徐进文
- 作品数:44 被引量:187H指数:8
- 供职机构:广州中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省高等教育教学改革项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- PPARγ基因RNA干扰质粒的构建与鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的构建表达细胞转录因子 PPARγ的 RNA 干扰(RNAi)质粒,为研究 PPARγ参与的细胞信号通路以及 PPARγ为靶点的基因治疗提供稳定转染的 RNA 干扰质粒。方法选取PPARγ基因的 19 nt 特异性序列,设计针对 PPARγ的 shRNA 序列,应用基因重组技术克隆到 pSilencer 1.0-U6表达载体中,用 EcoR I、Apa I 进行双酶切和 DNA 测序鉴定重组克隆 , 在脂质体的介导下将包含 PPARγ基因的 RNAi 重组载体转染前列腺癌细胞 PC-3。转染 48 h 后 , 收集细胞裂解液,Western blotting 分析对照组与转染组 PPARγ蛋白的表达水平。结果双酶切证实 shRNA 正确插入 pSilencer 1.0-U6 质粒,DNA 测序证实插入的序列正确;含 PPARγ基因的 RNAi 载体转染前列腺癌细胞 PC-3 细胞成功;Western blotting 结果显示,与空质粒对照组相比,转染组细胞 PPARγ表达下调。结论成功构建含人 PPARγ基因的 RNAi 载体,为研究 PPARγ参与的细胞信号通路提供了稳定转染的 RNA 干扰质粒。同时,阻断PPARγ的信号通路将为基因治疗提供一个较好的靶点,研究结果为以 PPARγ为靶点的基因治疗提供了有利工具。
- 龚青徐进文徐祖敏高国全
- 关键词:PPAR-ΓRNAI
- 补阳还五汤对全脑缺血再灌注后大鼠皮层神经元NR2B mRNA表达的影响被引量:3
- 2015年
- 目的观察补阳还五汤对全脑缺血再灌注后大鼠皮层神经元NR2B mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤抗全脑缺血后再灌注损伤的分子机制。方法 SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和药物组(补阳还五汤预干预),模型组和药物组再分别设置2、24h两个观察时间点。连续给药5 d后,采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,再灌后2、24 h采用RT-PCR技术检测各组大鼠皮质神经细胞NMDA受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor)亚单位NR2B的mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组2h、24h等2个不同时间点,NR2B的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,药物组再灌注后2h、24h等2个不同时间点,NR2B mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论补阳还五汤干预对全脑缺血再灌注模型大鼠大脑皮层神经元NR2B mRNA表达水平的增高有调低作用。
- 关莉刘微闫福曼周乐全李小英徐进文刘海梅
- 关键词:补阳还五汤脑缺血再灌注大脑皮质NR2B
- 毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响被引量:10
- 2015年
- 目的考察毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组,模型组,毛冬青皂苷E低、中、高剂量对照组(10,50,250μg·m L-1)、毛冬青皂苷E低、中、高剂量治疗组(10,50,250μg·m L-1)。造模前24 h给予相应浓度的药物预处理,缺氧4 h,复氧4 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,并采用蛋白印迹法(Western Blot)检测Caspase-3和Cleaved caspase-3凋亡蛋白的表达。结果缺氧/复氧后,与正常对照组比较,模型组细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞内ROS含量显著升高(P<0.01),毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,细胞存活率增加,ROS含量降低。缺氧/复氧损伤可使Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达增加。毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达均下降。结论毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与减少ROS生成,抑制凋亡相关蛋白Caspase-3和Cleaved caspase-3的表达有关。
- 张双伟李润美徐进文汪芳强皎李爱群张军
- 关键词:H9C2心肌细胞
- 二仙汤对卵巢切除大鼠胰岛素敏感性的影响被引量:2
- 2015年
- 目的观察二仙汤对卵巢切除大鼠胰岛素敏感性的影响及其机制。方法取SD大鼠40只,随机分为5组,每组8只,即假手术组,模型组,二仙汤低、高剂量组(30,60 mg·kg-1),雌激素组(0.01 mg·kg-1)。灌胃给药连续治疗14周后,检测各组大鼠血糖、血清胰岛素、糖耐量,并计算胰岛素抵抗指数;应用CT检测各组大鼠腹腔内脂肪及皮下脂肪的相对量;应用q PCR技术检测各组大鼠腹腔内脂肪中MCP-1、脂联素的m RNA相对量。结果各组大鼠空腹血糖水平差异无统计学意义;模型组大鼠血清胰岛素水平显著高于假手术组;模型组大鼠胰岛素抵抗指数显著高于假手术组,二仙汤治疗后可降低卵巢切除大鼠胰岛素抵抗指数;CT结果显示,卵巢切除大鼠腹腔内脂肪含量显著高于假手术组,二仙汤治疗后脂肪含量显著下降;二仙汤治疗后能改善卵巢切除大鼠糖耐量并降低胰岛素抵抗指数;卵巢切除后大鼠腹腔内脂肪中MCP-1 m RNA水平表达升高而脂联素的m RNA表达水平下降,二仙汤治疗后脂肪MCP-1的m RNA表达水平下降而脂联素的m RNA表达水平升高。结论二仙汤可提高卵巢切除大鼠胰岛素敏感性,这可能与其改善卵巢切除大鼠腹腔内脂肪内分泌功能有关。
- 薛倩倩许筱凰周乐全刘海梅闫福曼李小英李润美徐进文
- 关键词:二仙汤卵巢切除大鼠绝经胰岛素敏感性
- 雌激素通过改善内脏脂肪功能影响血脂、胰岛素敏感性
- 绝经期妇女最为显著的生理变化之一是性激素水平的骤然下降,尤其是雌激素水平的降低。这可能是导致绝经期妇女心血管疾病发病风险升高的重要原因。研究发现雌激素主要通过两种方式发挥对心血管系统的保护作用。一方面,雌激素可直接作用于...
