鼠的CD4<Sup>+</Sup>T细胞的...; 张念章李文卉金启旺秦洪涛付宝权; 文献传递

用于鉴定多房棘球绦虫引物对、引物探针组以及他们的应用: 本发明公开了一种用于鉴定多房棘球绦虫引物对、引物探针组以及他们的应用。本发明提供了特异引物对，由序列2所示单链DNA分子和序列3所示单链DNA分子组成。本发明还保护引物探针组，由特异引物对和特异探针组成；特异探针自上游至...; 贾万忠吴燕涛闫鸿斌李立朱国强李秀荣李双男姚刚付宝权; 文献传递

2个旋毛虫新生幼虫期特异性相似cDNA的克隆及序列分析被引量：4: 2004年; 利用旋毛虫新生幼虫期特异性 c DNA探针 ,从新生幼虫 c DNA文库中筛选出 2个相似的旋毛虫新生幼虫期特异性 c DNA克隆 ,分别命名为 N5和 N10 ,N5长度为 12 5 0 bp,N10长度为 12 33bp。 NCBI Blast检索表明 ,2个c DNA全长序列均为旋毛虫新基因序列。DNASIS分析表明 ,N5与 N10的开放阅读框架分别为 10 14、10 17bp,编码338、339个氨基酸 ,推导的成熟蛋白氨基酸序列均为 32 1个氨基酸残基 ,相对分子质量推导值分别为 35 30 0和 354 0 0。 2个氨基酸序列中 N端均包含有一信号肽序列 ,可能为分泌性蛋白。NCBI Blast及 Inter Proscan检索表明 ,以上2个氨基酸序列均含有型核酸酶的功能结构域 ,均编码型核酸酶 (DNase ) ,且与已报道的旋毛虫包囊形成相关蛋白 P4 3(经鉴定也为 DNase )同源性最高。目前已有的试验结果证实 ,P4 3并未直接参与包囊的形成 ,而是一种与P4 3蛋白同源性非常高的蛋白参与了旋毛虫包囊的形成。由于 N5与 N10为旋毛虫新生幼虫期特异性表达基因 ,也就是在旋毛虫包囊形成的时期表达 ,而且与 P4 3具有较高的同源性 ,并均编码 DNase 蛋白 ,因此 N5。; 刘明远吴秀萍付宝权卢强姚春雨李莲瑞P.Boireau; 关键词：旋毛虫幼虫期 CDNA克隆

有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库的构建被引量：20: 2004年; 利用 Stratagene公司 Hybri ZAP- 2 .1建库试剂盒构建了经有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞 c DNA文库。采取健康鲤鱼外周血 ,分离白细胞 ,经 L PS、PHA和 Con A分组作用不同时间后 ,分别提取总 RNA,将各组样品混合后 ,以 Oligo(d T)纤维素柱分离纯化 m RNA,经逆转录合成 c DNA的第 1链和第 2链 ,与 Eco R 接头连接 ,酶切后 ,用CHROMA SPIN- 4 0 0柱离心层析纯化 ,与 Hybri ZAP- 2 .1载体连接 ,体外包装后转染 E.coli XL I- Blue宿主菌 ,进行滴度测试和文库扩增。结果构建的经有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞 c DNA文库原始库容量为 1.6 7× 10 6 pfu,插入片段长度在 0 .4× 10 3～ 3.0× 10 3bp,重组率为 98.9% ,扩增后的文库滴度为 6 .16× 10 9pfu/m L ,该文库符合 c DNA文库构建的标准。; 卢强丰培金李莲瑞付宝权刘明远; 关键词：有丝分裂原鲤鱼外周血白细胞 CDNA文库

水疱性口炎病毒(VSV)拯救最佳质粒转染比例的初步摸索被引量：1: 2023年; 本研究拟筛选出一组水疱性口炎病毒(VSV)拯救的最佳质粒转染比例,以提高病毒拯救效率。首先通过8组不同的转染比例进行病毒拯救,发现有5种比例能够成功拯救病毒,然后通过空斑分析病毒滴度,RT-q PCR检测病毒VSV-N m RNA的相对表达量,Western-blot分析VSV-G的表达。结果显示,与其他转染比例组相比,转染比例g组(pN∶pP∶pL∶VSV=3∶5∶1∶5)的拯救效率最优,转染比例b组(pN∶pP∶pL∶VSV=0.5∶0.4∶0.2∶1)的拯救效率最低。上述结果表明,本研究首次筛选出一组VSV病毒拯救的最佳质粒转染比例,为VSV反向遗传学的相关应用或研究提供了参考。; 张永芝杨帆谭金龙韩武玮怡杨建社张晋宽刘瑞菊赵伟杰韩伟何晓波付宝权李维克; 关键词：水疱性口炎病毒病毒拯救

嗜水气单胞菌重组Aer毒素的纯化和抗原性分析被引量：7: 2005年; 对原核表达的重组嗜水气单胞菌Aer毒素进行初步纯化,比较了它与天然Aer毒素的抗原性,为建立检测该毒素的免疫学方法奠定了基础。将原核表达的重组Aer毒素经SDS-PAGE后,切下目的蛋白,利用电洗脱法将蛋白洗脱出来,后经透析、PEG8000浓缩、定量,对獭兔进行免疫,采集血清,提纯IgG,在W estern b lotting试验中可与天然Aer毒素起反应,说明,体外表达的重组Aer毒素保留了天然Aer毒素所具有的抗原性。同时,将嗜水气单胞菌AHCS02菌接种于兔鲜血平板,30℃、培养15 h后,将具有β-溶血的单菌落于LB液体培养基中培养后,用饱和硫酸铵法提取上清液中的天然Aer毒素,用甲醛脱毒后,以同样免疫方法免疫獭兔,免疫结束后,采集血清提取IgG,在W estern b lotting试验中,可以检测到重组Aer毒素。试验说明:原核表达的重组Aer毒素和天然Aer毒素诱导獭兔产生的血清IgG抗体可以互相识别重组Aer毒素和天然Aer毒素,重组Aer毒素和天然Aer毒素有相似的抗原性。; 李莲瑞卢强刘明远付宝权韩文瑜孙树民郭恒崔国祯; 关键词：嗜水气单胞菌重组毒素纯化天然毒素抗原性分析

付宝权

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