张春敏 作品数:10 被引量:7 H指数:2 供职机构: 重庆医科大学附属儿童医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
骨髓间充质干细胞肿瘤微环境直接培养模型构建及其生物学特性分析 目的: 通过构建SD大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derivedmesenchymal stem cells,BMSCs)与大鼠来源C6脑胶质瘤细胞直接共培养模型,探讨BMSCs与C6脑胶质瘤细胞直接共... 张春敏关键词:骨髓间充质干细胞 肿瘤微环境 生物学特性 肿瘤微环境下SIL-6R/GP130与MSCs瘤向转化的相关性研究 目的 通过体外构建模拟的肿瘤微环境,探讨在肿瘤微环境下SIL-6R及GP130的过度激活和表达对骨髓间充质干细胞(MSCs)向肿瘤方向转化的影响.方法 采用transwell插入式培养皿结合6孔板构建间接共培养体系来模拟... 崔向荣 白璐 张春敏 刘建平 朱静关键词:肿瘤微环境 骨髓间充质干细胞 SIL-6R GP130 肿瘤微环境下STAT3及P-STAT3的过度表达和激活于MSCs瘤样转化的作用 目的 探讨在体外模拟肿瘤微环境的情况下,骨髓间充质干细胞(MSCs)中STAT3的过度表达和激活对其恶性转变的影响.方法 通过MSCs分别与C6胶质瘤及星型胶质细胞间接共培养来构建MSCs生长的模拟微环境,应用RT-QP... 崔向荣 白璐 张春敏 刘建平 朱静关键词:STAT3 P-STAT3 肿瘤微环境 骨髓间充质干细胞 C6胶质瘤微环境中大鼠BMSCs恶性转变与NF-κB高表达的相关性 被引量:4 2014年 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在C6胶质瘤微环境中是否存在NF-κB和STAT3的激活及高表达以及其与BMSCs恶性转变的关系。方法本实验共分4组:实验组(C6与BMSCs间接共培养空白)、空白对照组(BMSCs单独培养)、阴性对照组(大鼠星形胶质细胞与BMSCs间接共培养)、阳性对照组(C6单独培养)。采用流式细胞术鉴定BMSCs;ELISA检测细胞上清液中IL-6水平;RT-QPCR检测细胞中NF-κB P65、STAT3、c-Myc的mRNA的表达;Western blot及免疫荧光法检测细胞中NF-κB P65、STAT3、P-STAT3、c-Myc蛋白表达及定位。结果第三代骨髓间充质干细胞CD29、CD90均呈阳性表达,CD45呈阴性表达;实验组BMSCs与对照组相比细胞形态发生显著改变,核质比增大;实验组细胞上清液IL-6水平高于阴性对照组(P<0.05);实验组NF-κB P65、c-Myc在mRNA及蛋白水平显著高于阴性对照组,且STAT3磷酸化水平显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论 BMSCs处在C6胶质瘤微环境中存在NF-κB和STAT3的激活和高表达,且NF-κB的激活及高表达是BMSCs恶性转变的重要因素之一。 燕莎 朱静 田杰 张春敏 谭彬 崔建邦 杨春梅关键词:核转录因子-ΚB 骨髓间充质干细胞在肿瘤微环境中发生瘤性转化研究 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有多项分化潜能和自我更新能力等特质,广泛应用于组织细胞的替代治疗,有望成为肿瘤靶向治疗的载体,因此MSCs的安全使用是一个至关重要的问题。本文将... 张春敏 白璐 崔向荣 燕莎 崔建邦 尹耐靖 朱静关键词:MSCS 肿瘤微环境 STAT3特异性抑制剂STA-21对乳腺癌MCF-7B细胞增殖及凋亡的影响 2013年 目的:探讨信号传导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)特异性抑制剂STA-21对乳腺癌MCF-7B细胞增殖及凋亡的影响。方法:空白组为单独培养MCF-7B细胞,实验组采用不同浓度STA-21作用于乳腺癌MCF-7B细胞后,用MTT法观察STA-21对MCF-7B细胞生长抑制的作用;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;Westernblot检测MCF-7B细胞P-STAT3、STAT3、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、Bcl-xl蛋白的表达。结果:MCF-7B细胞经各浓度STA-21(10、30、50μmol/L)作用后,其细胞增殖的抑制率及细胞凋亡率较空白组明显增加(P=0.000);流式细胞仪检测发现STA-21可导致MCF-7B细胞阻滞于G1期;Western blot结果显示与空白组相比,STA-21可降低MCF-7B细胞P-STAT3、CyclinD1、Bcl-xl蛋白的表达(P=0.000),但对STAT3蛋白的表达基本无影响(P=0.367)。