刘民锋 作品数:51 被引量:223 H指数:8 供职机构: 南方医科大学南方医院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 国家高技术研究发展计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
环磷酰胺联合强的松建立人乳腺癌小鼠移植模型 被引量:2 2014年 目的:将人乳腺癌细胞接种于具有正常免疫功能但受抑制状态的小鼠,以期建立乳腺癌小鼠模型。方法:将40只雌性BALB/c随机平均分成4组,按环磷酰胺和强的松用量多少分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。将人乳腺癌细胞接种于小鼠背部,观察小鼠成瘤时间、成瘤率、肿瘤的影像、病理学表现及其重要内脏器官转移情况等。结果:高剂量组成瘤率高,成瘤时间早,且内脏器官转移多,小鼠死亡率高。中剂量组成瘤率较低,成瘤时间较晚,内脏器官转移少,小鼠死亡率低。对照组和低剂量组未见成瘤和小鼠死亡。结论:本实验成功用环磷酰胺联合强的松在免疫正常的小鼠中建立人乳腺癌小鼠移植瘤模型,较好的模仿乳腺癌在免疫正常的机体里的发生、发展过程。 嵇健 刘民锋 杨翼鹏 郭昭泽 董建宇 叶长生关键词:环磷酰胺 免疫抑制 乳腺癌 小鼠 PET/CT 反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定 2005年 目的构建反义DNA甲基化酶3b(DNM T 3b)基因片断真核表达载体,为研究DNM T 3b基因功能提供工具。方法根据DNM T 3b基因cDNA序列中编码序列设计PCR引物,在上下游引物5′端分别添加X baⅠ和K pnⅠ酶切位点,RT-PCR从胆管癌细胞QBC-939中获得485bp的DNA片断;将该片断反向插入真核表达载体pcDNA 3.1(+)的多克隆位点,构建反义DNM T 3b基因片断真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR鉴定得到467bp特异条带,双酶切鉴定得到471bp片断和5.4kb载体片断,DNA测序说明插入片断序列正确。结论本研究构建的反义DNM T 3b基因片断真核表达载体可为进一步研究DNM T 3b基因功能提供实验工具。 左石 罗剑 刘民锋 徐立宁 董泾青 郭伟 邹声泉关键词:DNMT3B 反义技术 DNA甲基化 PTEN和mTOR信号转导通路在胆管癌发展中作用的研究 被引量:14 2006年 目的研究PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中mTOR和PTEN蛋白在胆管癌中的表达及其在胆管癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学方法和RT-PCR法,检测胆管癌中mTOR和PTEN的表达。结果与正常组织相比,免疫组化法和RT-PCR两种方法结果均显示,胆管癌中的mTOR表达明显增加,而PTEN的表达明显下降;两者呈负相关(r=-0.8 6 2,P<0.0 1)。结论PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号转导通路中重要的调节位点和节点PTEN在胆管癌中的表达明显降低,而mTOR的表达明显增高。提示该信号转导通路在介导胆管癌的发生、发展的过程中起重要作用。 刘民锋 罗剑 余险峰 唐启彬 陈勇军 邹声泉关键词:胆管肿瘤 信号传导 MTOR PTEN 白细胞介素-6诱导CD44+ CD24-/low肿瘤干细胞生成促进乳腺癌MCF7细胞辐射抵抗的研究 被引量:2 2015年 目的:上皮-间充质转化(EMT)能诱导 CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的产生,白细胞介素-6(IL-6)是很强的 EMT 诱导因子,探讨 IL-6是否通过诱导 CD44+CD24-/low细胞的产生,从而促进乳腺癌 MCF7细胞的辐射抵抗。方法含50 ng/ml IL-6的培养基培养 MCF7细胞,流式细胞术检测 CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞标记的变化,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot 检测 EMT 标记分子的表达水平,进一步利用流式细胞术从诱导组中分选出 CD44+CD24-/low细胞,克隆形成实验检测分选后细胞的辐射抵抗能力。结果IL-6能诱导 MCF7细胞发生间充质样转化,诱导5 d 后 CD44+CD24-/low细胞显著富集,诱导形成的 CD44+CD24-/low细胞的辐射抵抗能力显著提高。结论IL-6诱导了 CD44+CD24-/low 乳腺癌干细胞的产生,从而促进MCF7细胞的辐射抵抗。 郭昭泽 刘民锋 詹军芳 谢国柱 叶长生关键词:白细胞介素-6 上皮-间充质转化 干细胞 反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体联合转染对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3 2006年 目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞株QBC-939的增殖能力和细胞凋亡的影响。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将二者先后转染入QBC-939,经G418筛选和荧光细胞克隆挑选得到稳定转染细胞株,并用Western blot检测转染前后的蛋白表达变化;用MTT法和软琼脂克隆形成试验观察各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞生长周期及凋亡率的变化。