谢磊
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
- 供职机构:浙江理工大学更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省教育厅科研计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学环境科学与工程自动化与计算机技术更多>>
- 基于集合预报的空气质量预报预警系统设计
- 随着我国工业化的快速发展,化石能源需求不断增多,导致排入大气中的有害物质增多,各种环境污染事件层出不穷,环境污染事件的发展规模、损害后果日趋扩大,已经对我国的经济发展产生了影响。在我国许多地区,大气污染类型已经由过去单煤...
- 谢磊
- 关键词:空气质量数值预报模式模块化设计
- 种未知家蚕膜蛋白的表达、纯化及相关功能研究
- 膜蛋白在细胞间接触、表面识别、信号转导、酶活性等方面都扮演着重要的角色。由于膜蛋白在天然生物体中的数量非常低,异源表达的膜蛋白经常表达量较低或者无活性,膜蛋白的过表达可能对细胞有毒性,并且在纯化时很难选择合适的溶解试剂,...
- 谢磊
- 关键词:蛋白结构基因表达
- 文献传递
- 家蚕膜蛋白基因(BmTmC27)的序列分析及组织特异性和原核表达
- 2012年
- 从家蚕蛹cDNA文库中筛选获得一条家蚕膜蛋白基因序列,通过编码氨基酸序列的同源性比对表明其可能是家蚕的未知功能序列,命名为BmTmC27(GenBank登录号:DY231073.1)。生物信息学分析结果表明该基因全长833 bp,由558 bp的开放阅读框、102 bp的5'端非翻译区和173 bp的3'端非翻译区组成,编码蛋白由185个氨基酸组成且含有4个跨膜区,预测蛋白分子质量为20.94 kD,等电点为7.38。将该基因片段与BmNPV的polh基因连接后克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建原核融合表达载体pGEX-4T-1-polh-BmTmC27,经IPTG诱导、SDS-PAGE分析表明目的蛋白以包涵体形式在E.coli BL21(DE3)中表达。利用多角体蛋白可溶于碱性环境的性质,采用调节pH值的方法纯化融合表达的重组蛋白GST-Polh-BmT-mC27,然后经TEV酶消化获得BmTmC27蛋白。荧光定量PCR分析BmTmC27在家蚕5龄幼虫不同组织中的表达存在明显差异,其中在脂肪体、中肠和气管中的转录水平较高。利用GST沉降技术研究了BmTmC27的互作蛋白,与对照组相比,发现了4条特异性互作蛋白条带。研究结果有助于进一步探究BmTmC27的生物学功能,也为膜蛋白的表达和纯化提供了一种新方法。
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- 关键词:转录原核表达