张芙蓉 作品数:15 被引量:27 H指数:4 供职机构: 大连市友谊医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省教育厅科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
大连、沈阳两地须癣毛癣菌复合体的分子鉴定及DNA分型 2012年 目的探讨大连和沈阳两地须癣毛癣菌复合体的主要组成菌种及主要组成菌种肉芽肿株和体癣株DNA分型有无差异。方法选取大连和沈阳地区已行表型鉴定的须癣毛癣菌16株(12株体癣株,4株肉芽肿株),通过PCR扩增核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS),测序后利用数据库进行序列比对,对须癣毛癣菌复合体进行鉴定;PCR扩增rDNA非转录间隔区(NTS)的3个串联重复亚单位S0,S1和S2区,进行种内分型,比较菌株间型别的差异性。结果大连、沈阳两地的16株须癣毛癣菌中,2株鉴定为断发毛癣菌,1株鉴定为苯海姆节皮菌,13株鉴定为万博节皮菌;3对不同引物扩增13株万博节皮菌NTS区,共产生8种特征性带型;万博节皮菌的体癣株和肉芽肿株的带型除S2区外,在S0,S1区及总区间均有差异。结论大连、沈阳两地须癣毛癣菌复合体的主要组成菌种为万博节皮菌;万博节皮菌肉芽肿株和体癣株NTS区的带型有差异。 王静 张芙蓉 杨国玲头癣发病机制的研究进展 被引量:2 2016年 头癣是一种常见的浅部真菌感染性疾病,多发生于儿童。大量流行病学资料显示其发病率逐年上升。由于头癣愈后可形成萎缩性瘢痕或永久性秃发,严重影响患者的身心健康,因此明确头癣发病机制意义重大。目前头癣的发病机制尚不清楚,国内尚无系统的相关研究综述。该文针对头癣发病机制国内外相关研究成果,从镜下真菌-头发形态学变化、头癣与蛋白酶、头癣与宿主免疫等方面详细介绍最新研究动态。 张芙蓉 杨国玲关键词:头癣 发病机制 扫描电镜 蛋白酶 犬小孢子菌丝氨酸水解酶家族1蛋白的亚细胞定位分析 2020年 目的对丝氨酸水解酶家族1(FSH1)蛋白在犬小孢子菌中进行亚细胞定位分析。方法以前期构建的犬小孢子菌FSH1质粒及载体pCAMBIA-LRP-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为模板,PCR扩增FSH1基因及EGFP基因;同时利用SnaBI/KpnI对pCAMBIA-LRP-EGFP质粒双酶切获得载体DNA,将扩增的EGFP基因克隆至酶切好的载体DNA中获得EGFP表达载体;将扩增的FSH1基因及EGFP基因克隆至酶切好的载体DNA中获得融合载体Ptrcp-FSH1-EGFP-Ttrcp。通过根癌农杆菌介导的遗传转化方法,用重组质粒转化犬小孢子菌,使融合基因FSH1-EGFP在真菌通用启动子(Ptrpc)和终止子(Ttrpc)调控下在犬小孢子菌中整合型表达,利用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的细胞定位。结果成功构建根癌农杆菌转化系统及犬小孢子菌EGFP表达载体;融合基因FSH1-EGFP在犬小孢子菌中获得整合型表达。激光共聚焦显微镜显示FSH1-EGFP融合蛋白的荧光信号呈颗粒状或团块状集中于犬小孢子菌的细胞质及细胞核中。结论FSH1-EGFP融合蛋白成功定位于犬小孢子菌的细胞质及细胞核中,为进一步明确犬小孢子菌FSH1基因的功能及致病机制奠定了基础。 张芙蓉 郭春梅 谭灿 刘洋 徐宇 杨国玲关键词:小孢子菌属 绿色荧光蛋白质类 犬小孢子菌 亚细胞定位 CRKⅡ对慢性粒细胞白血病K562细胞恶性行为的影响 2021年 作为信号接头蛋白CRK家族成员之一,CRKⅡ参与细胞的增殖、存活、黏附、迁移、分化,但CRKⅡ与白血病的关系及作用机制尚不清楚。