李燕宏
- 作品数:7 被引量:51H指数:4
- 供职机构:浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划浙江省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 单抗免疫斑点法和组织印迹法检测百合无症病毒被引量:13
- 2006年
- 应用抗百合无症病毒(Lilysymptomlessvirus,LSV)的单克隆抗体,建立了快速检测田间样品的免疫斑点法(Dot-ELISA)和组织印迹法(Tissueblot-ELISA)体系。LSV单抗稀释2,000倍时,Dot-ELISA中病叶粗汁液可被检出的最大稀释度为1∶640。Tissueblot-ELISA中样品一次平切后第1次印迹与Dot-ELISA样品1∶40稀释的结果相当,前4次印迹均可获得满意的显色效果。常规Tissueblot-ELISA的灵敏度低于Dot-ELISA,但用丙酮处理点过样的硝酸纤维素膜后,二者的灵敏度相当,且Tissueblot-ELISA操作更简便,适合田间大量样品的快速检测。
- 李燕宏吴建祥洪健周雪平叶美琴
- 关键词:百合无症病毒单克隆抗体免疫斑点法
- 百合无症病毒单克隆抗体制备及快速检测方法的建立被引量:7
- 2005年
- 百合无症病毒(Lily symptomles virus,LSV)属于线形病毒科(Flexiviridae)、麝香石竹潜隐病毒属 (Carlavirus),是危害百合的主要病毒之一。LSV 的寄主范围很窄,只限于百合科(Liliaceae)植物, 单独侵染百合常为隐症,与其他病毒复合侵染时产生花叶、畸形、坏死斑等症状,严重影响百合切花的经济价值。近年来,我国百合种植规模不断扩大, 病毒病发生日趋严重。为了防止病毒随种球扩散与传播,迫切需要建立灵敏、快速的病毒检测方法。我们在百合病毒分子生物学研究的基础上,首次成功制备了LSV单克隆抗体,建立了以单抗为核心的间接抗原包被ELISA(ACP-ELISA)、三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)、免疫斑点法(Dot-ELISA) 和组织印迹法(Tissue blot-ELISA)等快速检测 LSV的方法。
- 刘成科吴建祥李燕宏洪健周雪平
- 关键词:百合无症病毒单克隆抗体ACP免疫斑点法病毒检测ELISA
- 蚕豆萎蔫病毒2号分离物PV131和P158侵染寄主植物的细胞病理比较观察被引量:5
- 2009年
- 透射电镜观察比较了蚕豆萎蔫病毒2号(BBWV-2)分离物PV131和P158侵染昆诺藜(Chenopodium quinoa)和蚕豆(Viciafaba)的细胞超微结构变化。结果显示:受PV131分离物侵染的昆诺藜叶肉细胞质中膜结构大量增生,形成有膜状结构、大小泡囊及电子致密物质的特殊膜增生区;病毒粒子散布在细胞质中,形成大块结晶体和管状结构,该管状结构直径约75nm,横切面由9个病毒粒子组成;受PV131侵染的蚕豆叶肉细胞中也形成膜增生区和管状结构,未见病毒结晶体。受P158分离物侵染的昆诺藜和蚕豆叶肉细胞病变情况与PV131分离物相似,形成膜增生区和相同的管状结构,在蚕豆叶肉细胞中也未观察到病毒结晶体。上述结果表明:2个BBWV-2分离物虽然在不同寄主植物上引起的细胞病变程度有差异,但其细胞病理学特征是由病毒基因结构所决定,与寄主的种类无关。
- 刘成科李燕宏王卫兵洪健周雪平
- 关键词:细胞病理学电子显微镜
- 蚕豆萎蔫病毒2号不同分离物对蚕豆光合机构超微结构和光合活性的影响
- 病毒侵染植物常引起花叶、褪绿、斑驳等系统症状,导致寄主生理功能发生改变,其中光合作用的变化尤为显著。近年来国内外相继报道了烟草花叶病毒等多种病毒对寄主植物的光合速率、电子传递、叶绿素荧光诱导动力学和低温荧光发射光谱的影响...
- 李燕宏洪健
- 文献传递
- 百合无症病毒单克隆抗体制备及快速检测方法的建立
- 百合无症病毒(Lily symptomles virus,LSV)属于线形病毒科(Flexiviridae)、麝香石竹潜隐病毒属 (Carlavirus),是危害百合的主要病毒之一。LSV 的寄主范围很窄,只限于百合科(...
- 刘成科吴建祥李燕宏洪健周雪平
- 蚕豆萎蔫病毒2号分离物侵染对蚕豆叶片光合活性和叶绿体超微结构的影响被引量:28
- 2006年
- 研究了受蚕豆萎蔫病毒2号(Broadbeanwiltvirus2,BBWV2)中国分离物B935和欧洲分离物PV131侵染的蚕豆(Vicicafaba)叶片光合特性、叶绿素荧光诱导动力学参数和叶绿体超微结构变化。感病蚕豆叶绿素含量减少,叶绿素a/b比逐步降低;光合气体交换参数Pn值和Gs值降低,Ci值升高;叶绿素荧光诱导动力学参数Fv/Fm、Fv'/Fm'、ΦPSII、qP值均有不同程度降低,NPQ值升高;光合器结构遭到不同程度的破坏,B935侵染后叶绿体发育不良,片层结构疏松,PV131侵染后叶绿体肿胀变圆,片层结构疏松瓦解。与B935相比,PV131侵染对以上各参数的变化有更大影响,且对叶绿体的破坏更为严重。实验结果表明BBWV2不同分离物对光系统II(PSII)的抑制作用与光合器受损程度相关。
- 李燕宏洪健谢礼杨勇周雪平蒋德安
- 关键词:蚕豆叶绿体超微结构叶绿素荧光
- 蚕豆萎蔫病毒侵染寄主植物的光合生理抑制和细胞病理学研究
- 蚕豆萎蔫病毒2(BBWV 2)在我国广泛发生,对许多经济作物造成严重危害。本实验运用电子显微镜技术研究了BBWV 2和BBWV 1的几个分离物分别侵染寄主后产生的一系列细胞病理变化,并且通过对光合气体交换参数、叶绿体荧光...
- 李燕宏
- 关键词:蚕豆萎蔫病毒细胞病理学叶绿体微管骨架
- 文献传递