洪健
- 作品数:201 被引量:1,042H指数:18
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 建兰花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用被引量:10
- 2007年
- 用建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得3株能稳定传代并分泌抗CymMV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞(2C6、5B7和12G9),分别制备它们的单抗腹水。其中5B7和12G92株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,3株单抗的抗体类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链。利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)检测CymMV的方法。蝴蝶兰病叶作1∶10240倍稀释、提纯CymMV病毒浓度为4.87ng/mL(每孔的病毒绝对量为0.487ng)时,该方法仍能检测到病毒。利用ACP-ELISA方法检测了田间样品,发现CymMV在兰花上发病很普遍。
- 孟春梅吴建祥谢礼郑锦凯洪健周雪平
- 关键词:建兰花叶病毒单克隆抗体
- 七种天蚕蛾科昆虫卵壳气孔的扫描电镜观察被引量:2
- 1992年
- 应用扫描电镜观察了七种天蚕蛾科昆虫卵的气孔结构,发现在柞蚕Antheraeapernyi和天蚕A.yamamai的大型围壁式气孔及樟蚕Eriogyna pyretorum的气孔(无围壁)中均存在着一个特殊的档板样结构,而在天蚕的小型围壁式气孔以及绿尾大蚕蛾Actias selene、樗蚕Philosamia cynthia、蓖麻蚕P.cynthia ricina、栗蚕Dictyoplocajaponica的气孔中则无类似结构。这一结构在国内外尚乏明确、详尽记载。该档板样结构似乎仅存在于开口较大的气孔通道内,根据其超微结构和气孔实际开口状况,很可能是一种控制气孔开闭程度的调节机构,在大型昆虫卵胚胎发育期间的呼吸中起着重要的作用。
- 洪健胡萃叶恭银
- 关键词:扫描电镜天蚕蛾科
- 一种昆虫触角的透射电镜样品处理方法
- 本发明属于实验样品处理技术领域,涉及一种昆虫触角的样品处理方法,尤其涉及一种昆虫触角的透射电镜样品处理方法,依次由下述步骤组成,A.固定液的配制、B.各种包埋剂的配制、C.解剖、固定和漂洗、D.脱水和浸透、E.聚合,从而...
- 付丙鲜祝增荣洪健
- 文献传递
- 葡萄扇叶病毒移动蛋白在寄主体内的动态检测和免疫金标记被引量:13
- 2002年
- 利用葡萄扇叶病毒法国分离物F1 3 (Grapenivefanleafvirus,GFLV F1 3 )移动蛋白抗体对杭州分离物 (GFLV H)移动蛋白进行Westernblot,分析表明移动蛋白在接种GFLV H 3d后的苋色藜 (Chenopodiumamaranticolor)系统叶中就可检测到 ,随着时间推移 ,其积累量逐渐升高 ,接种 1 6d后达到最高值。接种 3 2d后的病叶已经枯黄 ,但移动蛋白积累量并没有减少。超薄切片电镜观察发现 ,在感染GFLV H的昆诺藜 (C .quinoa)和苋色藜的叶肉组织薄壁细胞中 ,病毒粒子呈纵列整齐地排列在小管状结构中 ,在胞间连丝中也发现有管状结构。免疫金标记显示胶体金能定位在细胞质、细胞壁和胞间连丝上 ,在管状结构也发现有少量的金粒子。
- 李红叶周雪平洪健陈力耕
- 关键词:葡萄扇叶病毒寄主动态检测
- 桑蚕前胸腺超微形态的观察
- 周乃明徐俊良洪健
- 关键词:超微结构前胸腺
- 水稻Rubisco及其活化酶的免疫金标定位被引量:7
- 2003年
- 采用免疫胶体金标记电镜技术对水稻叶片中的Rubisco及其活化酶进行细胞器定位,结果表明Rubisco主要分布于叶绿体,Rubisco活化酶特异性分布于叶绿体和线粒体中,预示Rubisco活化酶可能具有除活化钝化态Rubisco以外的其他功能.