采用qRT-PCR(quantitative real-timePCR)检测CRKⅡ在正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本、慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)初发患者骨髓样本、CML完全缓解(complete remission,CR)患者骨髓样本中的表达情况;CRKⅡ小干扰序列瞬时转染K562细胞,获得CRKⅡ表达下调的K562细胞株,Western blot和qRT-PCR检测CRKⅡ干扰效率;CCK8检测CRKⅡ下调对K562细胞增殖能力的影响;Transwell小室检测CRKⅡ下调对K562细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测CRKⅡ下调对K562细胞中信号通路关键分子p130Cas、Rac1表达水平的影响。与正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本相比,CRKⅡ在CML初发患者骨髓样本中表达水平升高,同时在4对CML初发-CR配对样本中,患者完全缓解后CRKⅡ表达水平降低;在K562细胞中CRKⅡ表达被有效沉默;CRKⅡ下调抑制K562细胞的增殖、迁移、侵袭能力。初步分子机制研究发现,CRKⅡ通过激活p130Cas/DOCK180/Rac1通路调节K562细胞的恶性行为。CRKⅡ在CML发生、发展中起着重要的作用,作为肿瘤促进剂影响CML细胞的恶性行为,可作为CML诊断、治疗的新靶点。 郭春梅 张秋玲 张芙蓉 刘淑清 孙明忠关键词:慢性粒细胞白血病 基于16SrDNA及ITS高通量测序分析甲真菌病病甲微生物群落的变化 2023年 目的比较甲真菌病患者病甲与健康甲细菌和真菌微生物菌群差异。方法收集2020年8月至2021年6月于大连市皮肤病医院门诊就诊的31例甲真菌病患者的病甲及健康甲的甲屑样本,提取甲屑菌群总DNA,以细菌16S rDNA的V3-V4区序列及真菌内转录间隔区(ITS)作为目标序列进行基因扩增及Illumina测序,对所测序列采用USEARCH和mothur软件进行OTU聚类分析,采用Wilcoxon rank sum test方法进行α多样性分析,采用相似性分析(Anosim)进行β多样性分析,采用LEFSe方法进行物种差异分析。结果入组甲真菌病患者31例,男16例,女15例,按年龄分青年组(18~35岁)10例,中年组(36~60岁)11例,老年组(大于60岁)10例。α多样性分析显示,病甲组标本Shannon指数明显低于健康甲组(W=290,P=0.007),而Simpson指数明显高于健康甲组(W=663,P=0.010),病甲组细菌菌群的多样性及均匀度低于健康甲组,病甲在真菌菌群的多样性与健康甲无明显区别。β多样性分析显示,基于unweighted-unifrac距离矩阵分析结果,病甲组与健康甲组细菌和真菌微生物的组成差异无统计学意义(细菌菌群:R=0.0052,P=0.331;真菌菌群:R=0.0036,P=0.337);基于weighted-unifrac距离矩阵分析结果,病甲组与健康甲组在细菌菌群及真菌菌群的丰度方面差异均有统计学意义(均P=0.001)。在物种组成上,病甲组较健康甲组丰度显著降低的细菌菌群有拟杆菌门及变形菌门、β-变形菌纲、伯克氏菌目、罗尔斯顿菌属、鞘氨醇单胞菌属、链球菌属,而芽孢杆菌纲、芽孢杆菌目、葡萄球菌属明显高于健康甲组。病甲组显著升高的真菌菌群有散囊菌纲、爪甲团囊菌目、未分类锤舌菌目、关节皮肤真菌科、黑团孢属、白粉菌属、铁艾酵母属、毛癣菌属、十字花科白粉菌、红色毛癣菌、合轴马拉色菌,而酵母菌纲-酵母菌目-酵母菌科、隐囊菌科、念珠菌、链格孢菌较健康甲组显著降低。结论甲真菌病 张芙蓉 郭春梅 刘新勇 王华 杨国玲关键词:甲癣 微生物群落 内转录间隔区 宏基因组学技术在皮肤病研究中的应用进展 2017年 宏基因组学(metagenomic)又称环境基因组学(environmental genomics),指不依赖培养直接从微生物的天然环境中提取微生物基因的遗传物质,对微生物群体进行研究分析,最大限度地挖掘微生物资源。