李寅
- 作品数:279 被引量:1,356H指数:24
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:化学工程生物学轻工技术与工程环境科学与工程更多>>
- 利用木糖生产丁醇的工程菌株及其构建方法和应用
- 本发明公开了利用木糖生产丁醇的工程菌株及其构建方法和应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法,包括如下步骤:提高生产丁醇的出发菌的基因组中xylE、xylFGH、xylA、xylB、rpe、tktA、rpiA、talB的表...
- 赵春华张延平李寅珍保罗西努瓦张天瑞董红军
- 新型蛋白聚糖类生物絮凝剂REA-11的合成途径被引量:4
- 2003年
- 谷氨酸棒杆菌CCTCCM201005能合成一种以半乳糖醛酸为主要结构单元的蛋白聚糖类生物絮凝剂(命名为REA 11).为了研究该聚合物的生物合成途径,首先构建了谷氨酸棒杆菌生物合成REA 11的假设途径,然后从(1)中间代谢产物的添加及相关途径关键酶活性的检测和(2)胞内中间代谢产物的检测两个方面来验证该代谢途径的合理性.研究表明,在培养基中添加代谢途径的中间产物UDP 葡萄糖,可显著提高REA 11的絮凝活性,并且UDP 半乳糖差向酶和UDP 半乳糖脱氢酶的比酶活也分别提高了200%和50%;以不同底物为碳源,UDP 葡萄糖焦磷酸化酶、UDP 半乳糖差向酶和UDP 半乳糖脱氢酶的比酶活与REA 11产量的相关系数可分别达到0.75,0.89,0.97.此外,利用HPLC检测出REA 11合成途径中3种关键中间产物UDP 葡萄糖、UDP 半乳糖和UDP 葡萄糖醛酸.由此证明,所构建的REA 11生物合成途径基本合理.
- 关惠琴李寅何宁堵国成陈坚
- 关键词:生物絮凝剂谷氨酸棒杆菌半乳糖醛酸蛋白聚糖生物合成
- 一种适用于产朊假丝酵母的基因敲除系统及其在gsh1基因敲除中的应用被引量:1
- 2011年
- 报道一种适用于产朊假丝酵母Candida utilis的基因敲除系统,利用该敲除系统获得gsh1基因敲除杂合突变株。根据不同种属酵母菌γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)蛋白质的保守序列,克隆C.utilis SZU 07-01的gsh1基因;以商品化质粒pPICZalpha A为基础,构建gsh1基因的敲除载体pPICZalpha A-kan 3,其中,kan基因的启动子TEF被替换为来自于C.utilis SZU 07-01的GAP启动子(pGAP:kan)。质粒电转化C.utilis,获得gsh1基因敲除杂合突变株C.utilis GSH-6。结合发酵培养得到的数据进行分析,突变株的γ-GCS酶活比出发菌株降低17.5%,GSH合成量降低61%,细胞干重降低18.5%。所构建敲除组件pGAP:kan的成功应用为从分子水平研究C.utilis中谷胱甘肽(GSH)的生理功能提供了一种新借鉴。
- 张君丽卫功元董红军朱泰承李寅
- 关键词:基因敲除产朊假丝酵母谷胱甘肽
- 添加羟胺诱导Streptonyces hygroscopicus产谷氨酰胺转胺酶
- <正> 随着市场需求的增加,工业化产谷氨酰胺转胺酶对低成本高产量的要求越来越迫切。在微生物发酵法生产谷氨酰胺转胺酶(MTG)的研究中,已通过优化MTG产酶的营养与环境条件大幅度的提高了酶活水平。在微生物发酵生产谷氨酰胺转...
- 张程杰堵国成李寅陈坚
- 低能荷下提高光滑球拟酵母己糖激酶活性加速葡萄糖消耗
- 为了进一步确定影响光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)发酵生产丙酮酸生产强度的生理因素,在T.glabrata中添加一定浓度己糖激酶抑制剂Cibacron Blue 3G-A降低已糖激酶(HK) 活性导...
