柳子星
- 作品数:10 被引量:24H指数:2
- 供职机构:上海交通大学医学院医学遗传学教研室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 猪软骨细胞同种异体移植的免疫排斥机制被引量:3
- 2005年
- 目的探讨猪软骨细胞同种异体移植的免疫排斥机制。方法分离制备猪软骨细胞和淋巴细胞 ,采用同种异体软骨细胞—淋巴细胞混合培养反应和IFN γ诱导比较分析 ,经3 H TdR法观察淋巴细胞刺激指数 ,FACS测定软骨细胞表面猪白细胞抗原(SLA)分子表达变化 ;不同时间收集混合反应中淋巴细胞 ,分别应用PCR和ELISA技术分析其表达的IFN γ、IL 4mRNA和蛋白含量。结果成功制备了猪的软骨细胞和淋巴细胞 ,软骨细胞表达SLAI类分子 ,而不表达SLAII类分子 ;同种异体软骨细胞对淋巴细胞有轻微刺激扩增作用 ,经IFN γ诱导具有明显增强作用。混合培养 ,18h后上清中可检测到IFN γ蛋白 ,而IL 4表达无变化。结论软骨细胞SLAI类分子刺激同种异体淋巴细胞产生IFN γ,进一步诱导软骨细胞SLAII类分子表达 。
- 张惠珍王树军柳子星李美星王颖张勇陈影葛海良
- 关键词:软骨细胞淋巴细胞IFN-Γ同种异体移植免疫排斥蛋白含量
- MHC II类抗原的诱导性表达和同种异体软骨细胞移植的免疫排斥被引量:19
- 2002年
- 本研究将不同年龄香猪的软骨细胞和可注射性材料复合物Pluronic混合在一起 ,以 5 0× 10 6/ml浓度接种到版纳猪的腹部皮下 ,在第 1、 2、 4周取材作组织学检查 ,并进行软骨细胞表面标志的分析和测定淋巴细胞软骨细胞混合反应(MLChR )的强度。结果显示 :猪的软骨细胞仅表达MHCI类分子 ,分别来自胎猪、幼猪和成年猪的软骨细胞刺激MLChR的能力无显著差别 ,均表现抗原性较弱。经IFN γ诱导后 ,软骨细胞表达MHCII类抗原 ,能明显地刺激淋巴细胞增殖。免疫病理学检测发现 ,在组织化的软骨中 ,第 1周出现大量淋巴细胞浸润 ,第 4周组织化软骨消失。上述结果提示 ,体内同种异体软骨细胞被迅速排异 。
- 柳子星张惠珍王建张勇赵阳周光炎葛海良
- 关键词:软骨细胞同种异体移植
- 建立猪MHCⅠ类抗原特异性人T细胞系的探讨被引量:1
- 2002年
- 目的 建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法 以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞 ,FACS作表型初步分析。结果 初步测定健康人外周血版纳猪SLAⅠ类P1分子特异性T细胞反应频率约 6 .67× 1 0 - 7,所建 4个T细胞系表型均为TCRαβ+ ,其中 3株以CD4+ 为主 ,1株以CD8+ 为主。结论 利用E .coli表达的纯蛋白抗原可建立间接识别版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系。
- 唐军张冬青沈佰华周洪周芸柳子星周光炎
- 关键词:基因表达T细胞系器官移植
- 大鼠IL-10真核表达载体在软骨细胞中的表达被引量:2
- 2003年
- 目的 构建大鼠IL-10真核表达载体并在大鼠软骨细胞中进行表达。方法 将目的基因片段通过酶切连入真核表达载体pcDNA3,并以Super Fect Transfection Reagent介导转入大鼠软骨细胞表达,RT-PCR检测细胞中mRNA水平,及ELISA检测细胞培养上清液中的IL-10蛋白含量。结果 成功构建了大鼠IL-10真核表达载体,转入软骨细胞后,检测到细胞内IL-10mRNA转录,细胞培养24、48和72 h后,经ELISA检测上清液中IL-10蛋白含量分别为36、62和100 pg/mL。结论 大鼠IL-10真核表达载体的构建并在软骨细胞中表达,为研究IL-10诱导软骨细胞同种异体移植耐受奠定了基础。
- 赵阳柳子星王颖张惠珍王树军葛海良
- 关键词:大鼠软骨细胞真核表达
- 大鼠IL—10真核表达载体在软骨细胞中的瞬时表达
- 自身软骨细胞移植用于临床治疗类风湿性关节炎和骨性关节炎已取得良好疗效,组织工程化软骨细胞重塑器官的研究已取得一定进展,但由于自身软骨细胞来源有限,尝试利用同种异体软骨细胞移植,克服机体免疫排斥,是目前急需解决的临床应用的...
