顾蓓 作品数:87 被引量:359 H指数:11 供职机构: 中国医学科学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 中国癌症基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
CCC-HPF-2细胞基因组DNA可作为STR分型标准物质 被引量:2 2011年 目的检测细胞培养传代过程中的基因稳定性,筛选符合中国人遗传特性的DNA标准物质,建立DNA标准细胞库。方法通过显微镜下观察、免疫组织化学、核型分析检测细胞传代过程中形态、分子表达及核型是否稳定;应用PCR方法检测细胞的外源微生物及种属来源;STR检测验证细胞在传代过程中STR表达谱的平衡性及稳定性。结果 CCC-HPF-2细胞呈成纤维细胞样;波形蛋白表达阳性,CK阴性;无外源微生物污染;细胞来源于人;所有15个STR基因座都得到扩增,呈现较好的扩增平衡性,各代细胞STR表达谱一致,表现了高度稳定性。结论 CCC-HPF-2细胞来源于人,30代内的该细胞DNA可作为STR分型标准物质。 杨振丽 卞晓翠 刘玉琴 王春景 苏小玲 顾蓓 张宏关键词:短串联重复序列 STR 细胞库 标准物质 CD133在人结肠癌细胞分化中的作用 CD133分子在多种肿瘤包括结肠癌中都用来作为肿瘤干细胞的一个标记,但是它本身的的功能现在还不清楚。我们用Western blotting检测了44种人肿瘤细胞系中CD133的表达,8种肿瘤细胞系呈阳性表达,其中5个是结... 冯海凉 杨丽娟 卞晓翠 杨振丽 顾蓓 张宏 王春景 苏小玲 赵晓梅 刘玉琴关键词:CD133 结肠癌 肿瘤干细胞 分化 文献传递 脑复聪对脂多糖激活的小胶质细胞合成环氧合酶-2和分泌前列腺素E_2作用的实验研究 被引量:3 2013年 目的观察中药脑复聪(NFC)含药血清对脂多糖(LPS)激活后的小鼠神经小胶质细胞BV-2的形态、BV-2中环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达以及BV-2上清液中前列腺素E2(PGE2)分泌量水平的影响。方法将体外培养的小鼠神经小胶质细胞BV-2分成:正常对照组、LPS组、NFC血清组(高、中、低剂量)培养24h,用倒置相差显微镜观察细胞形态,蛋白印迹方法检测BV-2中COX-2蛋白的表达,酶联免疫吸附法测定培养BV-2上清液中PGE2蛋白的浓度。结果 (1)NFC各组对LPS所致的BV-2细胞形态变化均有一定的恢复作用。(2)LPS组BV-2中COX-2含量较正常对照组升高;与LPS组相比,NFC含药血清各剂量组COX-2蛋白含量均下降。(3)BV-2上清液中PGE2蛋白的浓度LPS组较正常对照组含量升高;与LPS组相比,NFC各剂量组PGE2含量均下降。结论 NFC含药血清可以显著下调LPS激活后BV-2中COX-2蛋白的表达量并显著减少BV-2上清液中PGE2的分泌量,减轻炎症反应,改善细胞形态。 崔雅忠 景光婵 张孟仁 刘玉琴 顾蓓关键词:脂多糖 小胶质细胞 脑复聪 抗CD20单链抗体融合显性抗原肽的原核表达和其抑瘤活性研究 被引量:2 2015年 目的:人工设计并表达美罗华(C2B8)单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O(Listeriolysin O,LLO)显性抗原表位构成的重组融合蛋白(Sc Fv-p LLO),初步分析其抗淋巴瘤细胞活性。方法:查询数据库获得美罗华(C2B8)单抗VH和VL基因序列,构建抗CD20单链抗体(Sc Fv)基因序列,选取LLO的2个CD4+T细胞表位,构建单链抗体融合抗原表位的重组蛋白基因序列,克隆至原核表达载体,经诱导表达纯化,流式细胞术和免疫共沉淀分析其与淋巴瘤细胞结合能力,细胞增殖实验测定其对淋巴瘤细胞生长的影响,凋亡实验分析其诱导淋巴瘤细胞凋亡的能力,淋巴细胞增殖实验分析其免疫原性。结果:成功诱导表达重组蛋白Sc Fv-p LLO。Sc Fv-p LLO可不同程度地靶向结合不同淋巴瘤细胞系,并明显抑制Raji细胞生长和诱导其凋亡。Sc Fv-p LLO可刺激免疫小鼠脾细胞增殖。结论:重组蛋白Sc Fv-p LLO保留了Sc Fv的功能,可靶向结合和抑制CD20阳性淋巴瘤细胞的生长,同时可激活机体免疫应答,为进一步研究其模拟瘤细胞表面抗原和作为瘤细胞疫苗佐剂的功能奠定基础。 孙蕊 朱琰 冯海凉 卞晓翠 顾蓓 王春景 刘玉琴关键词:CD20 B细胞淋巴瘤 ω-3多烯酸乙酯对肿瘤恶病质的影响及其机制 被引量:1 2012年 目的临床上肿瘤恶病质的治疗十分棘手,初步的研究提示ω-3多不饱和脂肪酸本身作为免疫营养素具有改善肿瘤恶病质的功能。本研究应用在心血管疾病中广泛使用的ω-3多烯酸乙酯口服制剂来干预荷瘤小白鼠,探讨其对肿瘤恶病质的改善作用及机制。方法使用小白鼠结肠癌细胞株C-26皮下注射Balb/c小白鼠,构建荷瘤小白鼠肿瘤恶病质模型,将小白鼠分为3组:对照组(无荷瘤小白鼠组)、荷瘤无干预组和荷瘤ω-3多烯酸乙酯干预组,荷瘤ω-3多烯酸乙酯干预组小白鼠给予ω-3多烯酸乙酯(DHA、EPA>80%)灌胃(2 g.kg-1.d-1,体积<0.1 ml)。