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miR-155对人肺癌95D细胞生物学行为的影响被引量：1: 2014年; 目的:构建携microRNA-155(miR-155)的真核表达载体并观察其转染高转移性人巨细胞肺癌95D细胞后细胞的生物学行为变化。方法:以95D细胞基因组RNA为模板,经PCR法扩增miR-155的前体序列,由BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体pcDNA 3.1(-),并进行双酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-pri-miR-155载体(命名为p-miR-155)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用Real-time PCR探针法检测miR-155成熟体的表达水平,并利用CCK-8法、克隆形成实验和划痕法检测95D细胞的增殖、克隆形成以及体外迁移能力。结果:成功构建携miR-155的真核表达载体;与空白(Mock)和对照组(p-Ctrl)相比,转染后的95D细胞过表达miR-155[(2.04±0.62)vs(0.76±0.62)、(1.00±0.45),均P<0.01]、p-miR-155载体转染组95D细胞的增殖抑制明显增加[(46.70±6.89)%vs(3.70±1.40)%、(1.11±0.75)%,P<0.01]、克隆形成能力(在100和1 000个细胞/孔接种条件下)明显下降[(12±3)vs(34±3)、(35±3)个,P<0.01;(78±4)vs(159±4)、(165±4)个,P<0.01)],此外,细胞的迁移细胞数也明显减少[(110±5)vs(295±5)、(325±5)个,P<0.01]。结论:通过miR-155真核表达载体转染产生的过表达miR-155可显著抑制人肺癌95D细胞的增殖和迁移能力。; 赵娟娟李永菊陈超郭萌萌陶弋婧任涛徐林; 关键词：真核表达肺癌增殖迁移

天然CD4^+CD25^+调节性T细胞在胸腺中发育的研究进展被引量：1: 2015年; 天然CD4+CD25+调节性T细胞是CD4+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的重要功能亚群,其主要在胸腺中发育成熟,对维持自身免疫耐受具有重要意义。新近研究显示,胸腺微环境中多种分子和相关信号途径在天然CD4+CD25+调节性T细胞的发育中具有重要作用,这不仅促进了人们对天然CD4+CD25+调节性T细胞的认识,而且对于机体免疫耐受机制的探讨均具有重要意义。本文就其相关研究进展做一综述。; 陶弋婧赵娟娟郭萌萌胡艳朱顺飞秦娜琳郑静徐林; 关键词：FOXP3 发育

微小RNA-125与乳腺癌关系的研究进展: 2015年; 微RNA-125（microRNA-125，miR125）是近年来新发现的miRNAs家族成员，其基因定位于染色体11q24上，与线虫lin-4具有较高的同源性。现有的研究显示miR125家族包括三个成员，分别是miR-125a，miR-125b-1和miR-125b-2，这三个成员间序列存在高度保守性，在功能上与包括内皮细胞在内的多种细胞的发育密切相关。; 雷良玉赵娟娟卢佳郑文徐华林郭萌萌陶弋婧徐林; 关键词：乳腺癌

非病毒载体递送微小RNA治疗肿瘤的研究进展被引量：3: 2016年; 近年来,微小RNAs(microRNAs,miRNAs)在肿瘤基因治疗方面的研究取得了重要进展,而递送载体则成为miRNAs分子肿瘤基因治疗研究的热点。非病毒递送载体由于高安全性、低免疫原性、高转染效率以及易于制备等优势,具有重要的潜在临床应用价值。本文就目前代表性非病毒递送载体的种类及其在miRNAs肿瘤基因治疗方面的研究进展进行了综述。; 崔盼盼陈超赵娟娟雷良玉陶弋婧秦娜琳徐林; 关键词：微小RNAS 递送系统肿瘤基因治疗

miR-126基因敲减对小鼠胸腺淋巴细胞发育的影响被引量：2: 2016年; 目的研究miR-126基因敲减对小鼠胸腺细胞发育的影响,并初步探讨其意义。方法观察miR-126基因敲减(KD)小鼠胸腺的体积、重量和细胞总数;Real-time PCR检测小鼠胸腺miR-126表达水平;HE染色观察小鼠胸腺形态学结构;FACS检测胸腺中淋巴细胞比例、核抗原Ki-67的表达以及细胞凋亡的变化;最后,Western blot检测胸腺中磷酸化AKT(p-AKT)和磷酸化ERK1/2(p-ERK)的表达。结果 WT和miR-126KD小鼠胸腺体积大小、重量以及细胞总数均无明显差异,但miR-126KD小鼠胸腺miRNA-126表达水平显著下调(P<0.05)。miR-126KD小鼠胸腺组织结构出现形态学异常。与WT小鼠相比,miR-126KD小鼠胸腺CD4^+SP细胞比例及细胞绝对数明显增加(P<0.05),而CD4^+CD8^+(DP)细胞比例及绝对数则显著减少(P<0.05),miR-126KD小鼠胸腺CD4^+SP细胞核抗原Ki-67表达显著增加(P<0.05),且细胞凋亡明显减少(P<0.05),而DP细胞Ki-67表达则明显减少(P<0.05)。最后,miR-126KD小鼠胸腺淋巴细胞中磷酸化AKT和磷酸化ERK1/2的表达水平明显下调(P<0.05)。结论 miR-126基因敲减可显著影响胸腺细胞特别是CD4^+SP细胞的发育,为后续进一步深入探讨miR-126对T淋巴细胞发育以及功能的影响提供重要的实验基础。; 郭萌萌胡燕赵娟娟陶弋婧秦娜琳郑静徐林; 关键词：胸腺 CD4+T细胞