- 赵阳柳子星王颖张惠珍王树军葛海良
- 文献传递
- RIG-I基因剔除小鼠表型的初步分析被引量:2
- 2008年
- 目的通过对视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-I基因)剔除小鼠表型的分析,在整体动物水平揭示RIG-Ⅰ的生物学功能。方法Northern blotting和半定量RT-PCR检测小鼠组织中RIG-I基因的表达;对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代谢指标测定及病理组织学检查。结果RIG-Ⅰ在小鼠多种组织中广泛表达,但表达水平存在一定差异。RIG-Ⅰ基因剔除后,小鼠未见明显发育异常;无明显预期的粒系分化受阻表现;但RIG-Ⅰ基因剔除小鼠外周血相中的粒/淋比明显倒置,且对条件性致病菌易感。结论RIG-Ⅰ在小鼠抗细菌免疫过程中具有重要作用。
- 孙岳平张丽君张梅金月娥柳子星张洪信陆顺元孔辉王铸钢
- 关键词:细菌感染基因剔除小鼠
- AML1-ETO转基因小鼠的建立及初步表型分析
- 2005年
- 目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链反应(PCR)方法检测融合基因的整合情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测融合基因的表达情况和组织表达谱。结果:PCR法共检出10只G0代转基因阳性小鼠,其中8个系均产下F1代小鼠,由此建立了8个AM L1-ETO转基因小鼠系。RT-PCR法证实AM L1-ETO融合基因在22系中稳定表达,但血常规、肝脏、脾脏等组织未见异常变化;对该系小鼠的组织表达谱检测表明,融合基因在肝脏、脾脏、心脏和肌肉组织存在不同程度的表达,但在脑组织中不表达。结论:AM L1-ETO融合基因能在转基因小鼠的骨髓等组织中表达,但尚不足以引发白血病,推测其他致病基因在小鼠白血病的发生中也起一定作用。
- 柳子星马志敏顾鸣敏孔辉王龙匡颖徐国江费俭王铸钢
- 关键词:转基因小鼠AML1-ETO融合基因表型分析组织表达谱小鼠白血病
- 人外周血T细胞系间接识别SLAⅠ类分子引起的异种细胞增殖反应
- 2003年
- 目的 确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法 用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细胞系。观察抗原特异性CD4 + T细胞系在自身APC存在下对版纳猪外周血单个核细胞与软骨细胞的反应性 ,以及HLA DR单抗与氯喹的阻断作用。结果 建立 10株SLAⅠ类P1抗原特异性T细胞系 ,其中 8株以TCRαβ+ CD4 + 为主要表型 ,将其合并使用。该CD4 + P1特异性T细胞系在自身APC存在下对相同品系版纳猪PBMC与软骨细胞均产生显著增殖反应。经抗人HLA DR单抗与氯喹处理均能明显阻断其增殖反应。结论 健康人外周血T细胞可通过间接识别SLAⅠ类抗原对版纳猪细胞产生明显应答。
- 唐军周芸柳子星张勇王胜旺周光炎
- 关键词:异种移植
- Rig-I基因表达下降对成熟B细胞株的影响
- 2005年
- Rig-I是全反式维甲酸诱导NB4细胞分化过程的上调基因,可能与细胞分化有关。通过RNAi的方法,使一株B细胞株(1B4.B6.细胞株)的Rig-I下降,研究其下调后对该B细胞株的影响。结果表明Rig-I下调表达使1B4.B6.细胞株中的CD138单阳性细胞比例明显减少,B220单阳性和CD138+B220+双阳性细胞不同程度的升高,这可能与B细胞株分化成浆细胞有关,同时Rig-I下调使LPS刺激该细胞株产生IgG3的胚系转录本(germlinetranscript)的表达下调。提示Rig-I可能参与抗体类别转换。
- 柳子星孙岳平马志敏王铸钢
- 关键词:RNAI技术
- 人T细胞对版纳猪SLA-P1抗原的间接识别和表位分析
- 猪→人异种器官移植中涉及人T细胞介导的排斥反应,即急性细胞性排斥。人T细胞对猪移植物阴转抗原的排斥应答,有直接识别与间接识别两种方式。间接识别的排斥反应是指猪的异种抗原作为外源性蛋白质被人APC摄取和加工后,递呈给自体T...
- 唐军张冬青周芸柳子星张勇陶箭王胜旺周光炎
- 文献传递