张耀洲
- 作品数：350 被引量：1,083H指数：16
- 供职机构：天津大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 家蚕Ras oncogene(Bras2)的表达纯化以及功能的初步分析
- Ras蛋白在人类肿瘤的形成中起着重要的作用,平均约30%的癌症表现出Ras家族成员的变异。由于ras基因分布范围广,没有组织特异性,又有细胞信息传导地位的特殊性,因此成为目前致癌研究的热点之一。Ras原癌基因家族包括K-...
- 庄文华吕正兵张耀洲
- 关键词：家蚕亚细胞定位细胞增殖
- 文献传递
- 家蚕小热休克蛋白基因BmHSP20.8的表达及功能研究被引量：2
- 2009年
- 小热休克蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类受热处理后诱导产生的蛋白家族。从构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了一条全长764 bp的基因序列(GenBank登录号:AAG30944.1),其开放阅读框(ORF)长561 bp,编码186个氨基酸。用生物信息学方法对此序列进行同源性分析,表明该序列是一条保守性高达85%的家蚕小热休克蛋白20.8(BmHSP20.8),无跨膜结构,主要分布于细胞质。将该序列的ORF与pET-28a(+)载体连接构建重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21进行原核表达,纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔获得抗血清。通过亚细胞定位技术研究BmHSP20.8在正常和热激状态下的家蚕卵巢上皮细胞Bm5和BmN中的变化,结果显示热激后BmH-SP20.8蛋白从细胞质往细胞膜方向迁移。有BmHSP20.8表达的大肠杆菌菌株经48℃处理后,其生存率比未表达BmHSP20.8蛋白的菌株高4倍左右,说明BmHSP20.8蛋白在大肠杆菌中表达能够提高细菌体在高温环境下的生存率。
- 赵恩伟吕正兵盛清陈健聂作明王丹沈红丹刘立丽舒建洪陈剑清吴祥甫张耀洲
- 关键词：多克隆抗体制备亚细胞定位
- 一种基于抗氧化反应元件的抗氧化药物筛选模型的制备被引量：1
- 2013年
- 目的利用抗氧化反应元件(ARE)调控荧光素酶(Luc)报告基因的表达水平,建立抗氧化药物筛选细胞模型。方法构建由ARE调控Luc表达的重组质粒载体pARE-Luc-Neo,使用FuGENE HD转染剂将重组质粒转染人胚肾上皮Hek293细胞,通过G418进行筛选,使用稀释法挑选阳性单克隆细胞,经抗氧化蛋白诱导剂TBHQ诱导,检测细胞中Luc的活性,筛选Luc高活性的单克隆细胞株。利用白藜芦醇和姜黄素评价阳性克隆的筛选效果,观察5个中药单体穿心莲内酯、隐丹参酮、水飞蓟素、苦参碱和虎杖苷在不同浓度(0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L)时对Luc表达水平的影响。结果通过检测Luc活性,筛选获得Hek293-ARE,该细胞中的Luc的表达水平受ARE调控,且在一定范围内与诱导剂的浓度呈相关性。穿心莲内酯、隐丹参酮与水飞蓟素有较好的诱导效果。结论建立的抗氧化药物细胞筛选模型可有效地、高通量地用于抗氧化药物的初步筛选。
- 刘阳陈剑清舒特俊吕正兵张耀洲
- 关键词：抗氧化药物药物筛选细胞模型荧光素酶报告基因
- 内质网膜上的转运使者——易位子相关蛋白(TRAP)被引量：3
- 2008年
- 内质网膜蛋白在参与信号序列的识别、新生肽链的修饰、转运通道的形成等生理过程中发挥重要作用.易位子相关蛋白(translocon-associated protein,TRAP)是广泛存在于高等真核生物中的一种膜蛋白,其作为信号序列的受体蛋白位于内质网膜上.该蛋白能选择性地识别信号序列,并与Sec61相互作用形成一个以Sec61为核心、TRAP侧向延伸的椭圆状转运通道,从而靶向新生肽链进入内质网腔.近来研究发现,TRAP与蛋白质构象病、神经退行性疾病、肿瘤转移等疾病的发病机制有关.本文将对TRAP各个亚基的最新研究及其功能作一综述.