结果Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,并以前者为甚;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因的细胞克隆形成率分别为(6.78±0.89)%和(14.86±2.13)%,明显低于未转染组;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,细胞凋亡率从(1.63±0.27)%分别增加到(18.47±1.46)%和(6.19±0.78)%;在上述效应检测中,单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,能抑制胆管癌细胞的生长和增殖,并促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DNMT1反义基因;在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,二者通过甲基化途径对胆管癌的发生发挥作用。 左石 邹声泉 刘民锋 董泾青 郭伟 罗剑 徐立宁关键词:DNMT1基因 胆管癌 大样本芯片数据分析亚洲人乳腺癌差异表达基因及可能信号通路 被引量:4 2014年 目的初步分析亚洲人乳腺癌差异表达基因及可能涉及的信号通路。方法从GEO数据库下载5套亚洲人乳腺癌基因芯片数据集(GSE6367、GSE9309、GSE15852、GSE33447和GSE45255),共获得318例乳腺癌和60例正常乳腺组织的基因表达谱数据,进行基因差异表达谱和信号通路分析,并用荧光定量PCR法检测32对乳腺癌患者癌和癌旁标本,验证其中部分基因的差异表达。结果大样本芯片数据分析显示,436个基因在乳腺癌组织出现差异表达,其中上调的有259个,下调的有177个。Pathway分析发现代谢相关的信号通路可能参与了亚洲人乳腺癌发生发展过程。经荧光定量PCR验证,KRT19、ADIPOQ、CFD、RBP4、LPL、ABCA8、CD36基因表达情况与芯片数据分析结果一致。结论本研究比较完整地揭示了亚洲人乳腺癌基因差异表达谱特征和所涉及的重要信号通路,其中CD36基因可能与亚洲人乳腺癌发病密切相关,ABCA8基因可能是亚洲人乳腺癌新的致病基因。 陈路嘉 叶长生 黄仲曦 李欣 姚广裕 刘民锋 胡晓磊 董建宇 郭昭泽关键词:乳腺癌 亚洲人 PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002对胆管癌细胞化疗增敏作用的研究 被引量:4 2006年 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂(P I3K)LY 294002[22(42吗啉基)282苯基24氢212苯并吡喃242酮]对胆管癌化疗效果的影响。方法将LY 294002用于胆管癌细胞系QBC 939,M TT法检测单独使用5-Fu、MM C、塞莱西布及联合磷酸化抑制剂LY 294002,对体外培养的胆管癌细胞系QBC 939的抑制作用;流式细胞技术检测QBC 939凋亡抑制率。结果LY 294002作用后,5-Fu、MM C及塞莱西布对胆管癌细胞系QBC 939抑制作用明显增强,且能提高其凋亡率。结论LY 294002能有效提高化疗药物5-Fu、MM C、塞莱西布体外对QBC 939细胞抑制作用的敏感性;抑制P I3K介导的信号转导通路,可明显提高胆管癌的化疗效果。 刘民锋 余险峰 郭伟 董泾青 左石 罗剑 徐立宁 邹声泉关键词:LY294002 信号转导通路 胆管肿瘤 化疗 乳腺癌组织MT1-MMP表达与淋巴管生成的关系 被引量:1 2012年 目的通过分析乳腺癌组织中膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达与血管内皮生长因子C(VEGF-C)、微淋巴管密度(LMVD)的关系,提供MT1-MMP参与乳腺癌淋巴管生成的证据。方法采用免疫组织化学方法检测87例乳腺癌组织中MT1-MMP、VEGF-C和D2-40的表达,分析MT1-MMP与VEGF-C、LMVD的关系及其与腋窝淋巴结转移的相关性。结果 MT1-MMP、VEGF-C的阳性表达以及肿瘤的淋巴管的高密度与腋窝淋巴结转移的增加相关。MT1-MMP阳性的患者中VEGF-C的阳性率明显高于MT1-MMP阴性的患者(86.0%vs 43.2%,P=0.000)。MT1-MMP阳性的患者中LMVD的平均值明显高于MT1-MMP阴性的患者(30.2个vs 25.1个,P=0.000)。结论 MT1-MMP与乳腺癌淋巴管生成和淋巴结转移关系密切,是参与乳腺癌淋巴管生成的重要因子。 姚广裕 何萍 杨名添 刘民锋 叶长生关键词:膜型基质金属蛋白酶-1 血管内皮生长因子C 微淋巴管密度 乳管镜在乳头溢液疾病中的临床应用 被引量:2 2008年 目的探讨纤维乳管镜在乳头溢液疾病中诊断和治疗的应用价值。方法对2006年3月至2007年3月在我院行纤维乳管镜检查及冲洗的27例患者的临床资料进行回顾性分析。结果27例患者中,乳管镜诊断为乳管内乳头状瘤12例,乳头状瘤病5例,乳管扩张及乳管炎共8例,未见明显异常2例。乳管内乳头状瘤和乳头状瘤病的镜下诊断与病理诊断符合率分别为91.7%(11/12)和80.0%(4/5)。结论纤维乳管镜可在直视下对乳头溢液疾病进行检查和冲洗,诊断准确率较高,是临床上对乳头溢液疾病进行诊断和治疗的可靠方法。 黄玉宝 叶长生 黄祥成 程霞 刘民锋关键词:乳管镜 乳头溢液 乳头状瘤 面向B超图像分割的动态权重因子水平集方法 2015年 目的研究和改进水平集方法,实现B超图像中病灶区域的准确快速分割。方法分析已有水平集方法在B超图像处理中的局限,基于区域水平集的优点,将信息论中的熵引入图像处理,定义动态权重因子,准确反映局部灰度阶梯变化状况,定量度量轮廓线像素点分别受到趋向目标、背景区域的两种作用力的动态权重,将其融合到区域水平集中,迭代引导曲线形变和位移。由于B超图像病灶分割属于指定区域的局部分割,所以将计算约束到局部范围,从而明显降低运算代价。结果动态权重因子水平集方法能够较好分割B超图像中的病灶区域,与几种主流水平集方法相比,本文方法精度更高,时间复杂度更小。结论动态权重因子方法能够更合理准确地判断病灶边界像素点,局部计算策略有效地提高了分割效率。 杨谊 喻德旷 申洪 刘民锋关键词:水平集方法 图像熵