姚春雨
- 作品数:25 被引量:105H指数:6
- 供职机构:内蒙古民族大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 2个旋毛虫新生幼虫期特异性相似cDNA的克隆及序列分析被引量:4
- 2004年
- 利用旋毛虫新生幼虫期特异性 c DNA探针 ,从新生幼虫 c DNA文库中筛选出 2个相似的旋毛虫新生幼虫期特异性 c DNA克隆 ,分别命名为 N5和 N10 ,N5长度为 12 5 0 bp,N10长度为 12 33bp。 NCBI Blast检索表明 ,2个c DNA全长序列均为旋毛虫新基因序列。DNASIS分析表明 ,N5与 N10的开放阅读框架分别为 10 14、10 17bp,编码338、339个氨基酸 ,推导的成熟蛋白氨基酸序列均为 32 1个氨基酸残基 ,相对分子质量推导值分别为 35 30 0和 354 0 0。 2个氨基酸序列中 N端均包含有一信号肽序列 ,可能为分泌性蛋白。NCBI Blast及 Inter Proscan检索表明 ,以上2个氨基酸序列均含有 型核酸酶的功能结构域 ,均编码 型核酸酶 (DNase ) ,且与已报道的旋毛虫包囊形成相关蛋白 P4 3(经鉴定也为 DNase )同源性最高。目前已有的试验结果证实 ,P4 3并未直接参与包囊的形成 ,而是一种与P4 3蛋白同源性非常高的蛋白参与了旋毛虫包囊的形成。由于 N5与 N10为旋毛虫新生幼虫期特异性表达基因 ,也就是在旋毛虫包囊形成的时期表达 ,而且与 P4 3具有较高的同源性 ,并均编码 DNase 蛋白 ,因此 N5。
- 刘明远吴秀萍付宝权卢强姚春雨李莲瑞P.Boireau
- 关键词:旋毛虫幼虫期CDNA克隆
- 旋毛虫新生幼虫cDNA文库的构建与鉴定
- 2002年
- 利用λZAPExpress载体成功地构建了中国猪株旋毛虫分离株Trichinellaspiralis新生幼虫的cDNA文库 ,并对其重组噬菌体质粒pBK—CMV进行酶切鉴定 .结果表明 :所构建的cDNA文库容量为 1 92× 10 6,重组效率为 98 6 % ,所有的克隆片段都在 0 5— 2 0Kb之间 ,说明此cDNA文库几乎覆盖了全部mRNA .
- 姚春雨李青春东彦新魏彦辉
- 关键词:酶切鉴定旋毛虫CDNA文库重组质粒猪寄生虫
- 内蒙古东部地区猪圆环病毒Ⅱ型感染的血清学调查被引量:1
- 2012年
- 本实验应用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法对内蒙古东部地区部分未经PCV-2免疫的猪场猪只329份血样进行抗体阳性检测,结果显示,不同猪场均有PCV-2感染,PCV-2抗体平均阳性率为43.8%(144/329),经产母猪阳性率为41.7%(25/60),后备母猪阳性率为41.8%(21/51),种公猪阳性感染率为50%(4/8),哺乳仔猪阳性率为45.7%(32/70),断奶仔猪阳性率为45.8%(33/72),育肥猪阳性率为42.6%(29/68).结果表明,内蒙古东部地区养猪场普遍存在猪圆环病毒II型(PCV-2)感染.
- 马德慧薛江东刘锴杨明霞姚春雨
- 关键词:猪圆环病毒2型ELISA抗体检测
- 内蒙古地区猪圆环病毒Ⅱ型感染的血清学调查
- 2014年
- 本实验应用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法对内蒙古地区部分未经PCV-2免疫的猪场猪只780份血样进行抗体阳性检测,结果显示,不同猪场均有PCV-2感染,PCV-2抗体平均阳性率为38.6%(301/780),经产母猪阳性率为38.3%(51/133),后备母猪阳性率为38.7%(46/119),种公猪阳性感染率为23.5%(8/34),哺乳仔猪阳性率为42.8%(80/187),断奶仔猪阳性率为40.9%(70/171),育肥猪阳性率为33.8%(46/136)。结果表明,内蒙古地区养猪场普遍存在猪圆环病毒II型(PCV-2)感染。
- 薛江东马德慧刘锴杨明霞姚春雨
- 关键词:猪圆环病毒2型ELISA抗体检测
- H5N2亚型禽流感病毒中药佐剂灭活苗对公雏鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响被引量:7
- 2009年
