付笑迎
- 作品数：29 被引量：115H指数：7
- 供职机构：深圳市儿童医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 人肠道正常粘膜组织与外周血中记忆性IL-22^+T淋巴细胞频率及表型的比较被引量：1
- 2011年
- 目的比较人肠道正常粘膜组织与外周血中IL-22+T淋巴细胞的频率及其表型特征。方法分离人肠道正常粘膜与外周血中单个核细胞,anti-CD3+anti-CD28刺激后,采用流式细胞术(FACS)检测IL-22的产生及其与IFN-γ、IL-17的关系,分析IL-22+T淋巴细胞CD45RO,CD62L,CCR7,CCR6,CCR10,CCR4等表面分子的表达。结果与anti-CD3+anti-CD28刺激外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞产生少量的IL-22(0.6%;0.57%)相比,肠道粘膜CD4+T细胞产生大约3.15%的IL-22,CD8+T淋巴细胞产生4%左右的IL-22。此外,肠道粘膜CD4+和CD8+T细胞中存在一群产生IL-22并独立于Th1、Th17,Tc1、Tc17的细胞亚群。肠道粘膜IL-22+T细胞表达较高比例的CD45RO,其中部分细胞表达CCR7,而较少表达CD62L。进一步研究表明,肠道粘膜CD4+IL-22+和CD8+IL-22+T细胞表达较高水平的CCR10(55.3%;73.9%),部分细胞表达CCR6或CCR4。结论人肠道正常粘膜组织中IL-22主要由效应型或中央型记忆T细胞产生,部分IL-22+T细胞独立于Th1、Th17,Tc1、Tc17细胞亚群。
- 王慧刘昀付笑迎兰平何晓生吴长有
- 关键词：IL-22T淋巴细胞表型特征
- E6流式细胞仪检测CD34^+细胞百分比和绝对计数方法的建立被引量：2
- 2020年
- 目的应用E6流式细胞仪建立检测CD34^+细胞百分比和绝对计数的方法并进行验证。方法收集2019年1月至2019年12月在深圳市儿童医院血液肿瘤科因重型β-地中海贫血行异基因造血干细胞移植的患儿89例,以移植患儿供的骨髓或外周血为研究对象,应用E6流式细胞仪建立ISHAGE法检测CD34^+细胞百分比,应用"流式直接体积法"计算CD34^+细胞的绝对计数,并结合白细胞手工计数对CD34^+细胞绝对计数的结果进行验证。结果结合白细胞手工计数对CD34^+细胞的绝对计数结果的正确性进行验证,Pearson相关分析结果显示:供者外周血干细胞或骨髓干细胞CD34^+细胞绝对计数流式结果与CD34^+细胞绝对计数计算结果高度相关(r=0.93,R2=0.87,P<0.0001);两次供者外周血干细胞或骨髓干细胞白细胞计数和单个核百分比结果高度一致;同样,两次供者外周血干细胞或骨髓干细胞CD34^+细胞流式计数百分比和绝对计数结果亦高度一致。结论应用E6流式细胞仪的"流式直接体积法"计算CD34^+细胞绝对计数结果准确,可以作为造血干细胞移植术前计算供者外周血干细胞或骨髓干细胞CD34^+细胞数目的可靠依据。
- 付笑迎张小玲刘梦桐余阅陈诗杨彭冬邝雅贤刘四喜陈运生
- 关键词：异基因造血干细胞移植CD34^+细胞绝对计数
- 结核性胸液中NK细胞的活化分子及记忆表型的多色流式分析
- 目的：探讨结核性胸液(PFCs)中NK细胞的活化标志及记忆相关表型的表达.方法：以正常人外周血单个核细胞(PBMCs)作对照,利用多种标记抗体进行表面标志染色,并用多色流式细胞术分析结核性胸液中NK细胞活化及记忆相关表面...
