赵明君
- 作品数:4 被引量:17H指数:2
- 供职机构:中国海洋大学海洋生命学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 副溶血弧菌一种糖蛋白酶(复苏促进因子)在大肠杆菌中的表达及性质被引量:1
- 2012年
- 用PCR方法从副溶血弧菌8621.4基因组中扩增出1种细胞复苏促进因子家族的糖蛋白酶(Glycoprotease,Gcp)基因,核酸序列分析表明其含有完整的gcp基因开放阅读框,编码233个氨基酸组成的蛋白质。核酸序列与副溶血弧菌糖蛋白酶家族基因的序列相似性为100%。其氨基酸序列与哈维氏弧菌HY01、弧菌Ex25、溶珊瑚弧菌、拟态弧菌和杀鲑弧菌LFI1238等糖蛋白酶的序列相似性为67%~92%。将该基因克隆到表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,用Ni琼脂糖亲和柱层析纯化的蛋白为单一条带,利用纯化的Gcp免疫新西兰大白兔制备特异性抗体,Western-Blotting分析发现正常生长及活的非可培养状态(VBNC)诱导过程中的副溶血弧菌细胞内表达的Gcp蛋白为1条带,分子量约为27kDa,而在VBNC状态的菌体中检测到2条蛋白带。研究结果为进一步探索海洋弧菌活VBNC的形成和复苏机制奠定基础。
- 赵明君贾俊涛陈吉祥
- 关键词:副溶血弧菌
- 活的非可培养状态溶藻胶弧菌复苏后的致病性及基因表达被引量:2
- 2010年
- 溶藻胶弧菌广泛分布于海洋环境,是海洋生物及人类的条件性致病菌。溶藻胶弧菌在不良环境进入活的非可培养状态,当条件适宜时复苏为可培养形式。本文研究了溶藻胶弧菌由活的非可培养状态复苏为可培养状态时的生理特征及对斑马鱼的致病性,结果发现复苏为可培养状态的溶藻胶弧菌对紫外辐射、热激、冷激的抵抗力没有明显改变。用RT-PCR未检测到VBNC状态溶藻胶弧菌tox S和tox R基因的表达,而复苏后的细胞检测到这些基因的表达。复苏后的溶藻胶弧菌对斑马鱼的LD50为6.25×106CFU/尾,与野生菌株(LD50为4.80×106CFU/尾)没有显著差别。
- 姜荧安陈吉祥贾俊涛郭倩茹赵明君
- 关键词:基因表达
- 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)tdh2基因和鳗弧菌(V.anguillarum)ompU基因二联DNA疫苗制备及其对大菱鲆(Scophthalmus maximus)免疫保护作用被引量:14
- 2011年
- 采用基因工程的方法,将副溶血弧菌的热稳定直接溶血素基因tdh2和鳗弧菌外膜蛋白基因ompU进行融合,在大肠杆菌中得到表达,并利用该融合基因构建二联DNA疫苗pEGFP-N1/tdh2-ompU。用DNA疫苗按10和50μg/尾的剂量通过肌肉注射免疫大菱鲆,对大菱鲆抵抗致病性副溶血弧菌和鳗弧菌的免疫效果进行研究。结果表明,DNA疫苗免疫的大菱鲆对副溶血弧菌感染的最高保护率为100%,对鳗弧菌感染的保护率为35%。被免疫的大菱鲆肌肉组织中能检测到融合蛋白表达,在血清中能检测到较高水平特异性抗体,DNA疫苗引起的体液免疫反应水平和保护效果与注射剂量有关。
- 刘瑞赵明君杨慧陈吉祥
- 关键词:副溶血弧菌鳗弧菌大菱鲆
- 海洋弧菌复苏促进因子家族糖蛋白酶的研究
- 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)广泛分布于江湖河口及海洋环境,是引起水产动物疾病的条件性致病菌,副溶血弧菌也是引起人食物中毒的重要病原菌。副溶血弧菌...
- 赵明君
- 关键词:副溶血弧菌哈维氏弧菌海洋弧菌