李颖健
- 作品数：17 被引量：246H指数：9
- 供职机构：南京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大黄酸对葡萄糖转运蛋白1基因转染系膜细胞功能的影响被引量：44
- 2001年
- 目的 通过观察大黄酸对葡萄糖转运蛋白 1(GLUT 1)基因转染系膜细胞 (MCGT 1)功能的影响 ,探讨大黄酸治疗糖尿病肾病 (DN)的作用机制。方法 利用逆转录病毒载体建立GLUT 1基因转染的大鼠系膜细胞 ,以 β 半乳糖苷酶转染细胞 (MCLacZ)为对照。用 2 脱氧 3 H 葡萄糖 (2 DG)测定细胞葡萄糖摄入 ,流式细胞仪分析细胞表型 ,3 H 脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白 (FN)的合成 ,采用比色法测定谷氨酰胺 :6 磷酸果糖转氨酶 (GFAT)的活性 ,RT PCR检测细胞胶原Ⅳ、FN和GFAT的表达。结果 MCGT 1的 2 DG摄入率明显高于MCLacZ[(741± 6 0 5 )dpm·μgprot 1比 (92 2± 9)dpm·μgprot-1],同时表现出细胞大小、RNA/DNA和蛋白 /DNA明显增加的细胞肥大表型 ,细胞外基质合成增加 ,MCGT 1的3 H 脯氨酸掺入量明显高于MCLacZ[(7 0± 0 4)dpm·cell 1比 (4 6± 0 6 )dpm·cell 1],GFAT活性明显增强 (约增加 1 8倍 )。大黄酸能够减少MCGT 1的糖摄取 [(5 6 0± 6 4)dpm·μgprot 1比 (741± 6 0 5 )dpm·μgprot 1) ,纠正MCGT 1的肥大状态 ,并抑制MCGT 1细胞外基质的合成和表达 ,降低MCGT 1的GFAT活性。结论 GLUT 1的过度表达会明显改变系膜细胞的功能 ,大黄酸能逆转GLUT 1基因转染所致系膜?
- 朱加明刘志红李颖健刘栋郭啸华黎磊石
- 关键词：载体蛋白质类细胞外基质系膜细胞大黄酸葡萄糖转运蛋白1基因转染
- 霉酚酸酯及地塞米松对血管内皮细胞功能的影响被引量：13
- 2000年
- 目的 :研究霉酚酸酯 ,地塞米松对血管内皮细胞功能的影响 ,进一步探讨这两种免疫抑制剂抗炎作用的机制。 方法 :以脐静脉来源的内皮细胞为研究对象 ,通过建立体外内皮细胞血管发生 (angiogenesis)模型 ,观察并比较了两种免疫抑制剂对内皮细胞血管发生 ,内皮细胞迁移能力 (Scratchwoundclosureassay)和内皮细胞增生(3 H TdR掺入 )的影响。 结果 :霉酚酸酯对血管内皮细胞体外血管发生有着较强的抑制作用 ,而地塞米松的抑制作用相对较弱。此外 ,霉酚酸酯还能显著抑制血管内皮细胞增生和迁移能力 ,而地塞米松则对此无显著作用。结论 :在对血管内皮细胞功能的影响上 ,霉酚酸酯具有比地塞米松更为广泛和显著的抑制效应 ,这可能是霉酚酸酯对一些激素治疗无效的血管炎患者仍有良好疗效的分子机制之一。
- 刘浩刘志红黄海东陈朝红李颖健黎磊石
- 关键词：血管内皮细胞血管发生霉酚酸酯药理
- 血管紧张素Ⅱ与肾脏中基因的表达被引量：2
- 1998年
- 最初人们认为肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）属于内分泌系统，在血容量及血压的调节中起关键作用。现在人们逐渐认识到ＲＡＳ系统还以旁分泌、自分泌的方式发挥作用。许多组织中存在ＲＡＳ系统各个成分的表达，而且血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ，ＡｎｇⅡ）可...
- 李颖健
- 关键词：转录因子基因表达肾炎病理
- 细胞培养污染的途径、危害及预防措施被引量：16
- 1999年
- 污染是细胞培养技术中面临的主要问题。由于每一种细胞有其独特的培养体系，因此污染造成的后果也不尽相同。某些污染的发生往往难以察觉和检测，而且污染源能长期共存于培养体系中，这类污染事实上大部分被人们忽视了。培养的细胞作为一个生物体，会对培养环境以及环境中...
