李强
- 作品数:22 被引量:18H指数:2
- 供职机构:延边大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金高等学校学科创新引智计划吉林省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文学医药卫生更多>>
- 过表达DGAT2基因对延边牛前体脂肪细胞分化的影响
- 2023年
- 【目的】探究二酰基甘油酰基转移酶2(DGAT2)对牛前体脂肪细胞分化的影响及其对脂质代谢相关信号通路的调控作用。【方法】利用ADV1穿梭质粒构建包含目的基因的重组穿梭质粒,将重组穿梭质粒与骨架质粒pGP-Ad-Pac载体共转染293A细胞,制得过表达腺病毒载体Ad-DGAT2,用Ad-DGAT2与Ad-NC(阴性对照组)感染牛前体脂肪细胞;用油酸诱导分化96 h后,利用油红O染色观察脂滴生成情况,并检测甘油三酯(TAG)和脂联素(ADP)含量;通过实时荧光定量PCR检测脂肪生成相关基因表达情况;最后对其进行转录组测序,筛选差异表达基因并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。【结果】过表达DGAT 2基因可显著增加脂滴数量及TAG、ADP含量(P<0.05),可显著上调磷酸甘油途径DGAT1、甘油磷酸酰基转移酶4(GPAT4)、酰甘油磷酸酯酰基转移酶4(AGPAT4)以及脂质代谢途径中过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)、脂肪分化相关蛋白(PLIN2)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)和硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)的mRNA表达水平(P<0.05)。转录组测序结果显示,与Ad-NC组相比,Ad-DGAT2感染的前体脂肪细胞中共筛选出110个差异表达基因,其中64个基因上调,46个基因下调。KEGG通路富集分析显示,差异表达基因主要富集在PPAR信号通路、甘油磷脂代谢、脂肪酸生物合成和AMPK信号通路中。【结论】过表达DGAT 2基因可以促进延边牛脂肪细胞中脂滴形成、TAG积累和相关成脂基因的表达,转录组测序筛选出了与脂肪代谢相关的差异表达基因。本研究结果表明DGAT 2基因在前体脂肪细胞分化过程中发挥了重要调控作用,为延边牛的分子育种提供了重要的理论依据。
- 郭盼盼李强李香子严昌国金鑫
- 关键词:甘油三酯前体脂肪细胞过表达
- 延边黄牛臀肉与眼肉组织非靶向代谢组学比较分析被引量:1
- 2023年
- 从非靶向代谢组学角度分析延边黄牛臀肉与眼肉组织代谢物谱的差异。试验以6头同月龄、同生长条件的延边黄牛屠宰后的臀肉和眼肉为试验材料,利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对代谢物进行分离,利用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等统计方式对数据进行分析。结果表明:试验筛选出差异代谢通路,分别为苯丙氨酸代谢通路,乙醛酸和二羧酸代谢通路,磷酸戊糖途径通路,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢通路,精氨酸和脯氨酸代谢通路,嘌呤代谢通路。臀肉组与眼肉组的差异代谢物单变量统计分析(UVA),筛选出差异代谢物20种,其中11种差异代谢物发生上调(P<0.05),9种差异代谢物发生下调(P<0.05)。综上,非靶向代谢组学分析揭示,臀肉与眼肉在代谢水平上存在显著差异,油酸等差异代谢物将作为风味化合物的前体物质进而影响风味。
- 孙斌崔岩王伟利唐琳王英李强李香子
- 关键词:延边黄牛代谢组学
- 基于转录组测序的油酸诱导延边牛骨骼肌卫星细胞成脂分化差异表达基因的分析
- 2021年