miR-7基因敲减对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响被引量：5: 2019年; 观察miR-7基因敲减(knockdown, KD)对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响,并初步探讨其机制。分别用0、50、100、200 ng/mL LPS刺激野生型(wild type, WT)小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,经实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR, Real-time PCR)检测发现,随着LPS刺激浓度的增加,巨噬细胞中miR-7的表达水平逐渐升高,且在100 ng/mL LPS浓度刺激下miR-7表达最显著(P<0.01)。用100 ng/mL LPS处理miR-7 KD小鼠和WT小鼠骨髓来源巨噬细胞12 h,镜检观察到巨噬细胞形态均由圆形变为长梭形,并伸出长长的伪足。应用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD80和CD86分子的表达情况,结果显示,LPS作用后,miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞表面CD80和CD86的比例较WT小鼠显著上调(P<0.05)。Real-time PCR和ELISA结果显示,miR-7 KD小鼠巨噬细胞在LPS刺激后,炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-ɑ的表达显著增加(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,LPS刺激后,与对照组相比,miR-7 KD小鼠巨噬细胞中NF-κB p65和p-NF-κB p65的蛋白水平显著升高(P<0.01)。以上数据显示,miR-7基因KD可显著增强LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,可能与NF-κB信号通路的传递增强有关,提示miR-7在巨噬细胞炎症过程中发挥重要的调控作用。; 陈慧子郭萌萌郭萌萌岳东旭赵娟娟陈超岳东旭; 关键词：巨噬细胞炎症

miR-7对小鼠CD4~+T细胞基因表达谱的影响: 目的 :通过cDNA基因芯片,筛查micro RNA-7(mi R-7)与脾脏CD4+CD62L+nave T细胞功能有关的差异表达的基因和信号通路,并初步探讨mi R-7调节CD4+T细胞的作用的靶分子。方法 :利用...; 赵娟娟陶弋婧徐华林郭萌萌周涯徐林; 关键词：基因表达谱信号转导通路; 文献传递

下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响: 目的:研究下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响。方法:利用反义核酸技术设计针对miRNA-21成熟体的ASO序列,构建pcDNA-6.2-miRNA-21-ASO真核表达载体(命名为P-miR...; 陶弋婧赵娟娟李永菊郭萌萌周涯秦娜琳郑静罗军敏徐林; 关键词：MIRNA-21 结肠癌真核表达; 文献传递

微小RNA-126基因在CD4＋T细胞介导小鼠自身免疫性肠炎中的作用被引量：1: 2017年; 目的研究微小RNA-126(micro RNA-126,miR-126)基因敲减(knock down,KD)对CD4^+T细胞介导的自身免疫性结肠炎模型的影响并探讨其意义。方法常规利用DSS溶液喂养野生型(WT)和miR-126基因敲减(miR-126KD)小鼠,诱导急性自身免疫性结肠炎模型。HE染色观察小鼠结肠组织病理变化;FACS检测CD4^+T细胞的比例变化及其表面活化分子CD62L、CD44的表达;MACS分选出WT和miR-126KD小鼠脾脏中CD4^+CD62L+T细胞,CFSE染色标记后,分别经尾静脉转输给WT小鼠,再诱导自身免疫性结肠炎模型;HE染色观察结肠组织病理变化;FACS检测CFSE阳性CD4^+T细胞表面活化分子CD62L、CD44的表达变化。结果与对照组相比,miR-126KD小鼠肠组织绒毛缺失不完整,黏膜上皮出现较大溃疡,炎性细胞浸润增加;FACS结果显示,miR-126KD组小鼠CD4^+T细胞比例和总数显著上调(P<0.01);且高表达CD44,低表达CD62L;过继转输实验结果显示,miR-126KD小鼠CD4^+T细胞转输组结肠组织损伤加重;同时,CFSE+细胞高表达CD44,低表达CD62L。结论 miR-126基因敲减加重葡聚糖硫酸钠所致肠炎的病变程度。; 褚风云胡燕郭萌萌陈超赵娟娟刘云秦娜琳郑静徐林; 关键词：CD4+T细胞 IBD 肠炎模型

微小RNA-7敲减对小鼠脾脏中T淋巴细胞体外功能的影响被引量：4: 2016年; 观察微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(Knock down,KD)对小鼠脾脏T淋巴细胞体外功能的影响并探讨其意义。常规分离野生型(wild type,WT)小鼠脾脏T淋巴细胞,经CD3和CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测不同时间点(0h;24h;48h)细胞中miR-7的表达变化;进一步用Con A、CD3和CD28抗体刺激miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞,CCK8检测细胞增殖率;Real-time PCR检测miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IL-10表达的变化;FACS检测CD4+T和CD8+T细胞的数量变化及CD4+T细胞膜分子CD44、CD62L和IL-4、IFN-γ的表达变化。结果显示,WT小鼠脾脏T淋巴细胞活化后,miR-7的表达水平显著上调(P<0.05);与WT小鼠相比,在Con A、CD3和CD28抗体作用下miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显增加(P<0.05);miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α和IFN-γ水平均明显上调(P<0.05),而IL-10表达显著下调(P<0.05);FACS检测结果显示CD4+T细胞比例明显上调(P<0.05),而CD8+T细胞的比例变化不显著(P>0.05);CD4+T细胞膜分子CD62L水平显著下降,CD69及IL-4、IFN-γ的表达水平均显著上调(P<0.05)。结果表明,miR-7敲减以后可显著影响小鼠脾脏T淋巴细胞的功能,本实验为后续深入探讨其在T淋巴细胞功能调控中的作用提供实验依据。; 郑文赵娟娟朱顺飞徐华林雷良玉卢佳贾力褚风云王海嵘徐林; 关键词：CD4+T细胞

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赵娟娟

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