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冯海凉

作品数:36 被引量:50H指数:4
供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
发文基金:国家科技基础条件平台建设计划国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>

文献类型

  • 25篇期刊文章
  • 10篇会议论文
  • 1篇学位论文

领域

  • 32篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇化学工程
  • 1篇农业科学

主题

  • 28篇细胞
  • 18篇肿瘤
  • 9篇小鼠
  • 7篇细胞系
  • 6篇树突
  • 6篇树突状
  • 6篇树突状细胞
  • 5篇肉瘤
  • 5篇树突状细胞肉...
  • 5篇肿瘤细胞
  • 5篇细胞肉瘤
  • 4篇肿瘤转移
  • 4篇聚合酶
  • 4篇抗原
  • 4篇合酶
  • 4篇恶性
  • 4篇干细胞
  • 3篇蛋白
  • 3篇荧光
  • 3篇荧光标记

机构

  • 20篇中国医学科学...
  • 14篇中国医学科学...
  • 7篇北京协和医学...
  • 2篇北京协和医院
  • 1篇中国科学技术...
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇首都医科大学...

作者

  • 36篇冯海凉
  • 35篇刘玉琴
  • 22篇卞晓翠
  • 19篇杨振丽
  • 17篇顾蓓
  • 6篇李占稳
  • 6篇刘艳艳
  • 4篇张宏
  • 4篇王春景
  • 3篇朱琰
  • 3篇董继红
  • 3篇孙蕊
  • 3篇杨丽娟
  • 3篇张敏
  • 2篇赵文晶
  • 2篇孙昊
  • 2篇顾蓓
  • 2篇赵文晶
  • 2篇李占稳
  • 2篇张敏

传媒

  • 6篇中华病理学杂...
  • 3篇解剖学报
  • 3篇中华肿瘤杂志
  • 3篇基础医学与临...
  • 2篇中国肿瘤临床
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇中华实验和临...
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇肿瘤防治研究
  • 1篇中国医学影像...
  • 1篇Chines...
  • 1篇现代生物医学...
  • 1篇中华肿瘤防治...
  • 1篇第十三届全国...
  • 1篇第十届全国肿...
  • 1篇第八届中国肿...
  • 1篇中国免疫学会...