- 徐进文
- 关键词:绝经期综合征雌激素疗法17Β-雌二醇实验药理
- 文献传递
- TBL教学在生理学教学中的应用被引量:13
- 2013年
- TBL(Team-based learning)教学是一种基于PBL(Problem-bosed learning)的强调以小组为单位的集体性学习,对提升整个组织的学习能力,创新能力和可持续发展能力具有十分重要的作用。本研究通过在生理学适当章节推行TBL教学,并和传统教学方法进行研究对比。结果提示TBL教学可培养学生的学习兴趣及学习积极性,使学生掌握科学的学习、思维方法,并增强团队合作能力;同时也促进了师生间的相互交流,提高了生理学教学质量。
- 刘海梅闫福曼徐进文李小英周乐全张晓东
- 关键词:生理学教学方法
- 17β-雌二醇对新生牛血清诱导的血管平滑肌细胞增殖反应的影响及其机制被引量:2
- 2009年
- 目的:探讨雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,17β-二醇(17β-雌二醇)对新生牛血清诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖反应的影响及其机制。方法:用新生牛血清刺激培养的VSMCs增殖,MTT法检测17β-雌二醇对新生牛血清诱导的VSMCs增殖的影响,并用Western blot检测caveolin-1蛋白,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及NO在此过程中的变化。结果:与对照组比,新生牛血清可促进VSMCs增殖(P<0.05),17β-雌二醇作用24 h后能明显抑制上述作用(P<0.05);17β-雌二醇预处理可抑制新生牛血清诱导的VSMCs中caveolin-1,iNOS蛋白表达下降及NO释放(P<0.05);17β-雌二醇受体阻断剂1-{4-[2-(n,n-二甲氨基)乙氧基]苯}-1,2-二苯-1-丁烯(他莫昔芬)预处理可部分逆转17β-雌二醇的抑制作用(P<0.05)。结论:17β-雌二醇通过其受体可抑制新生牛血清诱导的VSMCs增殖,此过程与上调caveolin-1蛋白表达,激活iNOS,增加NO释放有关。
- 刘海梅赵晓峰徐进文林桂平王庭槐
- 关键词:17Β-雌二醇CAVEOLIN-1诱导型一氧化氮合酶
- 白藜芦醇调节STIM1抗动脉粥样硬化的机制被引量:6
- 2017年
- 目的:实验利用apoE^(-/-)小鼠高脂喂养建立动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型,观察基质相互作用因子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)在白藜芦醇抗AS中的具体机制。方法:雌性apoE^(-/-)小鼠卵巢切除后高脂喂养建立AS模型,实验分为正常组、模型组、白藜芦醇低、中、高剂量(50,100,150 mg·kg^(-1))组及补充雌激素组(0.3 mg·kg^(-1))。分别检测各组小鼠血清中血脂4项,油红O染色观察胸主动脉形态改变,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析各组小鼠血管组织中STIM1,钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)及雌激素受体α(ERα)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分析各组小鼠血管组织中STIM1及Orai1 mRNA表达情况。结果:与正常组比较,模型组血清中总胆固醇(CHOL),甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量明显下降(P<0.05),给予白藜芦醇及雌激素后可明显降低高脂饮食所致的CHOL,TG及LDL-C明显升高,并可明显增加HDL-C含量(P<0.05)。油红O染色显示:正常组血管结构完整、清晰、内膜连续;模型组内膜增厚、可见明显脂质斑块;而加入不同剂量白藜芦醇或雌激素后,内膜增厚减轻且内膜下脂质斑块显著减少。Western blot及Real-time PCR结果显示:与正常组比较,模型组STIM1,Orai1蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05),而加入不同剂量白藜芦醇或雌激素后STIM1,Orai1蛋白及mRNA表达较模型组均明显下降(P<0.05);同时Western blot结果还显示,与模型组比较,加入不同剂量白藜芦醇或雌激素后均可增加血管组织中ERα表达。结论:白藜芦醇可通过增加ERα表达,下调STIM1及Orai1表达,抑制钙池操纵性钙通道(SOCC)介导的钙内流,延缓AS发生。
- 伍志学张韧林锐珊徐进文闫福曼刘海梅
- 关键词:白藜芦醇动脉粥样硬化雌激素受体Α
- 寓“思政”教育于生理学实验课程教学
- 2021年
- "生理学"是医学院校的基础课程,而实验教学又是生理学教学的重要组成部分。如何在生理学实验教学过程中融入思政元素,在提高学生专业素质的同时潜移默化地提升学生的职业素养,真正做到"守好一段渠,种好责任田",培养德才兼备的高素质医学人才,是生理学实验教学改革的关键。
- 刘海梅闫福曼关莉徐进文刘微
- 关键词:思政教育生理学实验教学
- TBL教学法在生理学实验课教学中的应用被引量:5
- 2012年
- 采用传统教学方式进行生理学实验课教学不利于培养学生的创新思维。基于团队模式的教学方式,即TBL教学法,是以学生主动学习为主,以团队为基础的一种新型教学方式。将TBL教学法引入生理学实验教学有利于培养学生创新科研思维及团队协作精神。本文将从TBL的概念、实施方法等方面介绍其在生理学实验教学中的应用。
- 徐进文刘海梅李小英周乐全
- 关键词:TBL教学法生理学实验课教学方法