蔡真
- 作品数：22 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 工业生物技术专刊序言被引量：3
- 2011年
- 以生物催化和生物转化为核心的工业生物技术是实现社会和经济可持续发展的有效手段。本期专刊分别从基因工程、代谢工程与合成生物学、生理工程、发酵工程与生化工程、生物催化与生物转化、生物技术与方法等方面,介绍了我国在工业生物技术领域的最新研究进展。
- 蔡真李寅
- 关键词：工业生物技术基因工程代谢工程合成生物学
- 构建能固定CO2的大肠杆菌及其固碳效率的定量分析
- 将CO
- 蔡真巩伏雨柳国霞李寅
- 文献传递
- 高效Rubisco羧化活性筛选体系的设计与构建
- 2020年
- 【背景】广泛存在于植物、藻类及其他自养微生物中的核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)是卡尔文循环中固定CO2的关键酶及限速酶,在生物质合成和全球碳循环中扮演着重要角色。鉴于Rubisco的重要性以及极低的固碳羧化活性,对Rubisco的筛选进化研究具有重要意义。【目的】构建一种适用于筛选高效Rubisco羧化活性的筛选体系。【方法】分析现有筛选体系对Rubisco羧化活性筛选压力缺失的原因,设计构建适用于高效Rubisco羧化活性的筛选体系,以BWLac产乳酸菌株为宿主,在含有5%CO2的N2环境下厌氧培养,比较不同羧化活性Rubisco对细胞生长的影响,通过HPLC及LCMS检测总乳酸及固定CO2生成乳酸的产量评估筛选体系。【结果】通过终端代谢产物乳酸产生下拉力,以及甘油代谢产生的剩余还原力需要平衡消耗掉的设计靶点,增强Prk和Rubisco的固碳支路代谢通量,加强RuBP对细胞的毒性抑制作用,使细胞生长与Rubisco活性有效偶联,构建高通量筛选办法。在新构建的筛选体系中,Rubisco失活突变体BWLac/197不能生长,Rubisco和Prk双失活突变体BWLac/197-2021生长未受影响,菌落大小约1.58 cm。粗酶液羧化活性相差2倍以上的RBC1和7002,其细胞生长在筛选条件下受不同程度抑制,菌落大小分别有1.06 cm和0.65 cm。通过检测乳酸产量及甘油消耗量对筛选体系验证评估,RBC1消耗甘油1.39 g/L,产乳酸2.82 g/L,其中来自于NaH13CO3的标记乳酸含量为18.05μmol/L,比7002的相应检测结果高1.3-1.6倍,检测结果与筛选体系设计原理相符,即乳酸产量越高,甘油消耗越多,Rubisco羧化活性越高,细胞生长得越好。【结论】成功设计构建了高效Rubisco羧化活性筛选体系,为进化或探索更高羧化活性Rubisco提供有效的高通量筛选办法。
- 王斐张君丽张君丽蔡真赵春华蔡真李寅
- 关键词：乳酸CO2固定
- 用于生产β-丙氨酸的工程菌及生产β-丙氨酸的方法
- 本申请公开了用于生产β‑丙氨酸的工程菌及生产β‑丙氨酸的方法。本发明的工程菌是在大肠杆菌基因组上的一个或多个位点整合有DNA序列的重组菌，其中所述DNA序列包含选自如下一种基因：编码枯草芽孢杆菌L‑天冬氨酸α羧化酶的基因...
- 蔡真张君丽李寅张冬竹郭恒华
- 文献传递
- 用于生产D-对羟基苯甘氨酸的DNA分子、重组质粒以及重组菌
- 本发明公开了一种用于生产D-对羟基苯甘氨酸的DNA分子、重组质粒以及重组菌。本发明提供的DNA分子，包括PL启动子、D-海因酶基因和N-氨甲酰水解酶基因，由所述PL启动子启动所述D-海因酶基因和所述N-氨甲酰水解酶基因的...
- 蔡真张君丽
- 文献传递
- 1,2,4-丁三醇的生物合成方法
- 本发明公开了一种1,2,4-丁三醇的生物合成方法。该方法包括用重组生物细胞将苹果酸或其盐转化为1,2,4-丁三醇的步骤；所述重组生物细胞表达具有将苹果酸或其盐转化为1,2,4-丁三醇功能的酶系统。所述酶系统包括如下：（a...
- 蔡真李兴华张延平李寅
- 文献传递
- 一种气相色谱质谱检测系统及方法
- 本发明涉微生物代谢复杂样品的检测技术领域。本发明提供了一种气相色谱质谱检测系统，其包括：第一柱箱色谱柱1、第二柱箱色谱柱2、中心切割单元3、三通阀4、质谱仪接口5、进样口6。本发明实现了微生物发酵液中的微量次级代谢产物的...
- 柳国霞蔡真张君丽唐双焱
- 文献传递
- 改造微生物获得改进表型的方法
- 本发明涉及改造微生物获得改进表型的方法。具体而言，本发明涉及一种改造微生物、获得改进表型的方法。本发明的方法将向微生物中导入一个或十几个具有较强的基因组DNA复制突变率的DNA聚合酶突变体，改为导入一个具有不同DNA复制...
- 蔡真栾国栋李寅
- 文献传递
- 一种高L‑天冬氨酸α羧化酶活性的工程菌及其在生产β‑丙氨酸中的应用
- 本发明公开了一种工程菌及其在生产β‑丙氨酸中的应用。本发明提供的工程菌，其构建方法依次包括如下步骤：（1）将目的蛋白的编码基因插入载体pET‑30a(+)的多克隆位点，得到的重组质粒pET30‑panD<Sub>B</S...
- 蔡真张君丽邓思颖李寅
- 文献传递
- 一种制备高效合成泛酸基因工程菌的方法及其应用
- 本发明通过将不同来源泛酸合成酶基因导入到大肠杆菌中，获得高产泛酸的基因工程菌。采用高效的大肠杆菌蛋白表达系统，异源表达多种不同来源的泛酸合成酶，获得高活性的泛酸合成酶菌株，该菌株可以高效表达泛酸合成酶，将底物泛解酸和β‑...
- 蔡真张君丽奇古王瑞研李寅
