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应用套式PCR克隆ST13基因cDNA的5'端序列被引量：3: 1999年; 目的获得ＳＴ１３基因ｃＤＮＡ５′端的未知序列。方法应用套式ＰＣＲ方法直接从ｃＤＮＡ文库中扩增该基因的５′端序列，然后将扩增的片段克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ．ｅａｓｙ载体，并进行序列分析。结果第１次ＰＣＲ后得到１条约５５０ｂｐ的片段，经套式ＰＣＲ后获得１条约４８０ｂｐ的片段，经序列分析证实该扩增的片段是ＳＴ１３基因ｃＤＮＡ的５′端未知序列。结论套式ＰＣＲ技术是克隆基因ｃＤＮＡ的５′端未知序列较简捷、有效的方法。; 耿礼义蔡心涵曹江方永明; 关键词：聚合酶链反应 CDNA

p53反义RNA对肠癌细胞恶性表型的抑制作用被引量：17: 1997年; 研究ｐ５３反义ＲＮＡ对大肠癌细胞中突变型ｐ５３致癌性的抑制效应，为肿瘤基因治疗提供新思路。方法２．１ｋｂ的人ｐ５３全长ｃＤＮＡ反向插入哺乳动物表达载体ｐＲＥＰ９，得到ｐ５３反义ＲＮＡ表达载体ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ），并将其导入人肠癌细胞株ＳＷ１１１６（内源性突变型ｐ５３），采用ＭＴＴ和ＦＣＭ方法测定ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ）表达的ｐ５３反义ＲＮＡ对ＳＷ１１１６细胞生长的影响。结果带有ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ）的ＳＷ１１１６细胞，与对照组ＳＷ１１１６细胞和带ｐＲＥＰ９空载体的ＳＷ１１１６细胞相比，由于ｐ５３反义ＲＮＡ的表达，其增殖速度显著下降，ＦＣＭ的结果也证明带ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ）的细胞部分受阻于Ｇ０／１期，而带ｐＲＥＰ９空载体的细胞则无明显变化。结论ｐ５３反义ＲＮＡ可以有效地抑制大肠癌细胞中突变型ｐ５３的致癌性。; 曹江滕理送蔡心涵耿礼义郑树; 关键词：大肠肿瘤 P53基因肿瘤抑制基因反义RNA

应用套式PCR克隆ST13基因cDNA的5′端序列: 目的 ST13基因是通过减式杂交获得的一大肠癌负相关基因,由于构建cDNA文库时ST13基因的cDNA的5′端部分缺损。经减式杂交所获得ST13基因cDNA片段有完整的3′端, 但缺少5′端部分开放阅读框架,故须获得该基...; 耿礼义蔡心涵曹江方永明; 文献传递

大肠癌新相关基因 HSU17714 的染色体定位研究被引量：12: 1997年; 目的确定大肠癌新相关基因ＨＳＵ１７７１４的染色体定位。方法采用强化荧光原位杂交技术（ＦＩＳＨ），以生物素化酪胺强化荧光原位杂交信号。结果８０．０％（１２８／１６０）的间期细胞和５９．８％（１０４／１７４）的中期分裂相可见到明显集中的ＨＳＵ１７７１４基因的杂交信号，相应荧光Ｒ带分析中，８５．１％（４０／４７）在２２号染色体上１区３带处有杂交信号。结论ＨＳＵ１７７１４基因定位于２２ｑ１３。; 蔡心涵张颜明耿礼义曹江郑树; 关键词：癌基因染色体原位杂交大肠肿瘤

家族性腺瘤性息肉病肠粘膜、腺瘤及癌组织的基因蛋白检测与意义被引量：1: 1998年; 研究家族性腺癌性息肉病（FAP）癌变过程中P21－H－ras、EGFR和P53的变化与意义。方法：用ABC免疫组化方法检测并比较以上三种指标在41例FAP患者的正常肠粘膜、腺瘤和癌组织标本中表达情况。结果：P21－H－ras、EGFR及P53在正常肠粘膜中阳性表达率分别为0、4．7％与0，在腺癌中为29．3％、35．4％与20．8％，癌组织中为47．4％、60．6％与52．6％，癌与腺癌的阳性率都显著高于正常肠粘膜（P＜0．05）；P21－H－ras、EGFR在癌组织中的阳性率高于腺瘤，但差别不显著（P＞0．05），P53在癌的阳性率显著高于腺癌（P＜0．05）。癌组织有2个以上指标阳性者占55．6％，3个都阳性者占27．3％；腺瘤中分别为13．2％与4．4％，差别显著（P＜0．05）。结论：提示P21－H－ras、EGFR、P53基因都参与FAP癌变，P21－H－ras基因、EGFR可能作用于早期，P53基因则作用于晚期。检测P21－H－ras、EGFR、P53对早期诊断FAP癌变有一定意义。; 刘剑郑树冯懿正陈丽荣黄学峰耿礼义彭加萍; 关键词：息肉腺瘤性肠粘膜 P21基因 FAP

腺瘤性结肠息肉基因突变的检测被引量：4: 1994年; 报道了腺瘤性结肠息肉（ＡＰＣ）基因突变位点的聚合酶链反应－限制性片断长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法。７个家族性腺瘤性息肉病（ＦＡＰ）家系中发现１个家系有该基因１３０９－１３ｌｌ密码子区域ＡＡＡＧＡ片断的缺失，并得到了序列分析证实。通过该家系亲缘族的检查，发现了２例青年病人，其结果与纤维肠镜检查结果一致。为早期发现部分ＦＡＰ患者提供了一个简便、可靠的检测手段。本文结果也表明中国人ＦＡＰ患者存在与西方国家相同的ＡＰＣ基因的突变方式。; 干月波郑树蔡心涵刘剑耿礼义; 关键词：结肠息肉息肉基因聚合酶链反应

减式杂交筛检大肠癌负相关基因的研究被引量：18: 1997年; 目的在分子水平寻找与人大肠癌的发生发展相关的新的因素。方法采用减式杂交技术筛选大肠癌下调基因。结果共获得４６个在正常肠粘膜中表达、而在大肠癌中低表达或不表达的克隆。其中２个（ＳＮＣ６和ＳＮＣ１９）已被ＮＣＢＩ作为新基因录入，编号分别为Ｕ１７７１４（ＳＮＣ６）和Ｕ２０４２８（ＳＮＣ１９）。其中ＳＮＣ６已完成全序列测定，为２９３２ｂｐ，推测其为编码２７１个氨基酸的蛋白，分子量为３００００。与蛋白数据库比较，最高同源性仅３０％，染色体定位于２２ｑ１３。ＲＮＡｄｏｔｂｌｏｔ显示：ＳＮＣ６的表达在大肠癌中低于在相应的正常肠粘膜中，在乳癌中亦有此现象。ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ发现其在肝、肺、前列腺、睾丸、卵巢及Ｋ５６２细胞中的表达高于其它组织。结论ＳＮＣ６可作为新的大肠癌负相关基因加以研究、利用。; 郑树蔡心涵曹江郑雷郑雷张颜明莫益群施正政张颜明; 关键词：结肠肿瘤基因

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耿礼义