年份

  • 1篇2022
  • 1篇2021
  • 2篇2019
  • 2篇2018
  • 4篇2017
  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 3篇2014
  • 5篇2013
  • 4篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 3篇2009
  • 5篇2008
  • 1篇2007
36 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
PI3K和MEK联合抑制增强对K-ras基因单突变肺癌细胞的生长抑制作用被引量:1
2014年
目的 观察RAS/MEK/ERK通路单独抑制或联合PI3K/AKT/mTOR通路抑制对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关分子机制.方法 常规培养A549细胞,分别以不同浓度的PI3K抑制剂GDC-0941和MEK抑制剂AZD6244单独或联合处理,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测抑制剂对细胞增殖的影响,根据MTT法检测结果确定联合给药的浓度.将A549细胞分为空白对照组、0.5 μmol/L GDC-0941处理组、低浓度联合组(0.5 μmol/L AZD6244+ 0.5μmol/LGDC-0941)、5.0 μmol/L GDC-0941处理组和高浓度联合组(5.0 μmol/L AZD6244+ 5.0 μmol/L GDC-0941),采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,采用Western blot法检测抑制剂靶点下游与细胞周期和凋亡相关的蛋白表达.结果 AZD6244对A549细胞的增殖抑制作用呈浓度依赖性,但浓度平台出现时,增殖抑制率仅为25.5%.AZD6244联合GDC-0941对A549细胞的生长抑制作用增强,但联合用药的效果与两种抑制剂联合使用的浓度有关.0.5 μmol/L GDC-0941处理组和低浓度联合组A549细胞的凋亡率分别为(20.70±0.99)%和(18.65±0.92)%,差异无统计学意义(P>0.05);5.0μmol/L GDC-0941处理组和高浓度联合组A549细胞的凋亡率分别为(37.85 ±3.18)%和(52.27±4.36)%,差异有统计学意义(P<0.01).低浓度联合组A549细胞的细胞周期没有明显改变;高浓度联合组中G0/G1期细胞增加,S期细胞减少.单独使用AZD6244可明显抑制pERK的表达水平,但pAKT的表达增加.单独使用GDC-0941可明显抑制pAKT的表达水平,但pERK的表达增加.低浓度联合组中,细胞周期和凋亡蛋白的表达均没有发生明显改变;高浓度联合组中,cyclin D1、cyclin B1表达量受到抑制,PARP剪切增加,Bcl-2/Bax比值下降.结论 对于K-ras基因单突变的非小细胞肺癌A549细胞,单独使用一条信号通路的抑制剂会反馈性激活另一信号通路.RAS/MEK/ERK和PDK/AKT/mTOR两条通路的同时抑制呈协同�
杨振丽李占稳冯海凉卞晓翠刘艳艳刘玉琴
关键词:K-RAS基因
囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用
目的:探讨囊泡膜蛋白相关蛋白(VAP33)过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移相关生物学特性的影响。方法:反转录获得VAP33cDNA,构建与GFP融合基因慢病毒表达载体。用病毒感染DG6细胞,荧光显微镜挑选,...
赵文晶杨振丽顾蓓冯海凉张敏刘艳艳李占稳刘玉琴
关键词:增殖
文献传递
The Establishment and Characterization of a Continuous Cell Line of Mouse Cervical Carcinoma
2008年
OBJECTIVE To establish a murine uterine cervical cancer cell line and to define its biological characters. METHODS Transplanted tumor tissue was used for in vitro primary culture of U14 cervical carcinoma cells. After 20 passages, we examined its morphology, chromosomes, tumorigenicity and produced a growth curve. CK was detected by immunohistochemistry, the cell cycle determined by flow cytometry and the metastatic potential assessed in 615 and C57BL/c mice. We also transfected the cells with the pEGFP-N1 plasmid. RESULTS A newly established murine cell line was passaged 50 times over a period of 10 months. The cells grow as a partially suspended culture, and are immunohistochemically CK(+). The cell line is characterized by a hypotetraploid karyotype, a chromosomal number of 64-68 and a doubling time of 21.8 h. Exponential growth occurs by the third and forth day of culture. Cell cycle analysis showed G1 34%, G2 26%, and 40% in the S phase. The tumorigenicity was 100% upon implantation. No mycoplasma contamination was detected. A monoclonal continuous U14-GFP cell strain which was 100% GFP (+) was also produced. CONCLUSION We successfully established a new murine cervical U14 carcinoma cell line and an U14-GFP monoclonal strain. These cell lines are ideal for combined in vivo and in vitro tumor research.