传统的微生物群落检测主要依靠培养,但是菌群的种类多,99.9%培养不成功,且不同的菌种生长的条件和速度不一, 张芙蓉 徐宇 刘洋 杨国玲关键词:组学技术 皮肤病 微生物群体 微生物群落 利用抑制消减杂交初步构建犬小孢子菌在不同诱导底物表达的差异基因文库 被引量:6 2009年 目的比较犬小孢子菌在儿童与成人头皮组织、儿童头皮组织与儿童光滑皮肤组织为诱导底物表达的差异基因,探讨犬小孢子菌蛋白酶在头癣中的发病机制。方法将犬小孢子菌菌株分别接种于含儿童光滑皮肤组织(driver1)、儿童头皮组织(tester)和成人头皮组织(driver2)三种底物诱导培养基中培养,经抑制消减杂交技术(SSH)分别构建在tester与driver1,tester与driver2培养基中培养的犬小孢子菌菌株正反向差异基因文库,菌液PCR筛选鉴定,对阳性克隆进行测序分析。结果在tester与driver1的正向差异基因文库中初步筛选出1个差异表达基因与编码红色毛癣菌线粒体细胞色素b和NADH1-5具有高度同源性,另15个差异表达基因在真菌界均未知。结论应用SSH技术成功构建了不同底物诱导培养基犬小孢子菌表达的差异基因文库;这个与编码红色毛癣菌线粒体细胞色素b和NADH1-5具有高度同源性的差异表达基因,可能在犬小孢子菌所致头癣中起一定作用,进一步研究该基因的功能对研究头癣的发病机制具有重要意义。 张芙蓉 张振颖 杨国玲 金礼吉关键词:犬小孢子菌 头癣 抑制消减杂交 蛋白酶 穴位注射联合药物治疗难治性慢性荨麻疹的疗效观察 被引量:5 2020年 目的观察穴位注射联合药物治疗难治性慢性荨麻疹的临床疗效。方法选取2018年12月—2019年12月在我院皮肤科门诊就诊的慢性荨麻疹患者,共30例(男18例,女12例),入选病例均为使用多种治疗方法治疗至少1个月,疗效不佳的患者。采用维生素B12注射液于足三里穴及三阴交穴交替注射,1次/d,连续治疗10 d,联合口服抗组胺药枸地氯雷他定片5 mg/次,1次/d,维生素C 0.1 g/次,3次/d,停药3 d后,未痊愈患者继续第2个疗程。评估治疗前后荨麻疹的临床症状及体征的改善情况。结果30例患者经治疗第1疗程及第2疗程的荨麻疹活动度评分(UAS)评分治疗前后差异有统计学意义(t分别为21.23、15.90,均P<0.001);无明显不良反应,随访复发率为17.64%(3例/17例)。结论穴位注射联合药物治疗能显著改善慢性难治性荨麻疹患者的临床症状和体征,不良反应轻微,值得临床推广应用。 李敬波 刘欣 张芙蓉关键词:慢性荨麻疹 难治 穴位注射 新生儿红斑狼疮15例临床分析及文献回顾 被引量:5 2021年 目的探讨新生儿红斑狼疮的临床特点并进行文献回顾。方法回顾性分析徐州市儿童医院15例新生儿红斑狼疮患儿的临床资料,对新生儿红斑狼疮的临床特点进行分析总结,并进行随访。结果 15例患儿中女11例,男4例,就诊年龄8 d~3个月。皮损位于头面部14例,位于非曝光部位8例;皮损表现为水肿性红斑样13例,表现为脂溢性皮炎2例;并发房室传导阻滞1例;4例患儿母亲患有干燥综合征,无临床症状11例。抗核抗体比值1:100~1:1 600,所有患儿SSA和(或)SSB阳性。结论新生儿红斑狼疮具有表型变异性,遇到可疑患儿及时进行心电图及自身免疫抗体检测,确诊后应长期随访。 王静 尹瑞瑞 张芙蓉Majocchi肉芽肿研究进展 被引量:2 2020年 皮肤癣菌是一类寄生于人及动物皮肤浅层角蛋白组织的丝状真菌,其具有亲角质性,感染一般局限于人与动物的浅部组织,如皮肤角质层、指甲和毛发,而不向真皮、皮下组织等深部组织发生侵袭感染[1]。随着免疫抑制剂、糖皮质激素等广泛应用,局部外伤、放疗、糖皮质激素类药物长期外用以及糖尿病、艾滋病等患者增多,皮肤癣菌可逃避免疫监视入侵真皮及皮下组织,严重者可出现多脏器侵袭及播散,导致深部感染的患者日渐增多[2-6]。Majocchi肉芽肿作为皮肤癣菌深部感染的一种[7],临床少见,且症状不典型,在易感因素缺乏的条件下,易出现误诊漏诊的现象,使患者预后出现疤痕、秃发及因感染导致疼痛等严重影响,即使治愈也有复发的可能。本文就Majocchi肉芽肿研究进展综述如下。 李敬波 徐宇 张芙蓉关键词:皮肤癣菌 深部感染 发病机制