刘建平
- 作品数：15 被引量：28H指数：4
- 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 肿瘤微环境中过表达的IL-6对大鼠间充质干细胞恶性转化的影响被引量：10
- 2012年
- 目的分析肿瘤微环境中异常高表达的白介素6(IL-6)是否可导致间充质干细胞(MSCs)的恶性转化。方法 ELISA法检测肿瘤微环境与正常微环境中IL-6的表达差异。以肿瘤微环境中相应水平IL-6处理的MSCs为实验组,正常微环境中相应水平IL-6处理的MSCs作为正常对照组。采用免疫荧光法检测各组STAT3蛋白表达情况;通过细胞生长曲线观察各组MSCs增殖能力的变化;采用免疫荧光定量PCR和Western blotting检测p53和MDM2的蛋白及mRNA表达变化;通过裸鼠成瘤实验检测各组MSCs的体内成瘤能力。结果肿瘤微环境中IL-6的表达量为191.23±16.80pg/ml,明显高于正常微环境(0.82±0.12g/ml,P<0.01)。实验组90%±7%的MSCs表达STAT3蛋白,主要集中于细胞核,为激活状态,而对照组未检测到STAT3表达。细胞生长曲线显示,2个月后实验组MSCs生长接触抑制减弱。细胞培养2个月后,与对照组比较,实验组p53蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.01),MDM2蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05)。实验组MSCs培养2个月后,接种裸鼠皮下可形成肿瘤,而对照组接种后未见肿瘤形成。结论肿瘤微环境中过表达的IL-6具有促进MSCs恶性转化的作用。
- 刘建平朱静田杰刘官信鲁荣林建萍
- 关键词：间质干细胞白细胞介素6肿瘤微环境
- 肿瘤微环境下SIL-6R/GP130与MSCs瘤向转化的相关性研究
- 目的 通过体外构建模拟的肿瘤微环境，探讨在肿瘤微环境下SIL-6R及GP130的过度激活和表达对骨髓间充质干细胞(MSCs)向肿瘤方向转化的影响.方法 采用transwell插入式培养皿结合6孔板构建间接共培养体系来模拟...
- 崔向荣白璐张春敏刘建平朱静
- 关键词：肿瘤微环境骨髓间充质干细胞SIL-6RGP130
- 小鼠Islet-1基因慢病毒表达载体的构建及其诱导C_3H_(10)T1/2细胞向心肌样细胞特异性分化被引量：8
- 2011年
- 目的研究Islet-1对干细胞分化的影响。方法用PCR钓取目的基因,将目的基因与pLenO-WPI载体连接,选取阳性质粒,与辅助质粒共同感染293T细胞生产出慢病毒载体。感染C3H10T1/2细胞,实时荧光定量PCR及Western blot检测Islet-1和心肌、肝脏、骨骼及神经各系统相关标志物的表达,免疫荧光检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达部位。结果 PCR及测序显示目的片段正确插入,实验组有Islet-1表达;心肌早期发育相关基因GATA-4、MEF2C、NKx2.5在检测到荧光蛋白1周后升高,2周到达高峰,3周后可检测到心肌特异性蛋白cTnT(0.582±0.0576),其时序性表达呈随时间增强趋势;cTnT表达于胞质;肝脏系统特异性标志AFP及ALB、骨骼系统特异性标志BGP及BALP、神经系统特异性标志Nestin及GFAP均未表达。结论 Islet-1具有特异性促进干细胞向心肌样细胞分化的作用。
- 智深深田杰刘官信鲁荣林建萍刘建平朱静
- 关键词：慢病毒表达载体心肌样细胞
- 肿瘤微环境下STAT3及P-STAT3的过度表达和激活于MSCs瘤样转化的作用
- 目的 探讨在体外模拟肿瘤微环境的情况下，骨髓间充质干细胞(MSCs)中STAT3的过度表达和激活对其恶性转变的影响.方法 通过MSCs分别与C6胶质瘤及星型胶质细胞间接共培养来构建MSCs生长的模拟微环境，应用RT-QP...
