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董泾青: 作品数：31 被引量：123H指数：5; 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定: 2005年; 目的构建反义DNA甲基化酶3b(DNM T 3b)基因片断真核表达载体,为研究DNM T 3b基因功能提供工具。方法根据DNM T 3b基因cDNA序列中编码序列设计PCR引物,在上下游引物5′端分别添加X baⅠ和K pnⅠ酶切位点,RT-PCR从胆管癌细胞QBC-939中获得485bp的DNA片断;将该片断反向插入真核表达载体pcDNA 3.1(+)的多克隆位点,构建反义DNM T 3b基因片断真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到467bp特异条带,双酶切鉴定得到471bp片断和5.4kb载体片断,DNA测序说明插入片断序列正确。结论本研究构建的反义DNM T 3b基因片断真核表达载体可为进一步研究DNM T 3b基因功能提供实验工具。; 左石罗剑刘民锋徐立宁董泾青郭伟邹声泉; 关键词：DNMT3B 反义技术 DNA甲基化

腹部切口裂开的防治被引量：4: 2012年; 目的:探讨切口裂开的病因及防治方法。方法:对2006—2010年腹部手术后切口裂开的42例患者的临床资料进行回顾性分析。结果:42例包括正中切口14例,腹直肌切口27例,斜切口1例。恶性肿瘤例28例,营养不良21例,贫血27例,糖尿病18例,切口感染14例。切口裂开后表现为腹痛38例,切口渗液24例,肠管外露6例,皮下气肿5例。治愈40例,死亡2例。结论:预防感染,重视围术期处理,提高缝合技术,是预防腹部切口裂开的关键。腹腔镜手术可较好的预防腹部切口裂开。; 雷尚通孙凯薛琪董泾青

171例外伤性小肠破裂的诊治被引量：11: 2011年; 小肠是腹部外伤中最易受伤的器官。尽管大部分小肠损伤的诊断与治疗并不困难，但仍存在误诊、延迟诊断及处理不当的情况，并由此导致了严重的后果。南方医科大学南方医院2000—2010年共诊治外伤性小肠破裂171例．现报道如下。; 雷尚通孙凯董泾青薛琪; 关键词：外伤性小肠破裂诊治腹部外伤小肠损伤

反义DNMT3b基因真核表达载体转染对人胆管癌细胞DNMT3b基因表达的影响: 2006年; 目的观察反义DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因真核表达载体转染对人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因表达的影响。方法构建反义DNMT3b基因真核表达载体,通过脂质体转染到人胆管癌细胞株QBC939中,G418筛选得到稳定转染细胞株,PCR鉴定外源性neoR基因在转染细胞中的表达以确定转染是否成功。半定量RTPCR观察转染前后DNMT3b基因mRNA水平的变化,流式细胞术检测转染前后DNMT3b蛋白的变化。结果反义DNMT3b基因真核表达载体转染能使人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因的mRNA水平从0.956±0.053降低至0.209±0.023,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术检测结果显示,DNMT3b蛋白水平从(75.38±3.22)%降低到(29.87±3.46)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论反义DNMT3b基因转染能降低人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因的表达水平,为研究DNMT3b基因功能及其在胆管癌细胞中的作用提供了方法和实验依据。; 左石郭伟刘民锋董泾青徐立宁罗剑邹声泉; 关键词：DNA甲基转移酶3B 反义RNA 转染基因表达胆管癌

反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体联合转染对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：3: 2006年; 目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞株QBC-939的增殖能力和细胞凋亡的影响。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将二者先后转染入QBC-939,经G418筛选和荧光细胞克隆挑选得到稳定转染细胞株,并用Western blot检测转染前后的蛋白表达变化;用MTT法和软琼脂克隆形成试验观察各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞生长周期及凋亡率的变化。结果Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,并以前者为甚;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因的细胞克隆形成率分别为(6.78±0.89)%和(14.86±2.13)%,明显低于未转染组;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,细胞凋亡率从(1.63±0.27)%分别增加到(18.47±1.46)%和(6.19±0.78)%;在上述效应检测中,单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,能抑制胆管癌细胞的生长和增殖,并促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DNMT1反义基因;在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,二者通过甲基化途径对胆管癌的发生发挥作用。; 左石邹声泉刘民锋董泾青郭伟罗剑徐立宁; 关键词：DNMT1基因胆管癌

腹部切口裂开伴皮下气肿二例: 2011年; 例1 患者男，63岁，因“腹痛3个月”于2010年3月12日入院，诊断为升结肠癌并行右半结肠切除术。麻醉拔管时，患者发生剧烈呛咳。次日查房患者诉切口疼痛，查切口无红肿渗液，切口周围皮下有捻发感，上至剑突，下至耻骨联合，两侧至腋前线，给予切口换药、止痛等处理，皮下气肿范围逐渐缩小，但仍可触及念发感。术后第9天拆线后出现切口全层裂开约5em，急行切口清创缝合术，术后第14天拆线出院。; 雷尚通孙凯董泾青; 关键词：腹部切口裂开皮下气肿清创缝合术升结肠癌切口疼痛切口周围

PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002对胆管癌细胞化疗增敏作用的研究被引量：4: 2006年; 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂(P I3K)LY 294002[22(42吗啉基)282苯基24氢212苯并吡喃242酮]对胆管癌化疗效果的影响。方法将LY 294002用于胆管癌细胞系QBC 939,M TT法检测单独使用5-Fu、MM C、塞莱西布及联合磷酸化抑制剂LY 294002,对体外培养的胆管癌细胞系QBC 939的抑制作用;流式细胞技术检测QBC 939凋亡抑制率。结果LY 294002作用后,5-Fu、MM C及塞莱西布对胆管癌细胞系QBC 939抑制作用明显增强,且能提高其凋亡率。结论LY 294002能有效提高化疗药物5-Fu、MM C、塞莱西布体外对QBC 939细胞抑制作用的敏感性;抑制P I3K介导的信号转导通路,可明显提高胆管癌的化疗效果。; 刘民锋余险峰郭伟董泾青左石罗剑徐立宁邹声泉; 关键词：LY294002 信号转导通路胆管肿瘤化疗

甲状腺手术中显露喉返神经以避免喉返神经损伤的临床意义被引量：33: 2012年; 目的探讨甲状腺手术中显露喉返神经(RLN)对预防RLN损伤的临床意义。方法回顾性分析2006年9月至2011年8月期间我院行甲状腺全切除术和次全切除术1 723例患者的临床资料,其中行显露RLN术式914例,共显露RLN 1 203条;行不显露RLN术式809例,共行1 013侧甲状腺腺叶切除手术。比较术后RLN损伤情况及术后6个月声带恢复情况。结果显露组与不显露组RLN损伤发生率分别为0.91%(11/1 203)和2.07%(21/1 013),2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后随访6个月,显露组与不显露组分别有0例和13例(61.9%,13/21)永久性RLN损伤,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论在甲状腺全切除和次全切除术中,显露并注意保护RLN能最大程度地避免RLN损伤,尤其是永久性RLN损伤。; 董泾青雷尚通; 关键词：甲状腺切除术喉返神经

加用丙氨酰-谷氨酰胺静脉营养对小儿术后早期炎性肠梗阻的疗效评价被引量：4: 2011年; 目的探讨加用丙氨酰-谷氨酰胺静脉营养对小儿术后早期炎性肠梗阻的治疗效果和对蛋白质合成及肠黏膜屏障功能的影响。方法将加用丙氨酰-谷氨酰胺静脉营养的患儿(观察组)与未加用丙氨酰-谷氨酰胺静脉营养的患儿(对照组)进行对比研究。结果与对照组相比,给予静脉营养12 d后观察组血浆白蛋白、前白蛋白水平有所提高(P<0.05),感染发生率降低(P<0.05),血二胺氧化酶(DAO)水平降低(P<0.05)。结论丙氨酰-谷氨酰胺加强的静脉营养能提高术后早期炎性肠梗阻患儿的蛋白质合成水平,降低感染发生率并能较好地保护肠黏膜屏障功能。; 董泾青陈波雷尚通李国新黄祥成; 关键词：术后早期炎性肠梗阻丙氨酰-谷氨酰胺肠黏膜屏障静脉营养

慢病毒介导的具有特定二级结构的microRNA-338-3p抑制剂的构建被引量：2: 2013年; 目的构建慢病毒介导的具有特定二级结构的人microRNA-338-3p（miR．338．3p）抑制剂并观察其对结直肠癌细胞侵袭转移能力的影响。方法由miRBase数据库查找获得miR-338-3p成熟序列，设计目的基因片段并人工合成；将miR-338-3p抑制剂序列和pLV-THM载体经双酶切后连接，产生pLV-THM-miR-338-3p抑制剂慢病毒表达载体，双酶切后测序鉴定，筛选阳性克隆；以pLV-THM-miR-338-3p抑制剂、psPAX2和pMD2．G质粒共转染包装细胞293T，包装产生慢病毒并测定滴度。流式细胞仪筛选建立稳定过表达miR-338-3p抑制剂的SW-620亚细胞株，利用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-338-3p表达，Westernblot检测其靶基因Smoothened（SMO）蛋白表达水平，Transwell小室穿透试验检测肿瘤细胞转移能力。结果经双酶切鉴定和测序证实，成功构建了包含miR-338-3p抑制剂的慢病毒表达载体，倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293T表达绿色荧光。稳定过表达miR-338-3p抑制剂的SW-620亚细胞株中，miR-338．3p表达水平显著低于阴性对照组（O．92±0．43比3．71±0．22，P〈0．01），SMO蛋白表达水平明显升高，且肿瘤细胞表现出侵袭转移能力的增强（细胞数78．6±6．9比23．7±4．2，P〈0．01）。结论成功构建了miR-338-3p抑制剂的慢病毒表达载体和稳定低表达miR-338-3p的SW-620亚细胞株，证实miR-338-3p可通过抑制结直肠癌细胞中SMO蛋白表达而抑制肿瘤细胞转移。; 邓海军孙凯郭琛董泾青李国新; 关键词：结直肠癌慢病毒

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