- 车前子可溶性膳食纤维保健食品的研制
- 陈亮
- 关键词:可溶性膳食纤维泡腾片英语
- 慢病毒载体介导的IL-10诱导耐受性树突状细胞的形成
- 2011年
- 探讨通过IL-10重组慢病毒载体转染小鼠未成熟树突状细胞(iDC),构建高分泌IL-10的耐受性树突状细胞的可行性。粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)联合诱导并经CD11c免疫磁珠分选获得小鼠骨髓iDC,倒置显微镜下观察,流式细胞术分析细胞表面分子;IL-10重组慢病毒载体转染小鼠iDC,荧光显微镜下观察GFP表达,ELISA法测定转染细胞的IL-10表达水平,并行混合淋巴细胞反应,观察其诱导T淋巴细胞增殖的情况,流式细胞术检测调节性T细胞。结果:获得大量高纯度未成熟DC,随培养时间延长表现出典型的树突状形态,流式细胞术分析显示iDC表面MHCⅡ、CD80、CD86表达水平均显著低于mDC;未成熟DC经IL-10慢病毒转染后,荧光显微镜下观察GFP蛋白高度表达,ELISA检测IL-10表达水平明显高于对照组(P<0.05),且IL-10转染iDC体外刺激T淋巴细胞增殖的能力弱于未转染iDC,但调节性T细胞比例高于后者。IL-10基因通过慢病毒载体介导,成功整合到iDC基因内,使其高表达IL-10,基因修饰后的iDC的致免疫耐受作用得到了增强。
- 陈亮温桂兰许飞方乐
- 关键词:树突状细胞慢病毒IL-10免疫耐受
- 小鼠IL-10重组慢病毒载体的构建和病毒包装被引量:1
- 2011年
- 目的:构建小鼠IL-10重组慢病毒表达载体并进行包装,为进一步研究IL-10基因修饰树突细胞在哮喘免疫耐受中的作用提供实验基础。方法:小鼠IL-10基因片段经PCR扩增后,与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,获得PGC-LV-IL-10重组慢病毒并转化细菌感受态细胞。克隆菌落行PCR鉴定,对阳性的重组质粒进行测序并转入293T细胞,荧光显微镜下观察GFP表达并行Western blot鉴定。将重组质粒与慢病毒包装系统一同转染293T细胞进行病毒包装,Real-time定量PCR法检测病毒滴度。结果:DNA测序结果及Western blot鉴定证实成功构建小鼠IL-10重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为2×108TU/ml。结论:成功构建并包装小鼠IL-10重组慢病毒表达载体。
- 陈亮温桂兰许飞
- 关键词:IL-10基因慢病毒载体免疫耐受
- 智慧社区养老服务机制研究——以镇江市云阳社区为例
- 随着社会的不断发展,人民生活质量不断提高,老龄化加剧严重。这引发了社会一系列问题,尤其是养老问题已成为我国现阶段亟待解决的社会问题。在我国,传统家庭养老模式与机构养老模式相辅相成仍是养老服务的主体,但其养老服务功能已经日...