- 李颖健刘志红
- 关键词：细胞培养支原体污染
- 葡萄糖转运蛋白1基因转染对系膜细胞功能的影响被引量：2
- 2000年
- 目的通过建立葡萄糖转运蛋白 １（ＧＬＵＴ１）的基因转染系统，观察 ＧＬＵＴ１的过度表达对系膜细胞功能的影响。方法利用逆转录病毒载体建立 ＧＬＵＴ１基因转染的大鼠系膜细胞（ＭＣＧＴ１），以β－半乳糖苷酶转染细胞（ＭＣＬａｃＺ）为对照。用２－脱氧－３Ｈ－萄萄糖（２－ＤＧ）测定细胞葡萄糖摄入，流式细胞仪分析细胞表型，３Ｈ－脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白（ＦＮ）的合成，逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测细胞胶原ＩＶ、ＦＮ的表达。结果ＭＣＧＴ１的２－ＤＧ摄入率明显高于ＭＣＬａｃＺ［（７４１．０±６０．５）ｄｐｍ·μｇ ｐｒｏｔ－１比（９２．２±９．０）ｄｐｍ·μｇ ｐｒｏｔ－１，Ｐ ＜０．０１］。动力学分析发现 ＭＣＧＴ１的 Ｖｍａｘ是 ＭＣＬａｃＺ的 ３ ．７倍，而两者 Ｋｍ值无明显差别。在相同的葡萄糖浓度下，ＭＣＧＴ１的乳酸生成增多，表现出细胞体积增大、ＲＮＡ／ＤＮＡ和蛋白质／ＤＮＡ比值增高等细胞肥大表型。与对照相比，ＭＣＧＴ１的胶原和ＦＮ合成与表达明显增加。结论ＧＬＵＴ１的过度表达使系膜细胞具有糖尿病肾病（ＤＮ）的细胞表型。ＧＬＵＴ１的功能状态直接影响系膜细胞的糖代谢及功能变化。
- 李颖健李颖健刘志红朱加明刘栋黎磊石
- 关键词：肾小球硬化细胞外基质基因转染
- 大黄酸对系膜细胞葡萄糖摄入的影响及其机制被引量：38
- 1999年
- 目的：研究大黄酸对系膜细胞萄萄糖摄入的影响，探讨大黄酸拮抗糖尿病肾脏代谢异常的可能机制。 方法：选用体外培养的小鼠肾小球系膜细胞，葡萄糖摄入及其动力学的测定采用２ｄｅｏｘｙ［３ Ｈ］ Ｄｇｌｕｃｏｓｅ 摄入法，葡萄糖转运蛋白１（ｇｌｕｃｏｓｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ １ ， Ｇ Ｌ Ｕ Ｔ１）ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的检测采用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹。 结果：大黄酸对正常培养条件下系膜细胞的葡萄糖摄入及动力学没有明显影响，对于 Ｔ Ｇ Ｆβ１ 所引起的系膜细胞葡萄糖摄入的异常增加却有明显的抑制作用，其作用呈剂量依赖效应。动力学研究显示 Ｔ Ｇ Ｆβ１ 对系膜葡萄糖摄入 Ｋｍ 和 Ｖｍ ａｘ的影响都可以被大黄酸所拮抗。ｍ Ｒ Ｎ Ａ 检测则表明大黄酸抑制 Ｔ Ｇ Ｆβ１ 增加系膜细胞 Ｇ Ｌ Ｕ Ｔ１ 表达的效应。 结论：大黄酸能通过影响 Ｇ Ｌ Ｕ Ｔ１ 的表达及其对萄萄糖的亲和力，明显抑制 Ｔ Ｇ Ｆβ１ 所引起的系膜细胞萄萄糖摄入的异常增高。
- 章精刘志红李颖健刘浩黎磊石
- 关键词：大黄酸糖尿病肾病GLUT2TGFΒ1
- 己糖胺通路在糖尿病细胞糖代谢异常中的作用被引量：1
- 2000年
- 李颖健刘志红
- 关键词：糖尿病胰岛素抵抗
- 糖尿病肾病分子病因学及其防治的研究
- 刘志红黎磊石郭啸华朱加明李颖健杨俊伟陈朝红陈惠萍周虹王建平
- 糖尿病的发病率在中国正在逐年升高，糖尿病肾病（DN）是导致糖尿病患者死亡的一个重要原因。该课题通过对DN分子发病机理的研究，探索防治该病的新途径。发病机制的研究：①在国际上首次证实人肾小球系膜细胞上存在功能性葡萄糖转运蛋...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病肾病病因学分子病因学疾病防治
- 葡萄糖转运蛋白1在糖尿病肾病发病机制中的作用及大黄酸对其功能的影响
- 该研究由三部分组成:第一部分,葡萄糖转运蛋白1在糖尿病肾病发病机理中的作用,研究人员首先对肾小球系膜细胞上GLUT1的分布及其功能进行了研究.结果表明GLUT1是人肾上球系膜细胞的主要葡萄糖转运蛋白.由于GLUT1对葡萄...
- 李颖健
- 关键词：糖尿病肾病系膜细胞葡萄糖转运蛋白1基因转染纤维连接蛋白大黄酸
- 文献传递
- 人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白的研究被引量：13
- 1999年
- 本文采用了RT-PCR,细胞免疫荧光染色及流式细胞仪分析技术证实人肾小球系膜细胞有GLUT1(glucose transportorl)mRNA和蛋白质的表达。用2-Deoxy[~3H]-D-Glucose摄入法与根皮素抑制实验肯定了系膜细胞上GLUT1的功能及其在系膜细胞葡萄糖摄入中的作用。本项研究为进一步研究系膜细胞GLUT1在糖尿病肾病发病机理中的作用奠定了基础。
- 李颖健刘志红章精陈朝红黎磊石
- 关键词：肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白