连续2周记录小白鼠饮食量、体质量及腓肠肌重量等指标,并比较各组肿瘤组织炎性因子IL-1β、IL-6的mRNA表达差异。结果ω-3多烯酸乙酯干预组相对于荷瘤无干预组可显著改善荷瘤小白鼠的体质量减轻程度,减少瘦肉体(腓肠肌)的丢失,并降低肿瘤组织的炎性因子IL-1β、IL-6的mRNA表达水平。结论口服ω-3多烯酸乙酯可以降低组织炎性因子表达,达到改善肿瘤恶病质的作用。 郭丹 柳欣欣 刘玉琴 顾蓓 徐锡霞关键词:鱼油 炎性因子 肿瘤恶病质 金龙胶囊和蛇毒对小鼠子宫颈癌(U14)抗复发和转移的观察 被引量:22 2000年 目的 观察鲜动物药金龙胶囊和蛇毒制剂对实验性手术后肿瘤局部复发和转移的作用。方法 以小鼠子宫颈癌 (U 14 )高转移肿瘤模型为对象 ,用金龙胶囊和蛇毒制剂进行实验性治疗 ,抑瘤率和抑制转移率为主要指标 ,与化疗组和对照组进行对比观察。结果 金龙胶囊对局部肿瘤复发两次抑制率各为 5 4.8%和 6 6 .3 % ;对转移抑制率各为5 0 %和 5 4%。蛇毒对局部肿瘤复发两次抑制率各为 5 4.4%和 6 8.3 % ;对转移抑制率各为 45 .8%和 6 6 .8%。结论 这两种鲜动物药制剂对实验性手术后治疗肿瘤局部复发及术后转移有显著的抑制作用。本实验对鲜动物药的临床应用提供了很有用资料。 刘玉琴 赵雪梅 顾蓓 薛克勋 李建生 高进关键词:鲜动物药 金龙胶囊 蛇毒 子宫颈癌 孙桂芝从补脾胃、治未病论治肝癌经验 被引量:15 2015年 介绍孙桂芝教授治疗原发性肝癌经验。以益气活血软坚解毒为肝癌主要治法,重视补益脾胃、治未病原则,注意脾胃在肝癌发生发展中的重要作用,提倡重视在肝纤维化、肝硬化阶段进行早期干预,防止肝癌发生;肝癌发生后积极干预,防止复发和转移。 王靖思 陈兰羽 刘玉琴 王逊 顾蓓关键词:原发性肝癌 补脾胃 治未病 名医经验 肝康冲剂抑瘤作用观察及机理探讨 被引量:6 1998年 观察肝康冲剂对动物移植性肿瘤S180、H22的抑瘤作用,并对肝康冲剂的作用机理进行了探讨。结果显示:肝康冲剂对S180、H22具有一定的抑瘤作用,其作用机理与提高荷瘤小鼠的免疫功能。 李杰 孙桂芝 朴炳奎 陈长怀 刘玉琴 顾蓓 薛克勋 高进 苑景春 李江 陆丽珠关键词:免疫功能 细胞周期 中药 药理 人胚胎肝细胞的体外培养及表型观察 目的体外培养人胚胎肝细胞并观察其表型特性;方法采用胰酶分步消化法体外分离人胚胎肝细胞,在培养的不同代数,收集培养上清液用电化学发光法测定甲胎蛋白,用全自动血生化分析仪测定白蛋白、ALT、AST、GGT、 ALP、LDH的... 杨帆 王春景 苏晓玲 顾蓓 张宏 刘玉琴关键词:肝细胞 胚胎 丁酸钠 文献传递 桃红芪术软肝煎基于TGF-β/Smad信号通路逆转上皮-间质转化抗肝纤维化作用 被引量:3 2015年 目的:观察桃红芪术软肝煎从(transforming growth factor beta,TGF-β)/Smad信号通路逆转上皮-间充质细胞转化(e p i t h e l i a lmesenchymal transition,EMT)抗肝纤维化的作用.方法:取对数生长期的HepG2细胞进行试验,将细胞分为7组:空白组、TGF-β诱导EMT组、TGF-β+中药[低剂量组(p e a c h stilbene low dose group,THQL)、中剂量组(peach stilbene middle dose group,THQM)、高剂量组(peach stilbene high dose group,THQH)]、TGF-β+扶正祛瘀胶囊组(Fuzheng Huayu recipe,FZHY组)、TGF-β+秋水仙碱组(c o l c h i c i n e g r o u p,QSXJ组),采用免疫荧光和Western blot方法检测E-cadherin、Vimentin、Smad2、TGF-βR1表达情况,并检测细胞上清液中的谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)表达情况.结果:诱导组AFP诱导第3天浓度明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);用药干预后,用药组ALT、AST水平均低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),THQL及TRQM的ALT水平均低于FZHY和QSXJ,差异具有统计学意义(P<0.05),THQM及THQH的AST水平均低于FZHY和QSXJ,差异具有统计学意义(P<0.05);桃红芪术软肝煎可以改善HepG2细胞被诱导发生EMT的形态,其中THQM组和THQH组形态改变较为明显;桃红芪术软肝煎可以上调E-cadherin表达,下调Smad2、TGF-βR1、Vimentin表达.结论:桃红芪术软肝煎可以通过作用于TGF-β/Smad信号通路逆转上皮-间质转化,从而起到抗肝纤维化的作用. 王靖思 王逊 刘玉琴 陈兰羽 朱昱翎 顾蓓 孙桂芝