- 吴涛张耀洲
- 关键词：内质网膜
- 家蚕生物反应器制药工程
- 栽桑养蚕源于我国,已有5000年的历史,是一种特有的经济昆虫,创造了人类灿烂的丝绸文化。但近几年来丝绸行业的大滑坡,蚕桑面积大量减少,因此蚕桑应走综合化发展的方向,尤其是走高科技发展方向。
- 张耀洲
- 关键词：家蚕生物反应器制药工程生物药物杆状病毒
- 人内皮抑素基因在家蚕培养细胞和幼虫中的表达
- 近年来,人们发现血管生成是所有实体肿瘤生长和转移的必需条件之一。新生血管不仅为肿瘤的生长工提供所需的营养原料,同时也是肿瘤细胞转移的通道。据此,Folkman等(1971年)提出一条新的治疗肿瘤的思路-抗血管生成治疗。已...
- 朱振洪金勇丰张耀洲
- 文献传递
- CTB和胰岛素融合蛋白在家蚕中表达的研究
- Ⅰ型糖尿病(胰岛素依赖性糖尿病,IDDM)由胰岛素分泌缺陷产生,它是一种针对胰岛?细胞的自身免疫性疫病。虽然导致IDDM的自身抗原包括胰岛素谷氨酸脱羧酶、胰岛素、热休克蛋白、羧基肽酶H等多种抗原,但是实验中仅给动物口服一...
- 龚朝辉金勇丰张耀洲
- 文献传递
- 家蚕核型多角体病毒遍在蛋白及结合肽的研究
- 2004年
- 从家蚕核型多角体病毒镇江株 (BombyxmorinuclearpolyhedrosisvirusZhenjiangstrain ,BmNPV ZJ)基因组DNA中克隆遍在蛋白 (BmVUB)基因 .序列分析结果显示 ,BmVUB基因长 2 34bp ,编码 77个氨基酸 .BmVUB氨基酸序列内有一致HTH序列 ,遍在蛋白保守序列LRLRGG ,参与遍在蛋白 蛋白酶复合体形成的 4个保守性功能位点 (Lys 2 9、Cys 4 8、Cys 6 3、Gly 76 )及保守的Gly Gly X (X是疏水氨基酸残基 )蛋白酶切信号序列 ,在遍在蛋白保守的Gly Gly后多出由一个氨基酸组成的延伸肽 .原核诱导表达表明BmVUB主要以可溶性形式存在 ,表达量占总菌蛋白的 5 0 %以上 .纯化的遍在蛋白浓度为 1 0 3～ 2 4 6 g/L ,制备抗体 ,效价在 3 2× 10 -5以上 .用噬菌体表面展示技术筛选遍在蛋白结合肽 ,所筛选的结合肽可与遍在蛋白特异性结合 ,其中结合肽VAPHHAYAPMRT对细胞增殖有明显的浓度调控作用 ,即低浓度促进细胞生长 ,高浓度强烈抑制细胞的生长 .
- 张文波林蓉张耀洲吴祥甫
- 关键词：结合肽遍在蛋白白及原核细胞生长
- 芜菁花叶病毒杭州株HC基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1999年
- 通过反转录ＰＣＲ，经克隆得到１３４７ｂｐ的ＴｕＭＶＨ１的ＨＣ片段，并在大肠杆菌表达载体ｐＧＥＭＥＸ１中得到表达，产物为可融性蛋白，分子量约为８０ｋＤ。
- 史锋于晓虹张耀洲
- 关键词：芜菁花叶病毒大肠杆菌
- 全反式维甲酸(ATRA)对BmNIF31蛋白亚细胞定位的影响
- NIF3类(NGG1p interacting factor 3 like)蛋白的命名起源于酵母的NIF3蛋白,它可以和转录调节因子NGG1p相互作用,但是作用机制还不清楚,所以被归属为未知功能蛋白。在一些哺乳动物细胞的...
- 陈剑清盖其静张耀洲
- 关键词：全反式维甲酸亚细胞定位