- 付笑迎
- 关键词：NK细胞结核性胸膜炎免疫记忆
- 结核性胸液中NK细胞的亚群及表型功能特征分析被引量：7
- 2012年
- 目的探讨结核性胸液(PFC)中NK细胞的亚群分布及表型功能特征。方法以正常人外周血单个核细胞(PBMC)作对照,利用多种标记抗体进行表面和细胞内细胞毒效应分子染色,再利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析结核性胸水中NK细胞亚群的异质性和生物学特征。结果 NK细胞可以分为CD56+CD16-、CD56+CD16+和CD56-CD16+三个亚群,与PBMC中的NK细胞相比,PFC中CD56+CD16-NK细胞亚群明显增加,而CD56+CD16+NK细胞亚群比例明显下降;结核性胸液中CD56+CD16-及CD56+CD16+NK细胞亚群表达较低水平的颗粒酶B,CD107a/b的比例在结核性胸液中3个NK细胞亚群中均有增加(P<0.05)。结核性胸液中NK细胞表达高水平表面抑制性受体NKG2A及表面活化性受体NKG2D。活化分子CD69及CD25在结核性胸水中NK细胞上的表达均有所增加(P<0.05)。结论结核性胸液中的NK细胞比例与PBMC相比发生变化,结核性胸液中的NK细胞表达低水平杀伤分子颗粒酶B但表达高水平活化分子CD69,提示NK细胞在结核感染中发挥其生物学功能。
- 付笑迎李丽李琴乔丹劳穗华杨滨燕吴长有
- 关键词：NK细胞结核性胸膜炎颗粒酶B
- 深圳地区493例儿童变应性鼻炎过敏原检测结果分析被引量：8
- 2017年
- 目的探讨深圳地区儿童变应性鼻炎的过敏原分布情况,以便为该地区儿童变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的预防、诊断和治疗提供理论依据。方法选取2015年1月至2015年12月在本院就诊的过敏性鼻炎患儿493例为研究对象,采用德国Mediwiss过敏原体外检测系统,应用免疫印迹法对其进行过敏原检测并对检测结果进行统计分析。结果 493例变应性鼻炎患儿中,过敏原检测结果阳性414例(83.9%),吸入性过敏原阳性率为79.3%,其中户尘螨阳性率最高,占65.1%;其次是狗毛(25.5%)、真菌组合(15.8%)、猫毛(13.8%)和屋尘(11.1%);食入性过敏原阳性率为45.2%,主要为牛奶(30.4%)、腰果(14.8%)、鸡蛋白(12.4%)、蟹(8.9%)、虾(7.7%)和牛肉(1.8%);吸入性和食入性均阳性者200例(40.5%);不同年龄组患儿吸入性和食入性过敏原阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。患儿血清总IgE阳性率为76.5%(377/493),总IgE阳性率明显低于特异性IgE阳性率(83.9%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论户尘螨是诱发深圳地区儿童变应性鼻炎的主要吸入性过敏原;牛奶是诱发变应性鼻炎主要的食入性过敏原。在患变应性鼻炎的儿童中,以单纯吸入性过敏原阳性(38.7%)和混合吸入和食入性过敏原阳性(40.5%)为主,单纯食入性过敏原阳性(4.7%)的患儿很少。联合检测血清总IgE和过敏原特异性IgE可提高变应性鼻炎诊断的准确性。
- 孙丽芳付笑迎杨方华刘亚丽袁艳施玉芳
- 关键词：变应性鼻炎吸入性过敏原总IGE特异性IGE
- 腺病毒与呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群差异分析被引量：12
- 2018年
- 目的比较腺病毒(adeno virus,ADV)与呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)肺炎患儿及健康儿童外周血淋巴细胞亚群的百分比例并探讨其临床意义。方法收集2014年1月~2015年12月期间在深圳市儿童医院住院的腺病毒肺炎患儿(ADV组)30例,呼吸道合胞病毒肺炎患儿(RSV组)30例(入选依据:60例病毒感染患儿肺部听诊均可闻及中小湿啰音,肺部X线片有点状或片状阴影,临床诊断为肺炎,直接免疫荧光法检测相关病毒抗原结果为阳性且无其他病原感染的临床及实验室证据)以及健康体检儿童(健康组)35例,应用流式细胞术检测上述研究对象外周血中CD3^+T细胞,CD3^+CD4^+T细胞,CD3^+CD8^+T细胞,CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^-CD19^+B细胞的百分比并比较各组间的差异。