- 将200只海兰褐公雏鸡分为4组,每组50只。A组注射H5N2亚型禽流感病毒黄芪多糖油乳剂灭活苗;B组注射H5N2亚型禽流感病毒人参皂苷油乳剂灭活苗;C组注射H5N2亚型禽流感病毒普通油乳剂灭活苗;D组注射生理盐水油乳剂(空白对照)。分别在免疫前随机选取5只鸡心脏采血,EDTA抗凝。于免疫后5、12、19 d每组每次分别随机选取5只鸡心脏采血,EDTA抗凝,检查各阶段各组鸡外周血T淋巴细胞亚群变化情况。结果表明,免疫后第12天,黄芪多糖和人参皂苷可提高CD4+/CD8+淋巴细胞的比值,与普通疫苗和对照组相比,差异极显著(P<0.01);黄芪多糖和人参皂苷可提高CD4+淋巴细胞亚群的百分率,与免疫前相比,差异极显著或显著(P<0.01或P<0.05)。
- 马德慧薛江东姚春雨孟宪龙杨明霞刘国文
- 关键词:禽流感灭活苗黄芪多糖
- 旋毛虫新生幼虫cDNA文库构建及其特异性基因的筛选与鉴定
- 2008年
- 构建旋毛虫新生幼虫cDNA文库并对旋毛虫新生幼虫期特异性基因进行筛选与鉴定,筛选出期特异性的基因片段。用λZAPⅡ Express载体成功地构建了旋毛虫新生幼虫的cDNA文库,并用放射性同位素α-33P标记cDNA探针对筛选出的阳性克隆进行鉴定。所构建的cDNA文库容量为1.92×10^6,重组效率为98.6%,所有的克隆片段都在0.5~2.0kb之间,筛选获得7个阳性克隆,其大小在1.4kb左右;用放射性同位素α-32P标记cDNA探针后,与旋毛虫成虫、肌幼虫、新生幼虫及成虫/新生幼虫cDNA文库质粒DNA进行Southern印迹杂交,结果与新生幼虫和成虫、新生幼虫cDNA文库质粒DNA有杂交而与成虫、肌幼虫cDNA文库质粒DNA不杂交。该基因是新生幼虫期所特有的cDNA片段。
- 姚春雨汪明孙国权
- 关键词:旋毛虫CDNA文库
- 旋毛虫期特异性基因的筛选与鉴定
- 2007年
- 对旋毛虫新生幼虫期特异性基因进行筛选与鉴定,结果表明:对新生幼虫cDNA文库进行核酸杂交筛选,获得7个阳性克隆,其大小在1.4 kb左右;用放射性同位素α-32P标记cDNA探针后,与旋毛虫成虫、肌幼虫、新生幼虫、成虫/新生幼虫cDNA文库质粒DNA进行Southern印迹杂交,结果与成虫/新生幼虫、新生幼虫cDNA文库质粒DNA有杂交而与成虫、肌幼虫cDNA文库质粒DNA不杂交,因此该探针是新生幼虫期所特有的cDNA片段。
- 姚春雨汪明
- 关键词:旋毛虫
- 旋毛虫新生幼虫期特异性T_(314)全长cDNA的克隆及表达被引量:6
- 2003年
- 利用 PCR将旋毛虫新生幼虫期特异性全长 T31 4c DNA的信号肽祛除后重组到原核表达载体 p ET- 2 8a。将重组质粒 p ET2 8- T31 4转入克隆菌 DH5α和表达菌 DE3,分别提取质粒进行酶切、测序鉴定。用 IPTG诱导培养重组表达菌DE3,做菌体裂解物外源基因表达产物的 SDS- PAGE分析。将重组质粒表达的融合蛋白免疫家兔制备抗血清 ,采用Western blot检测 T31 4c DNA在旋毛虫不同发育时期的表达情况及其天然表达产物的相对分子质量。测序结果显示 :外源 T31 4c DNA的 PCR产物在重组质粒 p ET2 8- T31 4中阅读框架正确 ;SDS- PAGE分析结果显示 :经 IPTG诱导后转化菌 DE3的裂解产物与对照菌相比出现了 1条相对分子质量约为 390 0 0的新条带 ,大小与外源 c DNA融合蛋白的理论推导值 3880 0相符 ;Western blot检测结果显示 :T31 4c DNA的天然表达产物仅存在旋毛虫新生幼虫 ,不存在于成虫与肌幼虫 ,且相对分子质量大小与其在原核重组质粒中表达产物相同。
- 吴秀萍刘明远陈启军卢强付宝权姚春雨P.Boireau
- 关键词:旋毛虫基因克隆基因表达特异性基因
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白在疫苗上的应用研究进展被引量:2
- 2016年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是影响养猪业发展的主要病原。GP5蛋白是PRRSV的主要糖蛋白,是中和抗体的主要靶标。因此,GP5蛋白的研究在PRRSV感染的诊断和新型基因工程疫苗的研发上具有重要意义。近年来,对于GP5蛋白的研究取得了重要的进展,本文就GP5蛋白的特性、功能和应用等方面进行综述。
- 姚睿智樊宏超邓清华姚春雨马德慧
- 关键词:GP5蛋白基因工程疫苗
- 旋毛虫属分类方法研究进展被引量:1
- 2009年
- 姚春雨汪明刘明远付宝权
- 关键词:旋毛虫病分子生物学分子遗传学物种进化分子水平