- 刘立明李寅堵国成陈坚
- 文献传递
- 面包酵母培养过程解析和流加模式研究被引量:13
- 1995年
- 通过对面包酵母培养过程的解析,确定了分批培养中达到较大比生长速率和良好发酵活力的初糖浓度为24.6g/L;残糖控制浓度为4.0~6.0g/L.采用连续培养方法作为研究手段,得出以糖蜜为限制性碳源基质的面包酵母培养动力学为u=0.611s/(4.206+s)。提出了以最大转化率为目标并能获得优良发酵活力的面包酵母流加培养模式,并通过实验证明了培养模式的适用性。
- 陈坚李寅宋祺石慧东伦世仪
- 关键词:面包酵母
- 谷胱甘肽在乳酸乳球菌酸胁迫中的保护作用
- 为研究还原型谷胱甘肽(OSH)在乳酸乳球菌酸胁迫中的生理作用,以乳酸乳球菌乳脂亚种SK11、NZ9000为对象,比较了在酸胁迫条件下外源性GSH对细胞存活率的影响。在 pH为2.5的酸性条件下短时间胁迫(30 mm)和p...
- 张娟傅瑞燕陈坚李寅
- 文献传递
- 阻断集胞藻6803 PHB合成途径提高胞内NADPH含量被引量:2
- 2011年
- 蓝藻是探索利用太阳能生产化学品的重要微生物,但产量低限制了蓝藻化学品的工业应用。提高宿主还原力水平是提高微生物合成化学品产量的重要手段。为提高集胞藻细胞内NADPH含量,利用同源重组方法,获得敲除聚羟基丁酸酯PHB合酶编码基因phaC和phaE的集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803突变体S.ΔphaC&E。PCR结果证明突变体S.ΔphaC&E基因组中phaC和phaE已完全被氯霉素抗性基因取代。生长曲线结果显示S.ΔphaC&E的生长与野生型无明显差异,说明敲除phaC和phaE对蓝藻生长的影响很小。用气相色谱检测胞内PHB含量,野生藻S.wt中PHB为细胞干重的2.3%,而突变体S.ΔphaC&E中没有PHB生成,该结果说明敲除phaC和phaE能够有效阻断集胞藻中PHB合成。通过对野生藻与突变体进一步比较分析,发现S.ΔphaC&E胞内NADPH浓度明显提高,在第3天时差异最为明显,S.ΔphaC&E胞内NADPH浓度是S.wt的2.85倍。总之,敲除phaC和phaE不仅可以通过阻断副产物PHB的合成,而且还节约了NADPH,使胞内还原力NADPH的水平明显提高。因此为提高蓝藻化学品产量提供了可以改变碳流向和具有充足还原力的工程集胞藻。
- 解鹃周杰张海峰李寅
- 关键词:蓝藻集胞藻代谢工程NADPH
- 重组大肠杆菌生产谷胱甘肽发酵条件的研究被引量:19
- 1999年
- 研究了重组E.coli产GSH的发酵条件,重点考察了添加酵母膏、前体氨基酸和ATP的影响。结果发现,前体氨基酸和ATP均能促进胞内GSH的积累,若在发酵0h和12h分别加入20g/LATP和9mmol/L前体氨基酸,则细胞干重和胞内GSH含量可分别比对照提高24%和14倍。应用正交试验得出的针对细胞干重和GSH总量的最佳组合,最大细胞干重和GSH总量比原试验中的最好结果分别提高了10%和26%。在分析了该菌对葡萄糖利用情况的基础上,对该菌进行了指数流加培养,25h细胞干重与发酵液内GSH总量分别达到80g/L和880mg/L,比摇瓶最好结果分别提高了83和46倍。
- 李寅陈坚毛英鹰伦世仪YOON-MO KOO
- 关键词:谷胱甘肽重组大肠杆菌发酵条件
- 1,2,4-丁三醇的生物合成方法
- 本发明公开了一种1,2,4-丁三醇的生物合成方法。该方法包括用重组生物细胞将苹果酸或其盐转化为1,2,4-丁三醇的步骤;所述重组生物细胞表达具有将苹果酸或其盐转化为1,2,4-丁三醇功能的酶系统。所述酶系统包括如下:(a...
- 蔡真李兴华张延平李寅
- 文献传递