- 王妮妍蒋德安张峰洪健费万辛
- 关键词:水稻RUBISCORUBISCO活化酶细胞器叶绿体线粒体
- RBSDV在玉米叶脉细胞内的侵染状态与灰飞虱传毒活力的关系被引量:20
- 2004年
- 根据水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)侵染玉米(Zea mays L.)的症状发展过程先后取叶脉做超薄切片,在透射电镜下观察病毒在细胞内的侵染状态,并在取样前用灰飞虱无毒若虫进行饲毒和传毒试验。结果显示RBSDV侵入玉米叶细胞后先出现在细胞壁附近,个别粒子似与胞间连丝相连;细胞质内产生病毒基质,病毒粒子先增殖并分布其周边,后向病毒基质内扩展;当病毒粒子布满病毒基质后在细胞质中出现直径约90nm的管状结构,病毒成串排列在该管状结构中;随后管状结构逐渐消失,最终形成晶格状聚集排列。用灰飞虱无毒若虫在细胞内病毒基质出现和病毒增殖期饲毒的,到成虫时分别有2.93%和7.83%个体传毒率;在细胞内病毒成串分布于管状结构和晶格状聚集排列期饲毒的,到成虫时均不能传毒。
- 陈声祥洪健吕永平雷娟利
- 关键词:水稻黑条矮缩病毒侵染玉米症状细胞灰飞虱
- 小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和小麦黄花叶病毒(WYMV)的细胞质内含体的电镜观察被引量:8
- 1991年
- 小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和小麦黄花叶病毒(WYMV)分别感染小麦(Triticum aestivum L.)后所诱发的细胞质内含体和细胞嚣病变几乎完全相同。感病的叶肉细胞、表皮细胞和木质部薄壁细胞的细胞质中都可看到大量风轮体、柱状体、板状集结体和膜状体,其中以叶肉细胞中更为普遍。风轮体成群出现、同一组内风轮体常平行排列,而相邻群间常垂直排列。膜状体的内部常夹杂着许多小囊泡,其四周与内质网呈辐射状相连。在发病初期的心叶叶肉细胞质的液泡附近可看到颗粒状病毒束,而分散的病毒状颗粒则多见于发病中后期坏死的细胞中。感病细胞的叶绿体、线粒体、核、质膜及胞间联丝中均未见病毒状颗粒。感染病毒的细胞中,细胞质丰富、内质网膨大,核糖体增加、小囊泡大量出现,随着病害的加重,叶绿体、线粒体逐渐肿大,基粒缩小、膜破裂、类囊物流入细胞中。
- 阮义理陈剑平洪健
- 关键词:小麦花叶病毒
- 适用于狭缝载网捞片的组合器具
- 本实用新型公开了一种适用于狭缝载网捞片的组合器具。包括放样台和捞样器;放样台呈方形,放样台顶面的每个边缘间隔均布设有平行排列的放样孔,放样孔由一圆形盲孔以及与盲孔连接的条形槽构成,条形槽开在放样台边缘,狭缝载网放在放样孔...
- 付丙鲜洪健祝增荣
- 文献传递
- 百合无症病毒单克隆抗体制备及快速检测方法的建立被引量:7
- 2005年
- 百合无症病毒(Lily symptomles virus,LSV)属于线形病毒科(Flexiviridae)、麝香石竹潜隐病毒属 (Carlavirus),是危害百合的主要病毒之一。LSV 的寄主范围很窄,只限于百合科(Liliaceae)植物, 单独侵染百合常为隐症,与其他病毒复合侵染时产生花叶、畸形、坏死斑等症状,严重影响百合切花的经济价值。近年来,我国百合种植规模不断扩大, 病毒病发生日趋严重。为了防止病毒随种球扩散与传播,迫切需要建立灵敏、快速的病毒检测方法。我们在百合病毒分子生物学研究的基础上,首次成功制备了LSV单克隆抗体,建立了以单抗为核心的间接抗原包被ELISA(ACP-ELISA)、三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)、免疫斑点法(Dot-ELISA) 和组织印迹法(Tissue blot-ELISA)等快速检测 LSV的方法。
- 刘成科吴建祥李燕宏洪健周雪平
- 关键词:百合无症病毒单克隆抗体ACP免疫斑点法病毒检测ELISA