结论:STA-21可在一定程度上抑制MCF-7B细胞的增殖及促进凋亡,其作用机制可能与抑制STAT3活性有关。 白璐 朱静 田杰 崔向荣 张春敏 尹耐靖白藜芦醇对规避肿瘤微环境中骨髓间充质干细胞瘤样转化的影响 目的 本研究拟通过药物干扰来明确白藜芦醇(Resveratrol)是否可降低肿瘤微环境下MSCs瘤样转化的风险,进而为规避MSCs的恶性转化提供科学依据,使其更加安全地应用于临床.方法 取Wistar大鼠的股骨和胫骨骨髓... 白璐 崔向荣 张春敏 刘建平 朱静关键词:肿瘤微环境 规避 Islet-1促MSCs心肌特化过程中Nkx2.5启动子区域DNA甲基化水平变化 被引量:2 2014年 目的:研究Islet-1诱导C3H10T1/2细胞定向分化为心肌样细胞过程中表达增加的心肌早期发育相关基因Nkx2.5启动子区域DNA甲基化水平的变化情况。方法:高表达Islet-1基因的慢病毒载体转染间充质干细胞C3H10T1/2,免疫荧光检测Islet-1表达情况,在Nkx2.5表达达高峰的时间点,通过甲基化特异性PCR技术检测其启动子区域DNA甲基化水平,比较C3H10组(空白对照组)、阴性对照组(转染慢病毒空载体)和实验组(转染高表达Islet-1基因的慢病毒载体)上述基因启动子区域的DNA甲基化水平。结果:实验组Nkx2.5基因启动子区域DNA甲基化水平低于其他两组(均P<0.05)。结论:高表达Islet-1促C3H10T1/2细胞特异性向心肌细胞方向分化过程中,心肌早期发育相关基因启动子区域DNA甲基化水平降低,促进其表达增加。 尹耐靖 杨春梅 谭彬 张春敏 燕莎 崔建邦 田杰 朱静关键词:DNA甲基化 心肌细胞 体外模拟肿瘤微环境中致大鼠MSCs瘤化相关因子分析 目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外模拟的肿瘤微环境中是否受到其中过度表达的致瘤性酪氨酸激酶信号分子的影响而发生恶性转化,为安全有效地利用MSCs提供一定的前期理论基... 刘建平 崔向荣 白璐 张春敏 朱静关键词:骨髓间充质干细胞 肿瘤微环境 恶性转化 骨髓间充质干细胞在C6脑胶质瘤细胞微环境中瘤性转化的生物学分析 被引量:3 2014年 目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在C6脑胶质瘤细胞微环境中是否发生了生物学特性的改变。方法:全骨髓贴壁筛选法分离培养SD大鼠BMSCs,免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测BMSCs表面标志分子CD90+、CD105+、CD45-;活细胞荧光染料CM-Dil标记BMSCs(CM-Dil+BMSCs),流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测标记效率,台盼蓝染色法连续监测BMSCs死亡率;CM-Dil+BMSCs与C6脑胶质瘤细胞直接接触共培养为直接共培养组,BMSCs与C6脑胶质瘤细胞非接触共培养为间接共培养组,阳性对照组为C6脑胶质瘤细胞单独培养,阴性对照组为BMSCs单独培养,培养7 d后,IF法检测各组酸性胶质纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、CD90、CD105表达情况;FCM分选实验组CM-dil+BMSCs和C6脑胶质瘤细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各组GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1、CD90、CD105基因的表达。结果:①培养至第3代的BMSCs 90%以上表达CD90、CD105且不表达CD45;②IF结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞表达GFAP水平较阴性对照组BMSCs均增高。③RT-qPCR结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1基因表达水平较阴性对照组BMSCs明显增高(P<0.05),且直接共培养组与间接共培养组比较无明显差异(P>0.05);同时,直接共培养组、间接共培养组BMSCs的CD90、CD105基因表达水平较阴性对照组BMSCs显著降低(P<0.05)。结论:BMSCs在C6脑胶质瘤细胞微环境中存在潜在瘤性转化的倾向。 张春敏 朱静 燕莎 崔建邦关键词:骨髓间充质干细胞