- 崔向荣白璐张春敏刘建平朱静
- 关键词：STAT3P-STAT3肿瘤微环境骨髓间充质干细胞
- Islet-1在乙酰化调控网络中特异性辅助C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化被引量：4
- 2012年
- 目的筛选并分析转染Islet-1慢病毒载体的C3H10T1/2细胞转化为心肌样细胞过程中与Islet-1相互作用的组蛋白乙酰化酶(HATs)和组蛋白去乙酰化酶(HDACs),明确Islet-1在C3H10T1/2细胞分化为心肌样细胞乙酰化调控网络中的关键枢纽作用。方法培养转染Islet-1慢病毒载体的C3H10T1/2细胞,观察细胞形态。免疫荧光和免疫印迹检测Islet-1的表达部位和最高表达时间点。免疫共沉淀与Islet-1结合的蛋白。免疫印迹验证Islet-1相互作用的HATs和HDACs。结果诱导组细胞形态出现心肌样细胞改变。各组Islet-1主要在胞质表达。诱导组Islet-1表达量在诱导后3周最高(0.782±0.015)。诱导组Islet-1表达量显著高于空白对照组和C3H10组(分别为0.819±0.026,0.127±0.006和0.126±0.001)(P<0.05),免疫共沉淀技术可行。与Islet-1相互作用的HATs和HDACs有GCN5、P300/CBP和HDAC4。结论 Islet-1与GCN5、P300/CBP和HDAC4相互作用特异性辅助C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化。
- 林建萍田杰刘官信鲁荣刘建平智深深朱静
- 关键词：C3H10T1/2细胞心肌样细胞组蛋白乙酰化
- 体外模拟肿瘤微环境中致大鼠MSCs瘤化因子分析被引量：4
- 2012年
- 目的探讨模拟肿瘤微环境中骨髓间充质干细胞(MSCs)肿瘤转化的发生与肝细胞生长因子、白介素6、碱性成纤维生长因子的关系。方法实验组为C6胶质瘤与MSCs间接共培养模拟肿瘤微环境下MSCs的生长,对照组为星型胶质细胞与MSCs间接共培养模拟正常微环境下MSCs的生长,空白对照组MSCs单独培养;荧光定量聚合酶链反应,免疫荧光检测各组的P53和MDM2的基因和蛋白的表达;ELISA检测各组HGF、IL-6、BFGF的表达;免疫荧光检测对应升高的细胞因子作用于MSCs后的STAT3蛋白的表达。结果实验组的MSCs形态肿瘤化;MSCs的MDM2 mRNA相对表达量是1.56±0.21,显著高于对照组(P<0.05),MDM2蛋白表达率比对照组升高90%±7%(P<0.01);MSCs的P53的mRNA相对表达量是0.55±0.10,而P53突变蛋白表达率比对照组升高87%±5%(P<0.01);HGF、IL-6水平比对照组中表达水平升高(P<0.05);过量IL-6处理组的MSCs的STAT3激活蛋白表达率比正常量IL-6处理组明显升高(P<0.01)。结论 IL-6参与MSCs在肿瘤微环境下的肿瘤转化的发生。
- 刘建平朱静田杰刘官信林建萍鲁荣
- 关键词：肿瘤微环境骨髓间充质干细胞
- 白藜芦醇对规避肿瘤微环境中骨髓间充质干细胞瘤样转化的影响
- 目的 本研究拟通过药物干扰来明确白藜芦醇(Resveratrol)是否可降低肿瘤微环境下MSCs瘤样转化的风险,进而为规避MSCs的恶性转化提供科学依据,使其更加安全地应用于临床.方法 取Wistar大鼠的股骨和胫骨骨髓...
- 白璐崔向荣张春敏刘建平朱静
- 关键词：肿瘤微环境规避
- lslet-1在乙酰化调控网络中特异性辅助C3H10T1/2细胞向心肌细胞分化
- 林建萍朱静田杰吕铁伟鲁荣邓兵刘建平智深深
- 小鼠Islet-1基因RNAi慢病毒载体的构建被引量：3
- 2011年
- 目的构建高效沉默小鼠Islet-1基因的慢病毒载体。方法针对小鼠Islet-1基因设计3个RNAi靶序列,合成相应的短发卡RNA(shRNA)寡核苷酸序列(oligo):Sh1、Sh2、Sh3,分别插入经酶切后的PLVTHM载体。经PCR和测序方法筛选阳性克隆,抽提阳性克隆质粒经大肠埃希菌扩增后,与其辅助包装质粒共同感染293T细胞制备慢病毒载体,利用斑形成试验测定病毒滴度。感染C3H10T1/2细胞株,以流式细胞仪检测其感染效率、荧光定量PCR检测其干扰效率。结果与正常C3H10T1/2细胞比较,测序及PCR结果显示目的片段插入正确;病毒滴度值为3.87×108TU/ml;慢病毒载体对C3H10T1/2细胞感染效率达90.36%;3个靶点(抑制效率分别为76.8%5、5.1%和11.7%)均有干扰效果,与正常细胞比较,Sh1靶点干扰效果最为显著(76.8%,P<0.05)。结论成功构建高效沉默Islet-1基因慢病毒载体。
- 智深深朱静田杰刘官信鲁荣林建萍刘建平
- 关键词：慢病毒感染RNA干扰细胞分化
- 资源整合联合PBL教学法在临床生化检验实验中的新教学模式探索被引量：1
- 2021年
- 目的分析传统临床生化检验实验课程的设置现状及存在问题,探索研究整合临床实验室资源联合PBL教学法的临床生化检验实验新教学模式。方法调查2017年1月—2020年12月在南昌大学及其附属医院学习的医学检验专业本科学生100名及其任课教师及实验员7名,其中对照组52名,试验组55名。调查内容主要包括人员的一般资料和实验课程实施的要素和预期效果。结果对照组和试验组的人数,年龄,性别比例在两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。对照组和试验组之间在仪器维护是否按时保养、校准品是否配套、实验场地面积是否足够、人员是否具备相应资质、实验场地是否安全要素方面差异无统计学意义(P>0.05)。在仪器是否先进、试剂是否配套、质控品是否配套、实验项目是否齐全、学生兴趣是否高,项目临床意义是否掌握等方面试验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与传统的临床生化检验实验教学模式比较,资源整合联合PBL的临床生化检验实验新教学模式在培养学生临床实验技能方面具有明显优势。
- 刘建平邹海虹
- 关键词：临床生化检验课程设置资源整合