- 本研究旨在研究油酸(OA)引起延边牛骨骼肌卫星细胞成脂分化途径的分子调控机制。对从12日龄延边牛中分离得到的骨骼肌卫星细胞进行体外培养,加入不同浓度OA的诱导分化培养液,进行分化处理,试验设1个空白对照组[CON组,5%马血清(HS)],3个不同浓度OA诱导组:OAL组(5%HS+50μmol/L OA)、OAM组(5%HS+100μmol/L OA)、OAH组(5%HS+200μmol/L OA),诱导96 h后,对延边牛骨骼肌卫星细胞进行了转录组测序及分析。结果表明:共得到13951条单基因,对4个组差异表达基因进行比较发现,与CON组相比,OAL组有3412个差异表达基因,OAM组有1045个差异表达基因,OAH组有1428个差异表达基因,各组之间共有278个差异表达基因。GO富集分析显示,差异基因参与了多种生物过程,包括代谢过程、细胞过程、生物调节过程等;在分子功能类别上,大多数的基因功能与结合活性、转录调节活性、催化活性等相关;在细胞组分范畴内,大部分的基因被富集到细胞、细胞器、膜等。KEGG富集分析表明,差异表达基因主要富集通路为单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、脂肪酸代谢通路、脂肪酸降解通路等。不同浓度OA差异基因荧光定量PCR结果显示,所选的5个差异基因与转录组测序结果基本一致,表明了测序结果的可靠性。本试验完成了OA诱导延边牛骨骼肌卫星细胞成脂分化的转录组测序分析,获取差异基因的功能注释信息,初步揭示了OA诱导牛骨骼肌卫星细胞成脂分化的潜在基因和通路。
- 孙建富孙斌张军芳王英崔岩李强CHOI Seong HSHIN Jong S李香子
- 关键词:转录组测序成脂分化
- 关于《梦圆大地:袁隆平传》的汉朝翻译实践报告(1)
- 李强
- 重症肌无力抗乙酰胆碱受体单链抗体A7基因真核表达载体的构建
- 重症肌无力(myastheniagravis,MG)是抗乙酰胆碱受体(acetylcholinereceptor,AchR)抗体介导的器官特异性自身免疫病。AchR是由α2βγδ五个同源亚单位组成的跨膜糖蛋白,MG患者血...
- 李强
- 关键词:重症肌无力单链抗体真核表达载体抗乙酰胆碱受体
- 文献传递
- 运河城市与话本研究——以两宋都城为考察对象
- 文章以宋话本为研究对象,从运河城市这一角度来探讨其与宋代运河都市——东京汴梁和临安的密切关系:一方面,宋代运河城市东京汴梁与临安对宋话本的产生、发展和传播产生了重要的影响,另一方面,宋话本所描绘的大量的城市图景,是运河之...
- 李强
- 关键词:文学创作艺术价值
- 文献传递
- 顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质被引量:4
- 2022年
- 为探究延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质,以6头同一月龄、同一生长条件的延边牛屠宰后的臀肉、眼肉、上脑、里脊、脊肋排和牛腩6个部位为材料,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用对其挥发性风味物质进行检测,通过峰面积归一法确定各成分的相对含量,确定不同部位肌肉关键性挥发性风味物质。结果表明:共检测出醛类、醇类、酮类、烷烃类、酯类、胺类和烯烃类共79种挥发性化合物,其中脊肋排29种、里脊40种、上脑28种、臀肉25种、牛腩29种、眼肉35种;6个部位间挥发性化合物的种类及含量存在明显差异,与其他部位相比,牛腩中醛类和胺类化合物的相对含量最高,里脊的酯类与醇类化合物相对含量最高,脊肋排的烯烃类与烷烃类化合物相对含量最高,酮类化合物并没有在脊肋排中被检测到,臀肉中富含较多的酮类化合物。
- 孙斌崔岩盛万里张军芳唐琳王恩泽王英李强李香子
- 关键词:延边牛风味物质气相色谱-质谱联用
- 延边牛UCP1基因CDS区克隆、生物信息学分析及组织mRNA表达被引量:2
- 2021年