结果与健康组相比较,ADV组[(55.04±8.45)%vs(69.07±9.30)%,t=3.32,P=0.002]与RSV组[(60.90±11.12)%vs(69.07±9.30)%,t=2.43,P=0.004]的CD3^+T细胞比例均下降,差异具有统计学意义(P<0.01),特别是ADV组[(21.26±6.16)%vs(26.97±7.63)%,t=1.87,P=0.04]与RSV组[(21.56±7.06)%vs(26.97±7.63)%,t=1.68,P=0.04]的CD3^+CD8^+T细胞比例明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);与此同时,与健康组相比,ADV组[(28.22±5.16)%vs(17.06±6.42)%,t=3.25,P=0.001]和RSV组[(29.14±10.96)%vs(17.06±6.42)%,t=2.79,P=0.009]的CD3^-CD9^+B细胞比例升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与健康组[(13.54±5.95)%,t=2.01,P=0.03]及ADV组[(16.26±8.34)%,t=2.89,P=0.005]相比,RSV组的CD3^-CD56^+NK细胞亚群比例[(9.59±5.54)%]下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论腺病毒肺炎和呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群比例存在统计学差异,病毒性肺炎患儿体内可能存在免疫应答紊乱。
- 付笑迎秦慧郎家庆杨方华马东礼陈运生
- 关键词：腺病毒肺炎呼吸道合胞病毒肺炎淋巴细胞亚群
- EB病毒感染传染性单核细胞增多症和噬血细胞综合征患儿免疫功能分析被引量：13
- 2018年
- 目的探讨EB病毒感染传染性单核细胞增多症(EBV-IM)和嗜血细胞综合征(EBV-HPS)患儿外周血淋巴细胞亚群、免疫球蛋白及血游离EBV-DNA拷贝数的改变特点。方法选取2015年1月至2017年12月经深圳市儿童医院血液科诊治的51例EBV感染患儿为实验组,其中EBV-IM患儿28例,EBV-HPS患儿23例,选取35例体检健康的儿童为对照组。全部受检者采用流式细胞技术检测外周血淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、NK细胞的绝对计数及百分比,应用血清免疫球蛋白分析仪检测IgG、IgM、IgA水平,实时荧光定量PCR检测EBV-DNA拷贝数。结果实验组与对照组受检者的淋巴细胞计数、淋巴细胞各亚群计数及百分比比较,差异均有显著统计学意义(P<0.01);EBV-IM组与对照组、EBV-HPS组比较,淋巴细胞计数、CD3+T淋巴细胞计数、CD8+T淋巴细胞计数及百分比升高、CD4+/CD8+值、CD19+B淋巴细胞百分比降低,差异有统计学意义(P<0.05);EBV-HPS组与对照组比较,淋巴细胞计数、CD3+T细胞计数、CD4+T淋巴细胞计数、CD19+B淋巴细胞计数及NK细胞计数降低,CD3+T淋巴细胞百分比、CD8+T淋巴细胞百分比升高,差异有统计学意义(P<0.05);EBV-IM组患儿的IgG、IgM、IgA较对照组及EBV-HPS组升高,差异有统计学意义(P<0.05),而EBV-HPS组与对照组免疫球蛋白比较,差异无统计学意义(P>0.05);EBV-HPS组较EBV-IM组EBV-DNA拷贝数升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 EBV-IM与EBV-HPS患儿外周血淋巴细胞亚群存在显著差异,各亚群细胞百分比结合绝对计数有助于两者的诊断及鉴别诊断;免疫球蛋白检测及EB病毒拷贝数分析可进一步辅助EBV-IM及EBV-HPS的鉴别诊断。
