李晨
- 作品数:18 被引量:23H指数:2
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学建筑科学医药卫生更多>>
- 甘蓝型油菜BnADC基因的克隆及原核表达被引量:1
- 2012年
- 利用同源克隆和RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术从甘蓝型油菜中克隆到精氨酸脱羧酶(Arginine decarboxylase,ADC)基因cDNA全长序列,命名为BnADC。BnADC全长为2 649bp,包含344bp的5'非翻译区(5'Untranslated region,5'-UTR)、226bp的3'非翻译区(3'Untranslated region,3'-UTR)和2 079bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码75.1kD的蛋白质。5'-UTR中含有12bp的uORF(Upstream open readingframe),编码MIRE 4个氨基酸。氨基酸同源性比对表明,BnADC蛋白与其他植物ADC蛋白具有很高的相似性,与芥菜的同源性高达93%;系统进化树分析表明,BnADC与芥菜、拟南芥的ADC亲缘关系较近。在获得全长cDNA的基础上,构建融合表达载体pET30a(+)-BnADC,转化大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌株BL21(DE3),SDS-PAGE检测到一个约81.1kD的融合蛋白被E.coil表达,且融合蛋白主要存在于菌体沉淀中。
- 洪林闫晓红袁亚宾刘王辉胡长清李晨陈春丽魏文辉
- 关键词:甘蓝型油菜同源克隆RACE原核表达
- 一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用
- 本发明属于抗病毒生物制品技术领域,公开了一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用。根据日本脑炎病毒EDIII结构域的loop肽中筛选确定一个三肽,其序列为:NSK。体外实验结果显示用此肽预处理BHK-21细胞,能明显干扰...
- 茅翔李晨于亚玲葛玲玲王月孙明霞
- 文献传递
- 甘蓝型油菜ADC基因片段的克隆及序列分析被引量:1
- 2012年
- 【目的】克隆甘蓝型油菜精氨酸脱羧酶(ADC)基因的cDNA片段,为进一步获得ADC基因全长及研究其的生物学功能奠定基础。【方法】以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)品种中双6号的花蕾为材料,设计简并引物,采用同源克隆法扩增ADC基因的cDNA片段。【结果】成功扩增获得8个不同的ADC基因拷贝,按长度将其分为1011、999、981bp3类,8个拷贝核苷酸序列之间的同源性为81%~99%,其推导氨基酸序列之间的同源性为86%~99%。1011bp片段包含3种不同的序列S1~S3,序列间存在9个单核苷酸多态性(SNP)位点。999bp序列包含S4和S5,具有3个SNP位点,两个区段出现连续碱基缺失。981bp序列包含S6~S8,发现14个SNP位点,且第67位核苷酸出现无义突变,4个区段发生碱基缺失。序列S4~S8共同缺失第632~634、642~650位的核苷酸小片段。氨基酸同源比对和系统进化分析结果表明,8个不同ADC基因拷贝与芥菜(Brassica juncea L.)、拟南芥(Arabidopsis thaliana L.)、盐芥(Thellungiella halophila L.)等物种的ADC基因同源性高,亲缘关系近。【结论】所获得的8个基因拷贝即为来自于甘蓝型油菜ADC基因的片段。
- 洪林闫晓红李晨刘正富魏文辉
- 关键词:甘蓝型油菜同源克隆
- 江苏滨海盐碱地“棉花-土壤”水盐变化的光谱监测研究
- 盐碱地是滨海地区限制土地生产力的重要限制因素,在作物生长和生产过程中受到水盐胁迫影响,严重影响着地区农业发展。棉花作为盐碱地的先锋作物,大力提高监测棉田作物水盐变化以及棉田土壤水盐变化对于棉花的产量和品质至关重要。本研究...
- 李晨
- 关键词:棉花盐碱地
- 文献传递
- 南京中小型城市水体公园微气候研究
- 城市公共空间是城市居民必不可少的户外活动空间,而城市范围内的微气候是直接对其中生活的广大城市居民施加影响的。其中,公园作为城市主要的公共开放空间之一,对人们的生活有重要影响。目前,国内外很多学者就城市公园绿地对微气候的影...
- 李晨
- 关键词:规划设计微气候
- 一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用
- 本发明属于抗病毒生物制品技术领域,公开了一种具有抗日本脑炎病毒感染的三肽及其应用。根据日本脑炎病毒EDIII结构域的loop肽中筛选确定一个三肽,其序列为:NSK。体外实验结果显示用此肽预处理BHK-21细胞,能明显干扰...
- 茅翔李晨于亚玲葛玲玲王月孙明霞
- 一种只有35bpfrt位点序列的重组载体及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种只有35bpfrt位点序列的重组载体及其构建方法与应用,即一种含有截短的单个Frt特异性重组位点的表达载体的构建方法和应用,其特征序列为SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列,其构建方法步骤为:A.质粒p...
- 魏文辉李晨
- 文献传递
- 一种36bplox位点序列的重组载体及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种36bplox位点序列的重组载体及其构建方法与应用,利用Sac?I和Sma?I内切酶切除pBI121载体中的GUS基因。设计特定引物lox66-Cre-5’和Sac?I-cre-3’,利用LA-Taq酶扩...
- 魏文辉李晨
- 文献传递
- 植物基因叠加技术的研究进展被引量:2
- 2011年
- 将不同外源基因转入植物并实施基因叠加是植物基因工程技术发展的一个重要方向。虽然在商业化的转基因作物中,一部分已经实现了基因叠加和优良性状的重组,但只是极少数转基因事件实现了3个或者更多外源基因的导入。为此,综述了基因叠加的几种主要方法,分析了其面临的问题,并对其发展前景进行了展望。
- 谭茂玲李晨闫晓红梁国鲁魏文辉
- 关键词:植物转基因
- 日本脑炎病毒入胞抑制肽及宿主蛋白DDX3、DDX5在日本脑炎病毒复制中作用的研究
- 日本脑炎(JapaneseEncephalitis,JE)是由日本脑炎病毒(Japaneseencephalitisvirus,JEV)经蚊虫传播而引起的一种严重的人畜共患的病毒性疾病,日本脑炎病毒属于黄病毒科,黄病毒属...
- 李晨
- 关键词:RNA复制日本脑炎病毒