- 旨在克隆延边牛解偶联蛋白-1(UCP1)CDS区序列,利用RT-PCR技术和基因克隆获得延边牛UCP1基因,与其他物种进行同源性比对及构建系统进化树,利用生物信息学方法预测UCP1编码蛋白质的理化性质、潜在的磷酸化位点等性质,利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)方法检测UCP1基因在延边牛不同组织的表达丰度。结果显示,延边牛UCP1基因的CDS区全长749 bp,编码249个氨基酸。同源性比对发现延边牛UCP1基因与印度牛同源性为99.47%,系统进化树表明,延边牛与印度牛的亲缘关系最近,和南美羊驼亲缘关系最远。UCP1蛋白缺乏稳定性,脂溶系数是91.53,网状红细胞于体外的半衰期是30 h,总平均亲水性等于0.212,预测其具备一定亲水性。二级结构由α-螺旋(54.03%)、延伸链(12.90%)、无规卷曲(27.42%)和β-转角(5.65%)构成的混合型蛋白。磷酸化位点和糖基化位点分析结果表明,UCP1共有21个磷酸位点,4个潜在的O-糖基化位点,3个N-糖基化潜在位点。UCP1基因的编码产物无跨膜螺旋(TMHs)结构,跨膜螺旋氨基酸残基数量的预测值为19.00857,蛋白质前60个氨基酸的跨膜螺旋数预测值为10.98009,位于膜细胞质侧的总概率为22.995%且属于非分泌蛋白。经实时荧光定量PCR(RT-PCR)可知,延边牛脂肪与小肠内UCP1基因表达水平相对较高,而在肌肉、心脏中的表达水平较低。该试验结果可为进一步研究该基因的功能提供借鉴。
- 孙斌唐琳张军芳孙建富崔岩王英王恩泽李强李香子
- 关键词:延边牛克隆生物信息学
- 间充质干细胞在畜牧业中应用研究进展
- 2024年
- 干细胞是一类拥有强大增殖再生潜能的多能细胞,能够调节体内各项机能且免疫原性较低,在畜牧领域中有着巨大的应用潜力。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多能细胞,拥有干细胞的所有共性,且具有来源广泛,易于分离、道德和法律约束性低等特点,从基础研究逐步推进到临床应用阶段。MSCs通过迁移和旁分泌机制在体内发挥调控作用,如抵抗病原入侵,稳定免疫反应,减少细胞应激、促进组织再生等。然而,不同组织来源的MSCs生物学特性存在差异,其表面标记物是鉴别的重要依据。现阶段,MSCs的相关研究从人和宠物领域逐渐向畜牧业拓展,在牛、马等大动物体内也展现出强大的应用潜力。凭借其抗炎修复能力,可有效保护动物机体,促进疾病预后,提升动物的经济价值。但由于相关研究还不够深入,许多问题未能得到解决,使得大规模应用受到限制。为进一步提高MSCs的应用潜力,加快由实验室向实际应用的转化,细胞培养、基因编辑以及生物材料等领域的研究也在不断拓展。为此,作者通过系统梳理相关文献,介绍了MSCs来源、特性及作用机制,总结了其在畜牧领域的研究进展和应用潜力,以期为MSCs在畜牧业中的应用提供新思路。
- 季新澎金诗宇滕海龙周禹泽李香子高旭李强
- 关键词:间充质干细胞免疫调节炎症
- 不同浓度油酸对延边牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响
- 2021年
- 试验旨在探究油酸对延边牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响。试验设1个空白对照组(CON)和3个油酸(OA)诱导组:50、100、200μmol/L油酸组(OAL、OAM、OAH)。油酸诱导96 h后,通过测定细胞大小及活力评估油酸对细胞的影响。通过油红O染色和测定甘油三酯来验证脂滴的形成,通过实时荧光定量PCR测定相关成肌成脂基因的表达水平来验证脂肪细胞的生成。结果显示,与对照组相比,添加油酸后,延边牛骨骼肌卫星细胞内有脂滴生成,并且脂滴形成量、甘油三酯累积量与油酸呈剂量依赖关系;实时荧光定量PCR测定结果表明,成肌相关因子Pax3、MyoD显著下调(P<0.05),成脂相关因子C/EBPβ、PPARγ显著上调(P<0.05),脂肪酸代谢相关因子SCD显著下调(P<0.05),PLIN2基因显著上调(P<0.05)。综合上述试验结果,用油酸诱导处理延边牛骨骼肌卫星细胞可促进细胞的成脂转分化。
- 孙建富张军芳孙斌王英崔岩李强CHOI Seong HSHIN Jong S李香子
- 关键词:油酸延边牛骨骼肌卫星细胞成脂