顾蓓冯海凉董继红张宏卞晓翠刘玉琴
分化抑制蛋白1在恶性肿瘤细胞诱导分化中的作用
目的研究降低分化抑制蛋白1(Id-1)的表达在恶性肿瘤细胞诱导分化中的作用。方法化学合成针对 Id-1 mRNA 的三条小干扰 RNA(siRNA), 转染小鼠树突状细胞肉瘤细胞系(DCS),激光扫描共聚焦显微镜观察转染...
卞晓翠刘玉琴顾蓓冯海凉董继红
关键词:SIRNA树突状细胞肉瘤诱导分化
文献传递
Cas9稳定表达人肿瘤细胞株的建立及其基因编辑活性被引量:2
2017年
目的:建立多种Cas9蛋白稳定表达的人肿瘤细胞株,验证细胞中Cas9的基因编辑活性,方便后续研究中目的基因的编辑。方法在15种来自不同组织的人肿瘤细胞株中通过慢病毒感染pLv-EF1α-Cas9-Flag-Neo或pLv-EF1α-Cas9-Flag-Puro及克隆筛选的方式建立Cas9稳定表达的细胞株;在其中3个细胞株中瞬时转入靶向TSC22基因的向导RNA,挑选单克隆,通过基因组PCR、测序及Western blot检测Cas9蛋白的基因编辑活性。结果筛选得到了69株Cas9稳定表达的人肿瘤细胞株,瞬时转入向导RNA后成功造成了细胞中TSC22基因的大片段缺失。结论成功建立了69株Cas9稳定表达的人肿瘤细胞株,其中的Cas9蛋白具有基因编辑活性。这些细胞株在大规模药物筛选、新药作用靶点的筛选以及基因功能研究等方面有潜在应用价值。
卞晓翠杨振丽冯海凉赵晓梅顾蓓李姜孙昊刘玉琴
外源EGFP表达对肿瘤细胞体外生物学行为的影响被引量:1
2012年
目的探讨常用的可视化细胞标记技术-外源EGFP表达对肿瘤细胞生物学行为的影响。方法选择不同的携带EGFP的载体,利用脂质体转染或慢病毒感染技术,在不同肿瘤细胞系中表达外源EGFP,筛选稳定表达外源EGFP的细胞系,MTT法检测细胞体外增殖能力;细胞分析计数仪(CasyTT型)检测细胞大小;Transwell体外迁移实验检测细胞体外侵袭能力。结果成功建立了稳定表达外源EGFP的人结肠癌细胞系HCT116-GFP、HCT116-EG-FP、COLO320DM-EGFP和小鼠树突状细胞肉瘤细胞系DG6-EGFP。HCT116-EGFP细胞、COLO320DM-EGFP细胞和DG6-EGFP细胞的体外增殖能力明显降低;HCT116-EGFP细胞体积增大:平均直径分别为(14.53±0.07)μm(HCT116)和(18.28±0.16)μm(HCT116-EGFP)(P<0.01);HCT116-EGFP细胞的体外侵袭能力明显降低(P<0.01)。结论外源EGFP可视化标记细胞后,可能会影响肿瘤细胞的生物特性,利用这些模型进行科研时,需注意对相关指标的影响。
张敏赵文晶冯海凉刘艳艳李占稳刘玉琴
关键词:EGFP肿瘤细胞系
Ⅰ、CD133在人结肠癌细胞分化中的作用研究;Ⅱ、荧光标记肿瘤转移体内模型的建立
本论文分为两个部分:   第一部分:CD133在人结肠癌细胞分化中的作用   在本研究中,首先我们用Western blotting检测了44种人肿瘤细胞系中CD133的表达,其中8种细胞呈CD133阳性表达,5个来...
冯海凉
关键词:CD133绿色荧光蛋白肿瘤转移
文献传递
靶向抑瘤活性的实验研究
目的:人工设计并表达美罗华(C2B8)单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O(LLO)显性抗原表位构成的重组融合蛋白(ScFv-pLLO),初步分析其靶向结合和抗B细胞淋巴瘤细胞活性.方法:查询数据库获得美罗华(C2B8)单...
孙蕊朱琰冯海凉卞晓翠顾蓓王春景刘玉琴
CD133在人结肠癌细胞分化中的作用
CD133分子在多种肿瘤包括结肠癌中都用来作为肿瘤干细胞的一个标记,但是它本身的的功能现在还不清楚。我们用Western blotting检测了44种人肿瘤细胞系中CD133的表达,8种肿瘤细胞系呈阳性表达,其中5个是结...
冯海凉杨丽娟卞晓翠杨振丽顾蓓张宏王春景苏小玲赵晓梅刘玉琴
关键词:CD133结肠癌肿瘤干细胞分化
文献传递
Cas9稳定表达的人肝胆癌细胞株的建立被引量:1
2018年
目的建立Cas9蛋白稳定表达的人肝胆癌细胞株,并验证Cas9的基因编辑活性,以便利用CRISPR/Cas9系统开展肝胆细胞基因编辑的研究。方法在人肝癌细胞(Huh7、PLC/PRF/5、HepG2、Hep3b、SK-HEP-1和Li-7)、人胆管癌细胞(RBE)和人胆囊癌细胞(GBC-SD)中,分别感染Cas9表达质粒pLv-EF1α-Cas9-Flag-Neo、pLv-EF1α-Cas9-Flag-Puro和Cas9m1.1,挑选单细胞克隆培养扩增。提取基因组DNA和总蛋白后,通过基因组聚合酶链反应(PCR)和Western blot验证Cas9的稳定表达。选取其中3个细胞株并感染Lv-EF1α-mCherry,流式细胞术分选出mCherry阳性的细胞,再通过慢病毒感染靶向mCherry基因的向导RNA,细胞扩增后,通过基因组PCR、荧光显微镜下观察和流式细胞术检测mCherry被敲除的情况。结果筛选到100个Cas9稳定表达的人肝胆癌细胞株,其中表达Cas9-Neo的细胞35株,表达Cas9-Puro的细胞25株,表达突变型Cas9的细胞40株。建立了3株mCherry稳定表达的细胞系Huh7-mCas9-M、PLC/PRF/5-Cas9-M和SK-HEP-1-Cas9-M。基因组PCR和测序显示,同时感染2种gRNA的细胞基因组内存在mCherry片段缺失。荧光显微镜下,同时感染2种gRNA的细胞可以观察到mCherry-EGFP+细胞。流式细胞仪检测结果显示,mCherry-EGFP+细胞占0.3%~93.6%。结论成功建立了100个Cas9稳定表达的人肝胆癌细胞株,其中的Cas9蛋白具有基因编辑活性。
左春霞卞晓翠杨振丽冯海凉周芳颖刘玉琴
关键词:肝细胞癌胆管癌胆囊肿瘤细胞株
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