- 张霞付笑迎蔡德丰黄娟肖伟伟陈诗杨
- 关键词：EB病毒淋巴细胞亚群传染性单核细胞增多症噬血细胞综合征
- 人外周血CD3^+CD56^+NKT与Vα24^+iNKT、Vβ11^+iNKT细胞的关系及NKT亚群和细胞因子分泌的研究被引量：7
- 2013年
- 目的探讨正常人外周血中CD3+CD56+NKT细胞的频率与CD3+Vα24+iNKT、CD3+Vβ11+iNKT细胞之间的关系、表型特征及细胞因子的表达。方法应用流式细胞术,检测CD3+CD56+NKT细胞频率与CD3+Vα24+iNKT和CD3+Vβ11+iNKT细胞之间的关系、CD4及CD8表面分子及细胞因子的表达。结果正常人外周血CD3+CD56+NKT细胞的频率为6.39%±2.34%;只有1.5%CD3+CD56+NKT细胞表达TCRVα24和1.2%CD3+CD56+NKT细胞表达TCRVβ11,0.7%CD3+CD56+NKT细胞同时表达TCRVα24和TCRVβ11;根据CD4和CD8表面分子的表达,可将CD3+CD56+NKT细胞分为66.9%CD4+、20.4%CD8+和11.6%CD4-CD8-3个亚群;当细胞刺激后,50.2%CD3+CD56+NKT细胞分泌IFN-γ,3.3%分泌IL-4,1.5%同时分泌IFN-γ和IL-4。此外,CD4+NKT、CD8+NKT和CD4-CD8-NKT 3群细胞分泌IFN-γ的频率分别为45.1%、70.3%和55.4%,分泌IL-4的频率为6.5%、7.0%和6.9%,同时分泌IFN-γ和IL-4的频率为2.4%、4.7%和3.1%。结论大多数CD3+CD56+NKT细胞与CD3+TCRVα24+iNKT和CD3+TCRVβ11+iNKT细胞是不同的NKT细胞亚群,CD3+CD56+NKT细胞频率小,能分泌大量的细胞因子,参与机体的免疫反应。
- 龚英李子涛付笑迎张燕楠王慧杨滨燕吴长有
- 关键词：NKT细胞亚群细胞表型细胞因子
- IL-12依赖于TRAIL途径增强NK细胞对Jurkat细胞的杀伤功能被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨IL-12增强正常人NK细胞对Jurkat细胞杀伤功能的相关机制。方法:纯化正常人NK细胞,分为加或不加IL-12两个刺激组,通过基因芯片筛选差异基因,并通过流式细胞术在单个细胞水平检测相关杀伤分子的表达。结果:基因芯片系统结果显示IL-12刺激组和未刺激组相比,17种基因具有显著性差异(fold change≥10),其中5种基因上调,12种基因下调。在IL-12的刺激作用下,TRAIL的表达在CD56+CD16+和CD56-CD16+NK细胞上显著增加。同时,Jurkat细胞亦高表达TRAIL受体TRAIL-R2(DR5)。TRAIL中和抗体RIK-2可以阻断IL-12诱导的NK细胞对Jurkat细胞的杀伤功能。结论:TRAIL是IL-12增强正常人NK细胞对Jurkat细胞杀伤功能的主要途径之一。
- 付笑迎杨滨燕黄俊琪龙喜贵吴长有
- 关键词：NK细胞IL-12TRAILJURKAT细胞杀伤功能
- 隐睾患儿血清抗苗勒管激素水平研究被引量：2
- 2018年
- 目的分析不同年龄及不同类型隐睾患儿血清抗苗勒管激素(AMH)水平差异,探讨其在睾丸发育评价中的作用。方法选择60例单纯性隐睾患儿为病例组,52例健康体检儿童为对照组,分别检测两组儿童血清AMH水平,并比较两者之间的差异。结果 (1)病例组AMH水平低于对照组(P<0.05),>6~11岁隐睾患儿与健康儿童间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)双侧隐睾组AMH水平低于单侧隐睾组(P<0.05),>6~11岁双侧隐睾与单侧隐睾患儿间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)高位型隐睾组AMH水平低于低位型隐睾组(P<0.05),>3~11岁高位型隐睾和低位型隐睾患儿间差异无统计学意义(P>0.05)。(4)AMH水平与年龄呈负相关性,与睾丸发育情况呈正相关性。结论 AMH可作为反映隐睾患儿睾丸发育状况的一项重要指标。
- 罗小娟郎家庆曹科付笑迎李飞赖建威李嘉辉陈运生马东礼
- 关键词：隐睾间质细胞儿童