- 陈亮
- 关键词:养老服务群众需求
- 文献传递
- 腺苷脱氨酶对结核性脑膜炎诊断价值的Meta分析被引量:7
- 2011年
- 目的探讨脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)检测在结核性脑膜炎(TBM)中的诊断价值。方法检索1990年1月—2010年10月Cochrane图书馆、PubMed和万方数据库等数据库,按照Cochrane协作网推荐的诊断试验纳入标准筛选文献,采用QUADAS工具评价纳入文献质量,应用Meta-D isc 1.4软件对纳入研究进行综合定量评价并绘制综合受试者工作曲线(SROC)。结果共检索到相关文献149篇,排除134篇,符合纳入标准的15篇进入Meta分析,涉及研究对象1 642例。异质性检验提示存在异质性,按随机效应模型进行Meta分析,ADA诊断TBM的敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、诊断优势比的汇总值分别为0.73〔95%CI(0.70,0.76)〕、0.90〔95%CI(0.88,0.91)〕、7.79〔95%CI(4.80,12.63)〕、0.25〔95%CI(0.17,0.35)〕和36.01〔95%CI(16.08,80.66)〕SROC下面积AUC为0.8856(Se=0.0412),Q值为0.8162。结论脑脊液ADA对TBM的临床诊断价值有较低的敏感度和较高的特异度,测定脑脊液ADA可作为诊断TBM的辅助诊断指标。
- 方乐李俊明万腊根黄自坤陈亮蔡恒毅张明飞
- 关键词:结核性脑膜炎腺苷脱氨酶META分析
- 慢病毒载体介导的Il-10诱导小鼠骨髓来源耐受性树突状细胞的形成
- 目的:探索体外培养小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞(immature dendriticcells,imDCs)的实验条件和方法。探讨重组IL-10慢病毒载体转染小鼠imDCs,构建高分泌IL-10的耐受性树突状细胞(tol...
- 陈亮
- 关键词:树突状细胞免疫耐受IL-10基因慢病毒载体
- 慢病毒载体介导的TGF-β1基因修饰小鼠未成熟树突状细胞的实验研究
- 2011年
- 目的探讨慢病毒载体介导的转化生长因子β1(TGF-β1)基因修饰小鼠未成熟树突状细胞(iDCs)的方法。方法体外原代培养小鼠骨髓细胞,经粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导以及抗CD11c抗体包被的免疫磁珠分选获得iDCs,取部分iDCs经肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导为成熟DCs(mDCs),用光学显微镜观察细胞形态,流式细胞术分析细胞的表面分子。将iDCs分为感染组[感染携带绿色荧光蛋白(GFP)与TGF-β1基因的慢病毒颗粒]、感染对照组(感染携带GFP、不携带TGF-β1基因的慢病毒颗粒)及空白对照组(未感染慢病毒颗粒)。采用倒置荧光显微镜及酶联免疫吸附试验(ELISA)对各组iDCs中GFP及TGF-β1的表达进行检测。结果经体外诱导培养及免疫磁珠分选后,获得大量高纯度iDCs,随培养时间延长,iDCs表现出典型的树突状形态;iDCs表面MHCⅡ、CD80及CD86表达水平均明显低于mDCs。感染组iDCs中GFP与TGF-β1蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论携有TGF-β1基因的慢病毒成功感染小鼠iDCs,并使其表达目的蛋白。
- 陈亮许飞温桂兰
- 关键词:树突细胞慢病毒感染粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 非小细胞肺癌HSP70、p27、bcl-2蛋白的表达水平及其临床意义
- 目的:探讨HSP70、p27、bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中表达水平及其临床意义。 方法:用S-P免疫组化法检测60例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常组织中的HSP70、p27、bcl-2的表达水平,并对其结果进行分...
- 陈亮
- 关键词:非小细胞肺癌HSP70蛋白P27蛋白BCL-2蛋白
- 乌骨鸡黑色素及其活性多肽产品的研制
- 谢明勇田颖刚王远兴聂少华涂勇刚李昌付志红吴红静王维亚孙亚真陈亮林霖吴光杰李欣朱尚彬
- 1、任务来源:①江西省农业科技攻关计划重点项目;②教育部长江学者和创新团队发原计划(食品质量与安全IRT0540部分内容);③人事部留学回国人员科技活动项目;④江西省教育厅国家部委级重点实验室专项基金项目(赣教技宇[20...
- 慢病毒载体介导的IL-10诱导耐受性树突状细胞的形成
- 探讨通过IL-10重组慢病毒载体转染小鼠未成熟树突状细胞(iDC),构建高分泌IL-10的耐受性树突状细胞的可行性。粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)联合诱导并经CD11c免疫磁珠分选获...
- 许飞陈亮温桂兰张伟
- 关键词:树突状细胞慢病毒IL-10免疫耐受
- 文献传递